2、1.5ml离心管4502502ml离心管450250BufferPCR-A2ml20ml100mlBufferW2concentrate2.4ml24ml272mlEluent1ml5ml25ml说明书111BufferPCR-A:DNA结合溶液。室温密闭贮存。BufferW2concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%无水乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。Eluent:2.5mMTris-HCl,pH8.5,室温密闭贮存。二、注意事项二
3、、注意事项1.BufferPCR-A含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。2.DNA分子呈酸性,建议在2.5mMTris-HCl,pH8.5洗脱液中保存。三、实验准备三、实验准备1.准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。2.第一次使用前,BufferW2concentrate按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。3.使用前,检查BufferPCR-A是否出现沉淀,若出现沉淀,应于65C温浴加热至沉淀完全溶解并冷却至室温后再使用
5、30英寸汞柱,缓慢吸走管中溶液。2A.加700lBufferW2,吸尽管中溶液。以同样的方法再用700lBufferW2洗涤一次。*确认在BufferW2concentrate中已按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇。*两次使用BufferW2冲洗能确保盐份被完全清除,消除对酶切反应的影响。3A.将制备管置于2ml离心管(试剂盒内提供)中,12,000g离心1min。4A.将制备管置于洁净的1.5ml离心管(试剂盒内提供)中,在制备管膜中央加25-30lEluent或去离子水,室温静置1min。12,000g离心
6、1min洗脱DNA。*将Eluent或去离子水加热至65将提高洗脱效率。B.离心法离心法1B.在PCR、酶切、酶标、或测序反应液中,加3个体积的BufferPCR-A(若BufferPCR-A不足100l,加至100l);混匀后,转移到制备管中,将制备管置于2ml离心管(试剂盒内提供)中,12,000g离心1min,弃滤液。2B.将制备管置回2ml离心管,加700lBufferW2,12,000g离心1min,弃滤液。*确认在BufferW2concentrate中已按试剂瓶上的指定体积加入无水
7、乙醇。3B.(可选步骤)将制备管置于离心管中,将制备管置回2ml离心管,加400lBufferW2,12,000g离心1min。*建议提醒顾客:从离心机中取出2ml离心管时。注意:不要让管底的BufferW2接触到制备管。4B.将制备管置于洁净的1.5ml离心管(试剂盒内提供)中,在制备管膜中央加25-30lEluent或去离子水,室温静置1min。12,000g离心1min洗脱DNA。*将Eluent或去离子水加热至65将提高洗脱效率。五、流程图五、流程图加样品和3BufferPCR-A.如果需要的