4.关于体外诊断试剂临床试验检测结果不一致样本的确认(2017-11-02)
5.关于体外诊断试剂临床试验对比试剂/方法的选择(2017-11-02)
6.如何统计体外诊断试剂定量检测产品临床试验数据(2017-11-02)
7.关于体外诊断试剂临床试验入组病例样本的常见问题(2017-11-02)
8.欧盟体外诊断新法规主要变化情况简介(2017-11-02)
9.人EGFR突变基因检测试剂注册申报现状及共性问题概述(2017-11-03)
10.海洛因滥用的特异性检测物：6-单乙酰吗啡(2017-11-15)
11.选择体外诊断试剂临床试验机构除法规要求资质外还应考虑的因素有哪些(2017-11-15)
12.在60℃条件下进行了终产品的加速稳定性试验，是否可以不限定产品的储运条件(2017-11-15)
13.产品货架有效期缩短，是否不需在许可事项变更申请中再提交技术文件(2017-12-05)
14.FoundationOneCDx伴随诊断产品概述(2017-12-21)
临床试验方案中应明确试验用体外诊断试剂和对比试剂检测结果不一致样本的判定依据，对临床试验中判定为检测结果不一致的样本应采用“金标准”或其他合理的方法进行复核，方案中应明确用于复核的“金标准”或方法。临床试验报告中应给出最终确认的结果或判定，如无需复核，应详细说明理由。
依据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》规定,对于新研制体外诊断试剂，采用试验用体外诊断试剂与诊断该疾病的“金标准”进行盲法同步比较；对于“已有同品种批准上市”的产品，可选择已上市产品作为对比试剂。
应充分了解所选择产品/方法的技术信息及性能，如方法学、临床预期用途、主要性能指标、校准品的溯源情况、阳性判断值或参考区间等，充分考虑对比试剂/方法与试验用体外诊断试剂的可比性，选择适当的对比试剂/方法进行试验，以便通过比对验证试验用体外诊断试剂的临床性能。
1.关于入组病例要求
临床试验中的临床样本是指按照临床试验方案进行入组的病例,所有入组病例应唯一且可溯源,病例入组应涵盖产品预期用途及干扰因素,充分考虑产品临床使用过程中声称的适应症及可能存在的干扰因素。临床样本应尽可能使用前瞻性样本，如有必要可使用部分回顾性样本，但同样应能够对病例进行溯源，并建议在临床试验方案中说明使用回顾性样本的理由。
2.关于总体样本例数要求
临床样本的总体例数应符合《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》的基本要求。其中阳性样本、阴性样本及干扰样本的分布应能够满足各临床机构分别统计及总体统计的要求，能够充分验证产品的临床性能，产品的预期用途应得到有效验证。
3.关于联检产品样本例数要求
对于多项联检产品，如多项毒品检测试剂，其临床样本应能够满足每项待测物的总样本数均符合《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》的要求，且样本分布合理，能够对该项检测进行统计分析并验证其临床性能。
4.关于多位点基因突变检测产品样本例数要求
对于多位点基因突变检测的产品，其临床总样本例数应符合《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》的要求，其中每个型别阳性样本、阴性样本例数均应满足统计学意义，应能充分验证各型别检测的临床性能。对于其中临床罕见型别，其临床样本中阳性样本可酌情减少，但应确保一定例数进行较充分的临床性能验证。
5.关于用于罕见病检测的体外诊断试剂的临床减免
用于罕见病检测的体外诊断试剂产品，临床阳性样本可酌情减免，临床总阳性样本数应具有统计学意义。
6.关于临床样本类型的要求
样本类型应与说明书声称一致,对于涵盖不同样本类型的情况，如果产品声称的不同样本类型具有可比性，如血清、血浆，应以一种样本类型为主，样本量满足《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》要求进行临床试验，同时增加其他类型样本与上述样本比对的临床试验，比对样本例数应满足第三类产品至少为200例、第二类产品至少为100例的要求,并在至少2家(含2家)临床试验机构开展临床试验；如不同的样本类型不具有可比性，一种样本类型样本量满足《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》要求，其余样本类型与对比试剂同样进行样本比对，每种样本类型与上述情况相比酌情增加。
2017年5月5日，欧盟官方期刊（OfficialJournaloftheEuropeanUnion）正式发布了欧盟体外诊断医疗器械法规（IVDR，EU2017/746）。2017年5月25日，IVDR正式生效，体外诊断医疗器械指令（IVDD，98/79/EC）被体外诊断医疗器械法规取代。IVDR从几个方面对原有IVDD框架进行了修订与完善，如定义与概念、各方职责与义务、风险分类管理、符合性评估流程、公告机构的指定与管理、产品性能评估和性能研究、加强市场监管要求等。IVDR法规共九章113条，并附有15个附录。
一、关于法规过渡期
过渡期结束后，所有体外诊断器械必须满足IVDR的要求，即自2022年5月26日起，公告机构依据IVDD发布的任何通知将失效。
在2017年5月25日之前，公告机构根据IVDD签发的证书在证书所示期限到期前继续有效，但是根据IVDD附录VI签发的证书应在2024年5月27日之前失效。
自2017年5月25日起，公告机构根据IVDD签发的证书在2024年5月27日之前失效。仅具有根据IVDD规定签发的证书的器械可投放市场的前提是自IVDR适用之日起，其在设计和预期的目的上无显著变化并符合新法规有关市场后监察、市场监察、警戒、经济运营商及器械注册的规定。
在过渡期结束（2022年5月26日）之前，根据IVDD投放市场的器械及自2022年5月26日起投放市场并具有证书的器械在2025年5月27日之前可继续投放市场或投入使用。
通过IVDD豁免，符合新法规的器械可在2022年5月26日之前投放市场。并可在2022年5月26日前指定并通知符合新法规的符合性评估机构。公告机构可在2022年5月26日前，采用其规定的符合性评估流程并按照新法规签发证书。
对于高风险产品（需经D类产品符合性评估流程评估的产品），在已委派必要的医疗器械协调小组（MDCG）、专家小组和欧盟参考实验室前提下，同样可通过IVDD豁免在2022年5月26日之前投放市场。
制造商需在过渡期内更新技术文件和流程以满足新法规更严格的要求。
二、关于公告机构
整体来讲,欧盟新法规对公告机构的管理是以成员国主管机构为主体组织实施，欧盟理事会、欧盟级别的专家理事会参与并监管的模式开展的对公告机构的评估，并在委任后实施持续监管、持续审核的管理。
欧盟新法规对于公告机构的管理更为严格，所有公告机构需要获得欧盟主管当局的认可后，才能依据IVDR进行审核。一般公告机构都会在过渡期内维持IVDD的审核资质。只要公告机构具有IVDD的审核资质，可以申请认证。资质证书的有效期是有限的。
三、产品分类的变化
IVDD基于清单分类（list-basedsystem），将产品分为ListA，ListB和其他。而IVDR基于规则分类（rule-basedclassificationsystem），将产品按照风险等级分成A类（最低风险），B类，C类和D类（最高风险）。与IVDD的清单分类相比，IVDR的规则分类更为复杂。产品的风险等级是由产品的预期用途和被测量的分析物决定的，和产品的命名无关。如果产品适用多个分类，则应遵循最高分类原则。
产品的分类由制造商负责。如果公告机构对产品分类有疑义，公告机构可向主管当局进行咨询。如果公告机构的主管当局和制造商的主管当局咨询的意见仍不一致，医疗器械协调组（MDCG）将参与边界产品分类的决策。
四、关于符合性评估
基于分类原则的产品风险分类，体现在产品分级监管中。在器械投放市场前，不同类别的产品依照IVDR附录IX到XI的符合性评估流程，进行符合性评估。D类器械的符合性评估有两条途径：
途径一：基于质量管理体系和技术文件评估的符合性评估
途径二：基于型式检验的符合性评估和基于生产质量保证的符合性评估
C类器械的符合性评估较D类有所简化，主要包括质量管理体系评估、体系监管评估和上市后主管机构监督要求，并且每个同类器械组应评估至少一个典型器械的技术文件。
B类器械的符合性评估与C类相似并更为简化，主要包括质量管理体系评估和上市后主管机构监督要求，并且每个器械类别应评估至少一个典型器械的技术文件。
另外法规中还对自测用器械、伴随诊断器械等符合性评估规定了特殊要求。
公告机构在符合性评估后颁发证书，证书有效期为其列明的期限，不超过五年。经制造商申请，证书的有效期可以延长，但每次延期不超过五年，同时需按照适用的符合性评估流程重新评估。
五、关于上市后监管、警戒和市场监管
作为制造商质量管理体系的组成部分，制造商应采用与风险等级相称并且使用与该器械类型相适应的方式来计划、建立、记录、实施、维护和更新上市后的监管体系。不同分类的产品上市后监管报告要求不同，A类和B类器械的制造商应编制一份上市后监管报告，总结根据上市后监管计划收集的上市后监管数据的分析结果和结论，以及采取任何预防和整改措施的理由和描述。应在必要时对报告进行更新，并应按照相应要求提供给公告机构和主管机构。
C类和D类器械的制造商应编制定期安全性更新报告（PSUR），总结根据上市后监管计划收集的上市后监管数据的分析结果和结论，以及采取任何预防和整改措施的理由和描述。C类和D类器械的制造商应至少每年对PSUR进行更新。PSUR应属于法规规定技术文件中的一部分。
D类器械的制造商应通过电子系统的方式，并向参与符合性评估的公告机构提交PSUR。公告机构应审查该报告，并将其评估添加到该电子系统中，评估中应包括采取任何措施的细节。PSUR和公告机构的评估应通过电子系统提供给主管机构。
C类器械制造商应向参与符合性评估的公告机构提交PSUR，并应主管机构要求向其提供报告。
主管机构负有市场监督责任，对器械的符合性特性和性能执行适当的检查，包括酌情审查文件以及基于适当样品的物理或实验室检查。必要时可在欧盟层面评估国家措施是否合理。IVDR从各个层面对体外诊断医疗器械的监管提出了要求，内容丰富，技术要求如第VI章，对临床证据、性能评估和性能研究的规定，政策层面如对欧盟成员国之间的协调与合作的要求，对公告机构的管理、对电子系统的要求，对器械唯一标识系统（UDI系统）等方面的要求，更为详细具体。整体法规趋于更为严格的管理模式，如对制造商的要求、对主管机构职责的明确、对公告机构的管理以及对产品基于风险分类的上市前和上市后管理等。具体IVDR评审要求的变化将取决于欧盟委员会的指导文件,这些具体的指导文件尚待发布。
（审评六部吕允凤供稿）
1.前言
人表皮因子生长受体（EGFR）突变基因检测试剂是指基于位点特异荧光-核酸聚合酶链式反应（ARMS-PCR法）、基因测序方法等技术，以EGFR突变基因序列为检测目标，体外检测人体病理组织和/或外周血等样本的体外诊断试剂。人EGFR突变基因是肿瘤个体化靶向治疗分子，目前靶向EGFR突变基因的药物主要有两类：一类是作用于EGFR胞外区的单克隆抗体，阻断EGFR与配体的结合，从而阻断下游信号转导途径；一类是作用于胞内酪氨酸激酶活性区域的小分子酪氨酸激酶抑制剂（TKI），如gefitinib和erlotinib。研究表明EGFR突变基因在多种肿瘤细胞中存在，这些突变基因是肿瘤患者是否对TKI敏感的预测因子且被认为是TKI治疗的有效预测指标。
随着一代EGFR-TKIs治疗药物的使用，也发现了一些可能的耐药突变，如发生在外显子20上的替代突变T790M。针对这些耐药突变，目前也开发了一些新型药物，如针对T790M耐药的新药物等。此外，还有许多类型的突变临床意义尚不明确。
2.该类产品注册审评现状
3.人EGFR突变基因检测试剂申报过程中的共性问题
3.1产品说明书中预期用途的表述
目前该类产品申报说明书中存在预期用途指向不明确、表述不清晰等问题。申请人需规范预期用途表述形式，结合该类产品临床评价数据与肿瘤个体化诊疗药物联合治疗情况客观描述产品预期用途。依据《体外诊断试剂产品说明书指导原则》要求，预期用途需规范EGFR不同突变基因型别表达形式，明确产品外显子、突变位点、cosmic代码等信息。
鉴于上述原因，人EGFR突变基因检测试剂如适用于外周血样本检测人群，预期用途需限定为晚期NSCLC患者，且作为不能获取NSCLC组织样本时的补充手段。鉴于病理组织样本和外周血样本中EGFR突变基因比例不同，申报产品需分别对检测外周血样本和病例组织样本进行最低检出限的研究。
3.5产品研发申报难点
4.小结
参考文献：
1.FDA,InVitroCompanionDiagnosticDevices,GuidanceforIndustryandFoodandDrugAdministrationStaff,2014-08-06.
2.《非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测中国专家共识》制定专家组.非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测中国专家共识.中华医学杂志2015年12月8日第95卷第46期
3.中国医师协会肿瘤医师分会，中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会.中国表皮生长因子受体基因敏感突变和间变淋巴瘤激酶融合基因阳性非小细胞肺癌诊断治疗指南(2014版)中华肿瘤杂志2014年7月第36卷第7期
（审评六部吴传松供稿）
药物滥用（drugabuse）是国际上通用的术语，指的是与医疗目的无关地反复大量使用一些具有依赖性或称依赖性潜力的药物，用药者采用自身给药形式，导致精神依赖性和身体依赖性，造成精神混乱和一些异常行为。习惯称药物滥用为“吸毒”。
药物滥用已成为当今全球性的严重社会问题，给个人、家庭和社会带来极大危害性。病人服用此类药物后会逐渐产生耐受性，形成心理依赖，一旦中断用药便会产生一系列戒断症状，使病人难以忍受。另外，吸毒者滥用注射器、针头等还容易造成一系列病原体的感染，例如细菌感染、结核病、艾滋病等等。
对此类药物的分析通常采用病人尿液、血液、唾液样本，应用免疫层析分析等方法进行快速的初步筛选，若需要进一步确认，须选用其他方法，例如气液层析法（GLC），高效液相层析法（HPLC）以及气相-质谱分析法（GC/MS）。GC/MS被认为是最灵敏、准确的确证化验方法，即金标准。
目前被滥用的依赖性药物主要包括阿片类，其他还有可卡因、大麻、某些中枢兴奋剂、镇静催眠药、致幻剂、挥发性溶剂以及酒精和烟草等。阿片类物质主要包括吗啡、海洛因、可待因等阿片类生物碱，其在体内共同的代谢产物为吗啡，其他代谢产物还包括去甲吗啡、去甲吗啡-3-醚的硫酸盐、吗啡-3，6-二葡萄糖醛酸化物等等。海洛因又称双乙酰吗啡或二乙酰吗啡，俗称“白粉”或“白面儿”，是吗啡的衍生物。海洛因在体内代谢很快，血中半衰期仅为3-9分钟，经体内酯酶水解为6-单乙酰吗啡（6-monoacetylmorphine/6-acetylmorphine,6-MAM/6-AM），又称O6-单乙酰吗啡。
6-单乙酰吗啡检测试剂盒通常采用特异性的抗体抗原反应及免疫层析和胶体金标记技术，通过抗体竞争结合6-单乙酰吗啡抗原和尿液中可能含有的被检测物的原理来进行检测。测试时，尿液样本在毛细效应下向上层析。如果是阴性，测试区（T）会出现紫红色条带。如果是阳性，测试区（T）将不会出现紫红色条带。无论被测物是否存在于尿液中，质控区（C）都会出现紫红色条带。6-单乙酰吗啡的最低检出限一般为不低于10ng/mL，美国FDA批准的2个同类产品的最低检出限均为10ng/mL。特异性试验研究中，需对人体样本中的常见干扰物（如胆红素等）、常见处方及非处方药物、其他镇痛麻醉类药物如吗啡、可待因等进行检测，以考察产品的抗干扰能力。临床试验可选择同类上市的产品或参考方法进行对比试验，考察产品的临床性能。
[1]彭司勋．药物化学．北京：中国医药科技出版社，2007．135-135
[2]ConeEJ,WelchP.,MitchellJM,PaulBD.Forensicdrugtestingforopiates.I.Detectionof6-AcetylMorphineinurineasanindicatorofrecentheroinexposure;drugandassayconsiderationsanddetectiontimes.J.Anal.Toxicol.1991;15:1-7
[3]DepartmentofHealthandHumanServices.NoticeOfMandatoryGuidelinesForFederalWorkplaceDrugTestingPrograms:Finalguidelines.Fed.Register1994;110(June9):11983.(Revisedguidelinesexpectedin2002)
[4]乔静，杨士云，李咏杰．171例滥用海洛因者的尿样分析．法医学杂志．2000,16(4):241-242
（审评六部解怡供稿）
（审评三部供稿）
虽然产品货架有效期缩短后，产品在储存周期内质量发生变化的风险降低，但注册人在申请许可事项变更时，建议提供合理解释和必要的支持性资料，例如完成实时稳定性试验后发现产品货架有效期应缩短，建议提供该实时稳定性试验验证资料。
一、产品基本情况
该产品为基于二代测序的体外伴随诊断检测，仅允许在FoundationMedicine公司进行。整个检测包括试剂、软件、仪器（Illumina的HiSeq4000平台）和检验的相应规程。该产品针对324个基因进行检测，所检测的突变类型包括替换、插入、缺失、拷贝数变化、基因重排等突变，以及微卫星不稳定性、肿瘤突变负荷检测。适用的样品类型为福尔马林固定石蜡包埋组织样本（FFPE）。所检测伴随诊断基因位点及相应的治疗产品见表1。
表1.F1CDx检测位点及相应的伴随药物
*未在中国上市
F1CDx检测的结论分为三类：
第一类：表1中伴随诊断预期用途的基因情况；第二类：具有显著临床意义的癌症突变；第三类：具有潜在临床意义的癌症突变。美国FDA依据肿瘤个体化基因与癌症关系证据的可靠程度将癌症个体化基因检测试剂分为三级2。F1CDx检测结论的上述分类即符合FDA的分级策略。
第一级：伴随诊断（CompanionDiagnostics,CDx）。
第二级：具有显著临床意义的生物标志物的检测试剂
第三级：具有潜在临床意义的生物标志物检测试剂
这一类可以定义为除第一级和第二级之外其他肿瘤突变标志物，具有潜在的临床意义。这类产品的预期用途是为可能将要成为临床受试对象的患者提供参考或使用，以判断是否适用相应的试验。其预期用途需要通过分析性能评估数据支持，临床或原理的描述通常使用出版物或者药物体外临床前试验数据为这些位点的意义提供充分的支持。
二、伴随诊断基因临床研究情况
F1CDx伴随诊断基因临床研究采用与已上市伴随诊断试剂进行等效性研究（Follow-on）4的方式，对产品的临床性能进行了评价。分别从对比试剂、临床样本选择对该产品临床试验进行简要介绍。
（一）对比试剂
此次临床试验进行等效性研究的伴随诊断对比试剂见表2。
表2.F1CDx等效性研究所使用的已上市伴随诊断试剂
可以看出，在临床对比试剂的选择时并不局限于方法学，此次NGS产品对比方法涵盖了PCR、FISH、IHC、NGS等，主要考虑的是对被测人群筛选的一致性。
（二）临床样本的选择
F1CDx的临床样本的入选及统计学方法主要根据FDA所提出的Follow-On4伴随诊断试剂研发途径思路进行。
表3.F1CDx临床试验样本情况
三、非伴随诊断基因
此次公开的产品SSED中，非伴随诊断目的的324个基因，仅在分析性能评估部分对于一些代表性基因的检测性能进行了验证。对于这些基因是否进行了临床试验并未进行说明。因此应当考虑，基因的测序结果的解读同样应当作为产品的一部分。这与该检测仅能在FoundationMedicine进行的使用范围相一致。
四、关于审批途径
F1CDx是一个涵盖多项肿瘤的检测产品，按EAP特殊路径审批。EAP指用于危及生命或不可逆的疾病或病症的未能满足的医疗需求的快速通道途径。F1CDx通过EAP途径进行审批，基于肿瘤危及生命但尚未被解决的医疗需求。
同时，F1CDx是美国FDA第一个通过“突破性产品”分类途径（BreakThroughDesignation，以下简称“突破性途径”）审批上市的IVD产品。“突破性途径”5是2015年美国FDA最初提出的对创新性产品加快审批政策经过不断改进后的上市审批政策，目前仍处于征求意见阶段。进入“突破性途径”后，CDRH会进一步加强与申请人的互动、个性化方案制定及审评优先。
五.小结
4.LiM.StatisticalMethodsforClinicalValidationofFollow-OnCompanionDiagnosticDevicesviaanExternalConcordanceStudy[J].StatisticsinBiopharmaceuticalResearch,2016,8(3):355-363.
5.FDA,ExpeditedAccessforPremarketApprovalandDeNovoMedicalDevicesIntendedforUnmetMedicalNeedforLifeThreateningorIrreversiblyDebilitatingDiseasesorConditions.2015.4.13.