适用于猪场检测的病毒核酸提取试剂盒该如何选择?

虽然市面上病毒核酸提取试剂盒的产品非常多,但按照提取类型和提取方式不同大概可以分为以下几类:

1.提取类型

主要可以分为DNA提取、RNA提取和DNA/RNA共提取。DNA提取和RNA提取的主要区别在于:DNA易溶于高盐、高pH,而RNA易溶于低盐、低pH,且RNA提取还需要抑制RNase的活性。DNA/RNA共提取则需要调整一个既适合于DNA也适合于RNA的盐浓度和pH,且抑制RNase的活性,如何将两个需求矛盾的产品良好的融合在一起,也对各企业提出了更高的技术要求。

2.提取方式

从提取方式划分,主要可分为机提和手提。目前市面上的机提主要是磁珠法的自动化提取,其具有自动化程度高、操作简便、提取通量高等特点。手提可分为磁珠法手提和柱式法手提,适用于样本量较少的情况。汇总比较如表1所示。

二、提取试剂盒该如何选择?

在牧场条件下,病原种类较多,需检测的样本类型也是复杂多样,对核酸提取试剂的适应性就有了更高的要求。我们可以结合日常检测的需求,选择一款满足自身牧场需要的产品类型。

(1)同时满足DNA/RNA提取

猪病毒类型多样,如果选择DNA或RNA单提取试剂盒,需要采购两种不同的试剂盒,采购需求就会比较混乱,而且稍不注意就会混用,导致检测提取的失败,这种情况也是经常发生,所以一款能同时满足DNA/RNA共提取的产品就可以避免出现这种情况。

(2)操作简便快捷、高通量

全自动磁珠法核酸提取在几种提取方式中是最为简单的,可以减少人工操作,减少人为误差,并且可以高通量提取,适应于中大型猪企每天做大量样本检测,但是全自动提取设备的价格较贵。对于每天只有少量样本检测需求的企业来说,磁珠手提法可以作为一个优选,它相对柱式手提法操作更为简便,对设备要求相对更低。

(4)提取效率是根本

对于不同的病毒类型(DNA或者RNA病毒)、不同的病毒浓度(强阳、中阳、弱阳)、不同的样本类型(血液、组织、环境、饲料等),都应保证提取试剂盒具有较高的提取效率,这也是确保检测结果准确性的重要保障。

(5)样本适应性强

不同的病原体具有不同的组织嗜性,且排毒方式和载量也各不相同,在疫病诊断过程中,样本类型的差别较大,并且在生物安全防控过程中检测的样本范围也不再仅仅局限于宿主本身,这就导致了在猪场疫病检测和监测过程中,遇到的样本类型会更加复杂。对于磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒而言,裂解液的优化、磁珠的选择以及两者之间的搭配,是决定其是否具有良好的样本适用性的关键因素。

三、日常遇到的小问题

由于核酸提取技术得到广泛的应用,在日常检测中也遇到了很多有趣的问题,今天小编也选取了几个常见的问题,跟大家简单聊一聊。

问题一、当前用量最大的新冠专用提取试剂盒和非瘟用提取试剂盒有什么区别?

(1)提取病毒类型和大小的不同。SARS-CoV-2属于RNA病毒,基因组大小约为30kb;ASFV属于DNA病毒,基因组大小为170~193kb;两者提取的技术难度有很大区别。

(2)样本类型的差异。SARS-CoV-2的样本主要是咽拭子、鼻拭子和环境样本,样本类型相对单一;ASFV的样本包括全血、血清、血浆、唾液、精液、鼻咽拭子、环境、组织、粪便、饲料等,样本类型纷繁复杂。

当前牧场用提取试剂盒虽然有广泛的适应性,但难免也会碰到很多问题,小编将ASFV提取中经常遇到的样本适用性差的现象和原因总结如下,可供大家参考:

问题二、不加蛋白酶K,会影响病毒DNA/RNA的提取效率吗?

在核酸提取中,蛋白酶K的主要作用是:消化蛋白,尤其是消化核酸-蛋白复合体中的蛋白,从而使核酸释放。真核生物细胞核中的核酸大部分是以染色体的形式存在,在提取真核生物DNA时,如果不加蛋白酶K,提取总量会大大降低。而病毒的结构相对比较简单,主要由蛋白外壳和拟核组成,无染色体结构,且核酸含量相对较少。所以,对于病毒DNA/RNA,通过优化提取试剂盒的裂解细胞、变性蛋白以及去除杂质的能力,完全可以做到不使用蛋白酶K,也能保证较高的提取效率。

问题三、样本量越多,提取得到的核酸岂不是越多?

样本量增加,如果相应的裂解液、结合液以及吸附核酸的介质液相应增加,提取到的核酸也会相应增多。但对于磁珠法预分装试剂而言,增加样本量,相应的裂解结合液、磁珠没有增加,即相应的裂解、结合能力没有提高,提取到的核酸有可能不会增加反而减少,而且增加样本量会使2.2mL深孔板内总体积增加,提取时存在溶液溢出造成混样的风险。对于柱式法而言,如果只是增加样本量,提取效果也可能会适得其反。

问题四、核酸提取效率如何评价?

(1)用标准物质来测定核酸提取试剂盒的提取灵敏度;

(2)与市面上认可度较高的提取试剂盒对比提取真实的病毒样本,分别提取不同样本类型的强阳、中阳、弱阳样本,比较两者的Ct值。

我们通过测评市面上很多提取产品过程中发现,核酸提取试剂盒的质量差异较大,差异不单单是体现在提取的效率,还有样本的适应性上面。这就要求我们自身要提高检验产品质量的能力,从而选出一款真正适应牧场检测需求的产品。

THE END
1.核酸提取试剂盒核酸提取试剂盒 磁珠纯化法是一种简单、快速、灵敏度高、检材条件适应性强的DNA/RNA提取纯化方法,适用于绝大多数的微量DNA/RNA的提取。运用纳米技术对磁珠纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后,制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠,使其能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合,能明显提高极微量检材的检出率,并且操...http://www.geneally.com.cn/productlist.asp?u=4w540
2.核酸提取试剂盒核酸包括DNA,RNA,是分子生物学研究的基础核心。我公司多年深耕核酸提取产品的研究;产品涵盖质粒提取试剂盒,DNA产物纯化及凝胶回收试剂盒,基因组DNA提取试剂盒,RNA提取试剂盒,磁珠法提取试剂盒五大板块系列产品。 质粒提取DNA产物纯化及凝胶回收基因组DNA提取RNA提取磁珠法核酸提取 ...http://www.zomanbio.com/products.php
3.核酸提取纯化试剂盒1.磁珠法核酸提取试剂盒 2.磁珠法提取DNA试剂盒 3.DNA提取试剂盒(离心柱法) 4.磁珠法RNA提取试剂盒 5.RNA提取试剂盒(离心柱法) 6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒 7.反转录试剂盒 8.胶回收试剂盒 9.PCR纯化试剂盒 10.病毒核酸提取试剂盒(磁珠法) ...https://www.animalmodel.cn/htmlmodel/jswzxx/8939376.html
4.核酸提取试剂盒(磁珠法)生产厂家之江招商代理核酸提取试剂盒(磁珠法)生产厂家:上海之江生物科技股份有限公司,品牌:之江,全国招商,诚招代理。用途:用于核酸的提取、纯化步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。https://ylqx.qgyyzs.net/business/zs172972.htm
5.核酸提取试剂盒(磁珠法)样本裂解后,核酸高效结合于磁珠表面,再经过清洗、洗脱等步骤,可得到高纯度的核酸产物,可直接用作PCR模板、杂交等下游分子生物学实验。整个操作过程简单、快速且高效。 【包装规格】 货号 产品名称 规格 备注 SKY203-1 核酸提取试剂盒(病毒DNA/RNA核酸提取型)(磁珠法) 16T*2/盒、16T*4/盒 SKY203-2 50次/盒 ...http://www.mabsky.com/article/51/31.html
6.核酸提取试剂盒(磁珠法)核酸提取试剂盒(磁珠法) 1、产品信息 本试剂盒对核酸具有极强的富集能力,可以快速达到分离纯化核酸的目的。 2、产品特点 适用仪器:全自动核酸提取仪; 标本类型:鼻咽拭子、灌洗液、血清、血浆、细胞培养液、组织匀浆液上清等; 提取时间短:提取过程只需13min;...http://www.beierbio.com/product_v.asp?id=314
7.DNA核酸提取试剂盒新冠RNA核酸提取试剂盒游离DNA提取试剂盒DNA核酸提取试剂盒,新冠RNA核酸提取试剂盒,游离DNA提取试剂盒,数字PCR仪选迈杰。提供生物标志物与伴随诊断试剂盒定制化开发。已获得欧盟ISO13485 认证,满足IVD/CDx产品研发要求。http://www.medxtmc.cn/product/sbhc.html
8.游离核酸大量提取试剂盒(磁珠法)BTN170401特异性显色基质鲎试剂盒32次 WE0162高纯质粒小提试剂盒50次|200次 WE0396游离DNA样本保存管(5ml)5ml×5支|5ml×50支 ALH125组织细胞基因组DNA提取试剂盒50次|100次|200次 QN0903质粒大量提取试剂盒10T GL2817核酸提取试剂盒50T 售后服务 https://www.bio-equip.com/show1equip.asp?equipid=4448358
9.核酸提取试剂产品中心FinePure无内毒素质粒大提试剂盒(升级型) 货号:D919 查看详情 FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒(高兼容版) 目录号:Y522-G40 查看详情 FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒 目录号:Y502-G45 查看详情 FinePure新鲜植物基因组柱式提取试剂盒 目录号:D302 操作简便无需水浴,冰浴 查看...http://www.genfine.com/product/7/
10.核酸提取试剂盒(磁珠法)生物磁珠自动核酸提取仪生产厂家核酸提取试剂盒(磁珠法),生物磁珠,自动核酸提取仪生产厂家:主营磁珠法核酸提取试剂盒,病毒/细菌/真菌/植物/动物/全血基因组DNA/RNA提取试剂,PCR纯化试剂,羧基磁珠,硅基磁珠等纳米微球,32/96/192孔自动核酸提取仪http://lyhqbio.com/
1.DNA提取试剂盒–DNA纯化赛默飞ThermoFisherScientific为从种类繁多的样本中分离和纯化基因组与质粒DNA,赛默飞提供了多种DNA提取试剂盒,可处理组织、细胞、血液、血清、植物和法医学样品。https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/dna-extraction.html
2.第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒品牌:上海谷研进口国产人细胞,Calu-1细胞Sandwich ELISA, Double AntibodyE-钙粘附分子(E-Cadherin)2-8℃ for 6 months用于Illumina平台的Small RNA-Seq Library Prep Kit试剂盒 人细胞,Calu-1细胞 2-硝基-4-异丙基甲苯 人细胞,NCI-H2126细胞 茴香酸乙酯 第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒0.188ng/ml大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELI...https://china.guidechem.com/trade/pdetail23221893.html
3.磁珠法核酸提取试剂磁珠法核酸提取试剂磁珠法核酸提取试剂 天隆磁珠法核酸提取系列试剂,涵盖10大类百余种试剂,样本来源包含全血、血清、拭子洗液、粪便、组织等多种类型,试剂规格丰富多样,包括预封装(20T/32T/40T/48T/64T/96T/480T/1792T)及非预封装(20T/50T/200T)等。 丰富的试剂品种及多样的试剂盒规格能够满足您的各类提取需求。人性化的预...https://www.medtl.com/products/clinical-reagents/magnetic-bead-method
4.核酸提取试剂盒华晨阳自动化核酸提取试剂盒 【预期用途】【检测原理】【储存条件及有效期】【样本要求】【核酸提取试剂使用方法】【检验方法的局限性】【产品性能指标】【注意事项】... 核酸提取试剂,游离DNA提取试剂 ①通用名称:核酸提取或纯化试剂②英文名称:NucleusAcid/DNAExtractionsKits③规格型号:CY-F006-10(50preps-细胞)、CY-F00...https://www.huachenyang.com/tag/%E6%A0%B8%E9%85%B8%E6%8F%90%E5%8F%96%E8%AF%95%E5%89%82%E7%9B%92/
5.粪便核酸提取试剂盒核酸提取磁珠与试剂盒产品中心粪便核酸提取试剂盒70411-100100 rxns盒¥2580.00 BeaverBeads? Stool DNA Kit适用于从粪便样本中快速、高效地提取人和肠道菌群基因组DNA。提取过程采用超顺磁性微球,使用预制的缓冲液可对样本进行直接提取,且可根据加入的样本量来调整反应体系。本产品既可以进行手动操作,也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取...https://www.beaverbio.com/products/list/692.html
6.核酸提取试剂盒(磁珠法)渝械备20180096号【包装规格】A-100和A-200:32 人份/盒;96 人份/盒;B-100和B-200:32人份/盒;16人份/盒;8人份/盒。 产品有效期12个月 产品描述A型试剂盒主要由提取试剂I、提取试剂II、洗脱液、磁珠溶液、Proteinase K(蛋白酶K)组成;B型试剂盒主要由Proteinase K(蛋白酶K)和96孔板预分装核酸提取试剂组成。https://db.yaozh.com/qxba/7080906410000046.html
7.核酸提取试剂盒的专业制造商爱森爱森作为一家核酸提取试剂盒的专业制造商,已经形成了涵盖全血,血清,植物,动物和其他样品的专业核酸自动纯化程序。https://www.aisenbio.com/?lang=zh-hans
8.DNA/RNA核酸提取试剂盒系列产品(一)公司新闻DNA/RNA 核酸提取试剂盒系列产品(一) 血清血浆游离DNA提取试剂盒(小提) 血清血浆游离DNA提取试剂盒(小提)产品特点: 1、 操作简便快速,可在半小时内获得理想的DNA; 2、 提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9; 3、 产量更高,较国内同类产品高出20%;...https://absin.biomart.cn/news/3055864.htm
9.SARSCoV2检测试剂盒,核酸提取试剂盒,荧光PCRHAEMOCERT?结直肠癌筛查试剂盒 更多+ Hymon? 游离核酸提取试剂盒 更多+ Hymon? 血胃癌筛查 更多+ Hymon? 膀胱癌筛查 联系我们获取更多信息 根据您的需求定制,立即联系我们 立即询问 专业技术团队 我们的团队由高素质员工组成,接受过国内外专业培训,并不断鼓励更多人加入。我们还将国外最先进的技术引进到...http://zh.hymonbio.com/
10.病毒DNA/RNA核酸提取试剂盒YS330101病毒DNA/RNA核酸提取试剂盒针对高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含猪瘟病毒野毒株基因组模板的情况下,PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。 详细内容 公司简介 http://www.app17.com/supply/offerdetail/8360231.html
11.华大智造核酸提取试剂盒家族图鉴:多款提取利器,适配更多下游应用...目前,在样本前处理产品方面,华大智造已推出了多款可适用于多种不同样本类型的核酸提取试剂盒,可以满足用户自动化提取的需求。华大智造持续为用户提供提取效率高、产物纯度高的提取试剂盒,以确保提取产物适合于更多的下游应用,如PCR,RT-qPCR, 测序等。 https://www.mgitech.cn/news/739/
12.RNA核酸提取及纯化试剂盒RNA核酸提取及纯化试剂盒 发布日期:2022-12-30 更新日期:2024-11-13 产品详请 产地 品牌 货号 用途 英文名称 包装规格 CAS编号 别名 纯度% 分子式 是否进口 技术的优越性: (一)灵敏度高 虽然酶活性调节ELISA方法的灵敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,检测的灵敏度远比RIA高。根据质量作用定律。即...http://www.biotech021.com/products/show27064441.html
13.动植物血液组织样本核酸提取FFPEDNARNA提取试剂盒成都新百基生物科技有限公司是一家集磁珠法核酸纯化试剂盒的研发、生产、销售及整体解决方案服务于一体的国家级高新技术企业。公司成立于2014年3月,位于成都市龙泉驿区国家级经济技术开发区。我司通过自主研发,拥有创新的缓冲液体系和磁性微球颗粒生产技术,针对困难样本https://www.bio-keystone.com/
14.核酸提取技术市场和品牌概述提取试剂盒市场分析采用CRISPR技术来鉴定和验证新疗法的兴起促进了药物发现过程。基因组编辑技术的结合和研发成本的下降进一步加速了药物发现过程。这些因素的融合推动了制药和生物技术公司在其药物开发项目中更多地使用核酸提取试剂盒。 地区分布 北美在2019年的收入份额最大。这归因于核酸分离在食品加工、农业和环境检测中的应用日益广泛。美...https://blog.csdn.net/Bio12345/article/details/113245369