本发明属于医学检验领域，具体地公开了一种呼吸道合胞病毒IgA抗体检测试纸条及其检测方法。
背景技术：
技术实现要素：
为了克服现有技术存在的问题，本发明提供一种呼吸道合胞病毒IgA抗体检测试纸条及其检测方法。
本发明首先提供了一种呼吸道合胞病毒IgA抗体检测试纸条，包括样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜、吸水纸、背板，所述的纤维素膜包括喷涂有呼吸道合胞病毒融合蛋白抗原多肽片段的检测线和人IgA抗体的对照线。
进一步地，所述呼吸道合胞病毒融合蛋白抗原多肽片段的氨基酸序列如序列表SeqIDNO.1所述。
进一步地，所述样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜、吸水纸均粘附在背板上。
进一步地，所述的标记垫含有抗人IgA抗体标记上胶体金，所述抗人IgA抗体包括羊抗人IgA多克隆抗体、鼠抗人IgA单克隆抗体、兔抗人IgA单克隆抗体、兔抗人IgA多克隆抗体。
进一步地，所述试纸条检测人的唾液标本。
进一步地，所述唾液标本通过将无菌脱脂棉放置于待测对象舌下，吸附唾液后再用注射器挤压出的方法获得。
本发明还提供了利用所述试纸条检测呼吸道合胞病毒IgA抗体方法：采集待测对象唾液标本，并利用该唾液标本与所述试纸条接触进行检测。
进一步地，所述唾液标本的采集方法为：将无菌脱脂棉放置于待测对象舌下，吸附唾液后再用注射器挤压出唾液标本。
进一步地，所述无菌脱脂棉用棉线捆绑。
本发明的内容还包括一种人唾液标本的采集方法：将棉线捆绑的无菌脱脂棉放置于待测对象舌下，吸附唾液后再用注射器挤压出检测标本。
本发明的有益效果为：
本发明通过无菌脱脂棉采集唾液标本，再将唾液标本用注射器挤出，通过呼吸道合胞病毒IgA抗体快速层析纸条检测唾液中的IgA抗体，实现快速诊断患者感染呼吸道合胞病毒的目的。本方法操作简单，结果快速，适合各级医疗机构快速诊断呼吸道合胞病毒感染。采集标本无侵入性，避免传统的采血和采集鼻咽拭子给病人带来不适，也提高医护人员的工作效率，提高呼吸道合胞病毒诊断在临床上推广率。
为了更好地理解和实施，下面结合附图详细说明本发明。
附图说明
图1为本发明检测唾液中呼吸道合胞病毒IgA抗体的试纸条结构示意图。
图2为注射器挤压唾液示意图。
图3为胶体金纸条测试示意图。
图4为本发明试纸条检测呼吸道合胞病毒IgA抗体的阳性示意图。
图5为本发明试纸条检测呼吸道合胞病毒IgA抗体的阴性示意图。
图6为本发明试纸条检测呼吸道合胞病毒IgA抗体的无效示意图。
具体实施方式
【实施例1】呼吸道合胞病毒IgA抗体诊断试剂条制备
2、羊抗人IgA抗体胶体金标记垫制备
在pH值6.8-7.0溶液内，羊抗人IgA抗体与胶体金颗粒标记形成羊抗人IgA抗体胶体金标记物(标记量为25ug/ml)，封闭液成分为PEG20000和BSA蛋白。将胶体金标记物喷涂到玻璃纤维膜上，稀释参数为30cm2/ml，并在湿度15％，温度30℃条件下干燥12小时以上，制备的胶体金标记垫密封备用。
3、硝酸纤维素膜包被
用包被液稀释人IgA抗体、呼吸道合胞病毒F蛋白抗原多肽片段，其中人IgA抗体的浓度为1.5mg/ml，呼吸道合胞病毒F蛋白抗原多肽片段浓度为1mg/ml。如附图1，将两者均匀喷涂到NC膜上，其中人IgA抗体喷到NC膜上C位置，呼吸道合胞病毒F蛋白抗原多肽片段喷到NC膜上T位置。将喷涂好的NC膜放置在湿度10-30％，温度20-35℃条件下烘干处理12小时以上，烘干好的NC膜密封备用。
4、组装、切条
结合附图1示意图，将吸水纸4、硝酸纤维素膜3、胶体金标记垫2、玻璃纤维膜1按顺序黏贴在pvc背板5上，然后调整切条机参数进行切条，切成4mm宽度的试纸条。
【实施例2】无菌脱脂棉制备
【实施例3】唾液标本采集
本发明是将无菌脱脂棉放置到幼儿的舌下，棉线暴露在口外，口含3-5分钟。如附图2，将棉球22，放置到注射器21中，然后装上注射器推动杆，轻缓推动，获得唾液标本23，用2ml小管保存。
【实施例4】标本测试
结合附图3说明，将呼吸道合胞病毒IgA纸条放置到装有唾液标本的小管中，样品垫端接触唾液标本，放置15-30分钟，然后肉眼观察结果。
如果唾液标本中含有呼吸道合胞病毒IgA抗体，会与标记垫中的羊抗人IgA抗体胶体金标记物(C线)结合，上行到NC膜上的呼吸道合胞病毒F蛋白抗原多肽片段检测线(T线)特异结合，形成红色条带(附图4)。如果标本中没有含有相应的呼吸道合胞病毒IgA抗体，羊抗人IgA抗体胶体金标记物会越过检测线(T线)，继续上行到对照线与人IgA抗体(C线)结合，在对照线上形成红色条带(附图5)。如果对照线(C线)没有形成红色条带，说明试纸条失效，结果不可靠(附图6)。
【实施例5】本发明呼吸道合胞病毒IgA胶体金诊断方法与荧光PCR方法结果对比
选取临床标本60例，分别采集患者的唾液标本和咽拭子标本，分别用呼吸道合胞病毒IgA抗体检测试纸条诊断方法与荧光PCR方法进行测试，结果如表1：
表1本发明的呼吸道合胞病毒IgA抗体检测试纸条诊断方法与荧光PCR方法比较结果
本发明呼吸道合胞病毒IgA胶体金诊断方法与荧光PCR方法比较，灵敏度达到95.00％，特异性95.00％，可以符合临床检测的条件。
本发明并不局限于上述实施方式，如果对本发明的各种改动或变形不脱离本发明的精神和范围，倘若这些改动和变形属于本发明的权利要求和等同技术范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变形。