导语:如何才能写好一篇自动化免疫分析,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文,供你借鉴。
【关键词】化学发光免疫分析法;甲状腺激素
化学发光免疫分析法是20世纪80年代以来发展起来的一项新的标记免疫技术,在临床上有广泛的应用,包括内分泌激素、肿瘤标志物、血药浓度、传染病、心血管疾病标志物、贫血及过敏原等,特别是在甲状腺激素检测中应用更为广泛[1]。本文采用贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测T3、T4、FT3、FT4、TSH,对其方法学进行综合评价。
1材料与方法
1.1仪器贝克曼全自动化学发光免疫分析仪。
1.2试剂发光试剂、质控品、标准品由贝克曼公司提供。
1.4检测方法利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法,其反应原理与放免和酶免中的双抗夹心法、竞争法相似,严格按试剂盒操作说明书操作。
1.5评价指标
1.5.1批内精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三种浓度的血清样本,每种浓度同批平行测定10次,计算平均变异系数(CV)。
1.5.2批间精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三种浓度的血清样本各10份,每天各测定1次,共测定10天,计算平均变异系数(CV)。
1.5.3回收率:由贝克曼公司提供原装3个浓度的标准品,分别测定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量,每个浓度平行测定3次,计算平均回收率。
1.5.4线性范围收集患者血清标本,取T3、T4、FT3、FT4、TSH浓度高于厂家提供线性范围上限作为高值浓度水平(H),厂家提供稀释液作为低值浓度水平(L),用稀释液稀释高值浓度血清,形成如下系列浓度检测标本:1H+0L、4H+1L、3H+2L、2H+2L、2H+3L、1H+4L、0H+1L。用配制成的系列浓度标本平行测定各项指标含量,取平均值作图,取在坐标纸上呈明显直线趋势的各点值进行直线回归统计,取回归系数r大于0.9的浓度范围为可报告的浓度线性范围。
2结果
2.1批内精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均变异系数分别为4.40%、4.90%、3.00%、4.50%、3.50%。
2.2批间精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均变异系数分别为6.90%、5.30%、3.50%、6.20%、4.80%。
2.3回收率T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均回收率分别为96.7%、95.5%、97.1%、95.6%、96.4%。
2.4线性范围T3所测结果得到回归方程为y=1.069x-0.2468,r=0.9966,截距经t检验,ta=1.36,0.95,截距经t检验,ta=0.36,
3讨论
血清中三碘甲状原腺氨酸(T3)、四碘甲状原腺氨酸(T4)、游离三碘甲状原腺氨酸(FT3)、游离四碘甲状原腺氨酸(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的测定对甲状腺疾病的诊断具有重要价值。以往国内实验室多采用RIA、MIRA检测血清甲状腺激素水平,此法虽较准确,仪器与试剂也较为低廉,但对操作人员水平要求较高,对实验条件及环境有较多要求,且随着标记抗原的放射性衰减,而使计数不稳定及曲线失真,导致结果偏离,结果重复性差,且可产生放射性污染[2,4]。
近年来发展起来的全自动化学发光免疫分析系统是利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法,其反应原理与放免和酶免中的双抗体夹心法、竞争法相似。其优点是[3,5]:(1)成熟的单克隆抗体技术或独特的磁性微粒子技术,保证了反应的高特异性;(2)检测范围宽,具有良好的稀释线性;(3)试剂稳定性好,不需酶促反应,有效期可长达半年;(4)操作简便,分析过程采用全自动化,减少了人工操作误差,重复性好;(5)试剂及标本均采用无吸附材料,故相互间的交叉污染率低,干扰因素少;(6)真正的随机连续检测,样本随到随测,具有急诊优先插入功能。因此全自动化学发光免疫分析系统是目前检测甲状腺激素等指标的较好方法。
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doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.17.168
工作人员英语水平及业务素质的要求
人员的因素是保证生化检验质量的前提。医院各级领导要提高认识,引起重视。进口全自动生化分析仪的操作界面大都是英文,对工作人员的英语水平就要有一定的要求,以适应工作的需要,科室领导要能合理安排工作人员;经过专门的技术培训,应掌握仪器的性能工作原理,仪器的参数设置和试剂的准备,熟悉仪器各部件结构,仪器的保养与维护及一般故障的排除,培训完毕考核合格后才能上岗。近两年,我国正在逐步实行大型仪器使用培训的上岗考核制度,这也能进一步提高我们工作人员的业务素质。
为全自动生化分析仪提供良好的工作环境
全自动生化分析仪的运行必须要有一个好的工作环境。包括稳定的电流、电压和接地保护的电源系统。适应仪器工作范围的温度和湿度,实验室的洁净度等。应当配置UPS保护电源,用来应对突然断电的情况。要有一个相对独立稳定的工作环境。任何环境的变化都有可能影响到仪器的稳定性,从而影响到检测结果的精密度和准确度,因此要及时观察做好记录以便出现问题及时得到纠正。
全自动生化分析仪的维护与保养
标准品的正确选择和使用
由于生化试剂存在批间差异,在使用不同批次的试剂时,应及时校准仪器。实践证明,使用定值洪冻干标准血清比使用水溶液标准要好,原因可能是定值冻干血清与样品(血清)成分更接近,水溶液标准不具有血清的黏稠性,在吸样针吸样时血清与水溶液在吸样针的黏度不一样会造成误差;另一方面反应速度不同,水溶液反应速度比血清快,而造成误差。在使用定值冻干标准血清时,准确吸取重蒸水稀释复溶,轻轻颠倒混匀,避光放置30~60分钟使用。
试剂的管理
目前试剂种类较多,仪器配套试剂、进口试剂、国家试剂等等,不同的生产厂家、不同型号的全自动生化分析仪对试剂的要求不完全相同。原则是建议使用仪器配套的系列试剂产品。使用其他试剂,应先进行样准,使仪器性能做到最佳。总的来讲,进口试剂优于国家试剂,表现在试剂的稳定性、线性,储存使用前配置等。试剂的存放要有专用冰箱,建立冰箱温度每日登记制度,以保证试剂的贮存条件达到要求,对试剂要定期清理,及时处理过期试剂。
完善室内质控制度
正确对待室间质量工作及反馈的信息
目前在我国的医院等级评审制度中将检验科室间质评成绩作为医院达标的指标之一。室间质量评价由第三方机构采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果,并发现实验室本身不易发现的不准确性,了解各实验室之间结果的差异,帮助其校正,使其结果具有可比性。我们在认真做好室内质控的同时[1],一定要正确对待室间质评工作及反馈的信息。每次室间质都要由科室认真独立完成,并如实报告检测结果。当收到反馈单后要认真分析反馈单中所反映出的问题,积极查找原因,采取措施提高测定结果的准确性,提高不同实验室之间测定结果的可比性。
标本分析前的质量管理
标本分析前的工作由各科医师、护士及检验科人员等共同完成。因环节较多是很容易出问题的,也是全面质量控制工作中最难控制的环节,我们要主动与临床沟通,包括患者的准备、标本采集的方法、数量,特殊样品的留取、按时送检等。当检验科工作人员接到标本时要认真核对,不合格的标本要重新采集。发现标本有黄疸、脂血、溶血等对检测结果有影响的情况,应注明在报告单上,以便医师在分析报告时可结合标本信息去分析。
建立检测结果审核制度
在审核报告单之前,要认真分析室内质控情况,对当天检测结果的可信度作出判断,对报告单逐一审核,检查数据有无不合理的情况。符合复查条件的一定要进行复查后再发报告。遇到特殊情况,应与临床及时沟通,查找原因,确保结果的可靠性。
以上几个方面是一个整体,分析前、中、后环环相扣,缺一不可,只有全面做好各环节的质量管理,才能为患者发出真实可靠的报告[2]。
参考文献
>>两种自动喷水灭火系统的比较两种电视播出系统的比较与分析国内外图书馆自动化系统的比较两种典型自动化集装箱码头水平运输工艺浅析图书馆自动化管理系统两种保持器的比较两种廉租屋的比较两种范式的比较两种美德的比较自动化图书管理系统的设计与实现网络化控制系统两种时延预测算法及其比较两种全自动化学发光免疫分析系统检测血清细胞角蛋白19片段水平的结果分析一种办公自动化管理系统的安全性设计方法浅谈党校图书馆自动化的管理PLC技术在电气自动化系统中的应用评析两种不同材料的桩核系统在前牙修复中的效果比较两种红细胞G6PD酶检测系统的方法学比较两种条码在检验信息系统中的应用比较两种生活垃圾填埋场封场最终覆盖系统的应用和比较“伽利略”与GPS两种卫星定位系统的比较分析常见问题解答当前所在位置:l,2015/9/15
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【关键词】胰岛素(IRI);光量子数;前胰岛素原;胰岛素原;化学发光免疫法
【Abstract】ObjectiveToexploreareliablemethodforthedeterminationofinsulin.MethodsGatherfastingagglutinatingblood,centrifugalizethemrespectivelytogettheserum,whichweredirectlysetoninstrumenttodetermine.ResultsLinearrang:0~335.0mIU/L,senitivity:themeanquantumof0mIU/LIRI,10.1mIU/LIRI,152.0mIU/LIRIand335.0mIU/LIRIwere3808,30350,357399and684567.Specificity:whenthecontrolserumwasdetermined,themeasurevlaluewaswithinthestandarddeviation(SD),95%-105%.Precision:N=60CV≤5%.ConclusionChemiluminescenceisareliable,stablemeasurementmethodfordeterminationofinsulinwithhighsensitivity,precisionandspecificity.
【Keywords】insulin;quantum;preproinsulin;proinsulin;chemiluminescence
胰岛素(IRI)是一种蛋白质激素,这是由胰岛中的β细胞所合成、储存和分泌的。IRI的功能是调节血液中葡萄糖的浓度水平。IRI初期是在β细胞中,以一种大分子量(分子量为1200)前胰岛素原的形式存在。前胰岛素原是一条由110氨基酸组成的单链前体。前胰岛素原被切除掉24个氨基酸序列后形成胰岛素原(分子量为9000),胰岛素原是胰岛素和C-肽的前体[1]。IRI是由两条氨基酸链组成的。最初,IRIA链是由21个氨基酸组成,B链是由30个氨基酸组成;而C-肽是由31个氨基酸组成。IRI是随餐后血液中葡萄糖的浓度高低而产生应答的。
IRI水平虽然不是糖尿病患者常规诊断方法,但是IRI水平的检测对于空腹低血糖患者、普通人群中的胰岛素耐受患者、β细胞分泌功能异常患者的意义非常大[2,3]。
1.1原理IRI的测定是一种直接化学发光技术和双抗体两点夹心免疫分析法相结合的测定方法。第一种抗体称为标识抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体标记吖啶酯形成的;第二种抗体称为固相化抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体以共价键的方式与顺磁性颗粒相结合形成的。血清中的胰岛素与相应抗体发生免疫反应后产生光量子,其光量子数的多少与血清中胰岛素的浓度成正比,经标准曲线计算即可求得血清IRI的浓度水平。
1.2仪器与试剂仪器:BAERACS-180型全自动化学发光免疫分析仪。试剂(双试剂)及标准液由广州宝迪有限公司提供。
1.3方法取血清于样品杯中,置全自动化学发光免疫分析仪上,调整好检测参数:血清25μl+第一试剂50μl于37℃孵育5min,加第二试剂250μl于37℃孵育2.5min,用蒸馏水对反应杯进行分离、抽吸、清洗,最后分别加300μl酸试剂和碱试剂到反应系统中进行反应发光,读取光量子数,再根据标准曲线,计算出结果。
1.4标准曲线制备采用两点定标法,将标准血清0.0mIU/L和138.0mIU/L安放于仪器的定标位置上,编入测定程序,上机测定自动打印出标准曲线。
2.1精密度取混合血清分成两份,一份当天测定60次,结果IRI的值为22±0.8mIU/L,其对应的CV值为1.8%;另一份做批间试验,测定10次,测定统计值为21±1.2mIU/L,其对应的CV值为2.8%。
2.2灵敏度0mIU/L的IRI,其平均光量子数为3808,10.1mIU/L的IRI,其平均光量子数为30350,152.0mIU/L的IRI,其平均光量子数为357399,335.0mIU/L的IRI,其平均光量子数为684567。IRI测定的范围为0~335.0mIU/L。
2.3回收试验在IRI为25mIU/L的血清中分别加入浓度为1mg/L的胰岛素原、浓度为500μg/L的C-肽、浓度为1mg/L的胃泌素、浓度为1mg/L的胰高血糖素、浓度为1mg/L的胰泌素进行回收试验,分别测得其回收率为:100.8%,95.1%,96.6%,100.2%,101.6%。
2.4线性分析对一份定值血清稀释不同浓度,观察测定体系光量子数的变化量,即为IRI与光量子数的关系。结果显示:IRI在本法的测定范围是0~335.0mIU/L。当IRI大于335.0mIU/L时,开始偏离线性。因此对浓度高的标本必须先进行适当的稀释,然后测定。
2.5干扰试验当溶血(Hb>5g/L)、黄疸(胆红素>0.2g/L)时,对结果干扰甚微。
2.6正常参考值取100份经我院体检合格者的血清,其中男50份,女50份,年龄19~55岁,平均37岁。检测结果IRI:20.5±17.5mIU/L。男女之间差异无显著性(P>0.05)。
1康格非,巫向前.临床生物化学和生物化学检验,第2版.北京:人民卫生出版社,2001,256.
关键词:维生素D;钙代谢;25.羟基维生素D;全自动生化
1维生素D概述
维持正常的维生素D水平对调节钙磷代谢至关重要。具有生物活性的1,25-(OH)2D可以促进肠道钙结合蛋白的合成,通过下述3个方面使血清钙、磷含量增高;首先,促进肠道内钙、磷的吸收和运转,增加在体内的留存;其次,提高肾小管对钙、磷离子的再吸收,使尿钙、磷排出减少;最后,当低血钙膳食中缺钙时,在甲状旁腺素(PTH)的作用下促进钙、磷的吸收,动员骨中钙、磷释出。在维生素D缺乏的情况下,食物中的钙只有10%―15%能够被吸收,磷只有60%能够被吸收。1,25-(OH)2d通过与维生素受体结合,可提高肠道对钙磷的吸收效率,使钙吸收增加至30%~40%,磷增加至80%左右。众所周知,维生素D具有传统意义上的骨骼效应,近年来研究显示,维生素D不仅能够调节钙磷平衡和骨骼代谢,还具有调节免疫、抗肿瘤、调控细胞增殖、防治代谢综合征、抗炎、保护心血管健康等多种生物学功能。
2维生素D的检测方法
现有多种方法用于测定血清25-(OH)D浓度来评价机体维生素D的营养状况,根据方法原理不同,可分为色谱分析法和免疫分析法。色谱分析法包括高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),可分离并检测不同的分析物,能区分并分别定量25-(OH)D2和25-(OH)D5。免疫分析法包括放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、化学发光免疫测定法(CLIA)、电化学发光免疫测定法(ECLIA)、全自动生化分析法等,由于所有的维生素D羟化物都能发生抗体抗原结合反应,因此,只能测定25-(OH)D总量,无法同时测定25-(OH)D2和25-(OH)D3的浓度。
2.1高效液相色谱法(HPLC)
高效液相色谱法(HPLC)是早期应用较多的色谱法之一,可以同时检测25-(OH)D2和25-(OH)D3,其灵敏度、特异性和准确性都较高,与LC-MS/MS法的结果一致性较好。与免疫法相比,HPLC的相对不确定度小,分析操作省时省力,具有分离效能高、分析速度快、重复性好、节约成本、精确度高、可自动化等优点。但是HPLC的不足之处是设备较贵,检测通量小,所需样品量大,标本前处理过程复杂,对操作人员要求较高等,目前临床使用较少。而且,HPLC虽然能够分开25-(OH)D2和25-(OH)D3,但25-(OH)D2浓度太低,HPLC检测限达不到要求。随着监测技术及精度的发展,FIPLC逐步被LC-MS/MS法所替代。
王剑建立HPLC法测定正常儿童血清25-(OH)D3含量并评价其应用。样品用甲醇沉淀蛋白,以10%二氯甲烷-正己烷提取;甲醇―水(88:12)为流动相,选用DiamonsilTm(250min×4.6mm,5μm)色谱柱进行分离,流速为1ml/min,检测波长为265mm,柱温30℃。以25-(OH)D3标准品外标法建立标准曲线,结果发现,该方法在10~200μg/L浓度范围内线性关系好(r=0.9971),方法回收率为93.4%~106.2%,提取回收率为88.8%~94.1%。同时也获得了较好的精度,日内变异系数(CV)为3.5%~4.4%,日间CV为3.9%~4.7%,最小检测范围为5μg/L。刘怡欣利用HPLC法测定健康成年人血清25-(OH)D3含量,建立方法学与上一研究类似,结果发现,25-(OH)D,在线性范围8~160μg/L内与其响应值线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为92.5%~109.5%,日内精密度(RSD)为2.0%~4.6%,日间RSD为2.9%~5.2%,最小检测范围为4μg/L。此方法检测25-(0H)D具有较高的回收率、较好的精密度和准确性,可用于临床实验室开展血清25-(OH)D含量测定。
2.2液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)
液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)是色谱法中最为常用的25-(OH)D检测方法,样品经处理后采用液相色谱分离,检测器为串联质谱仪,在多反应监测扫描模式下,实现分子离子和碎片离子2次质量选择,可同时检测25-(OH)D2和25-(OH)D3,具有非常高的灵敏度、特异性和准确性,被国际公认为检测的金标准。虽然LC-MS/MS在25-(OH)D检测特异性具有明显的优势,但需要样品量较大,样品前处理复杂耗时长,仪器操作较复杂,对操作人员的要求较高,仪器昂贵,而且需要自己开发方法等,一定程度上限制了LC-MS/MS的临床推广使用。
Tai等采用液-液萃取反相LC-MS/MS法检测已知浓度的25-(OH)D标本,考察和评价方法学。结果显示,25-(OH)D2和25-(OH)D3的回收率为99.0%~101.0%,绝对回收率分别为92%和97%。而且,研究显示方法的精度非常高,当25-(OH)D>1ng/g时的CV为0.2%~0.6%;25-(OH)D
2.3放射免疫法(RIA)
放射免疫法(RIA)是最为经典的测定血清25-(OH)D的方法。目前应用较广泛的试剂盒采用125I-25-(OH)D3作为示踪物,与待测样品中25-(OH)D竞争性结合抗25-(OH)D山羊抗体,用两步抗原抗体反应以实现固液分离,并用Gamma计数器检测沉淀中125I的放射量以计算样品中25-(OH)D的浓度。该方法不需要复杂的样品预处理纯化过程,操作简单,解决了HPLC法操作复杂不适于临床检测应用的问题。RIA试剂盒目前应用比较广泛、方便,灵敏度高,特异性强,精密度好,所需要的仪器要求较低,是基层单位对超微量物质测定的主要手段。但是RIA法不能区分检测25-(OH)D2和25-(OH)D3,还具有放射性污染的潜在风险,对实验人员和环境都有损害,放射性废物的处理也比较复杂。而且测量需要设立平行样,花费较多,每次检测的数量有限。
2.4酶联免疫吸附法(ELISA)
酶联免疫口及附法(ELISA)是早期维生素D测定的主流方法,是将可溶性的抗原或抗体结合到固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法:ELISA法在自动化操作、节省人力、无污染等方面具有一定的优势,适合于常规临床实验室开展.但是该法只能用于检测25-(OH)D总的含量,当受试者服用维生素D2时,ELISA法测定会存在偏差,可能造成临床决策的失误,使维生素D中毒风险增大
高玲娟采用ELISA试剂盒检测25-(OH)D水平,对ELISA方法学进行系统评价,结果发现,ELISA测定25-(OH)D的批内CV为2.13%~4.32%,批间CV
2.5化学发光免疫测定法(CLIA)
2.6电化学发光免疫测定法(ECLIA)
电化学发光免疫测定试剂盒使用生物素标记的25-(OH)D与样品中25-(0H)D竞争性结合钉标记的维生素D结合蛋白(DBP)后,用包被r链霉亲和素的磁珠将生物素标记的25-(0H)D-钌标记的维生素D结合蛋白复合体固定,光电倍增管检测钉的电发光信号强度回算样品中的25-(OH)D浓度。该法具有高灵敏度,且所受影响因素较少,能自动化批量操作÷
何国坚应用罗氏CSE170分析仪采用ECLIA法检测维生素D,结果显示,其线性范围为3~70ng/ml(r=0.9881,检出限为3.0ng/ml;2种不同浓度的定值质控血清在准确度评估中相对偏差均
2.7全自动生化分析法
全自动生化分析法利用全自动生化仪,根据光电比色原理来测量血液中25-(OH)D的总含量。由于其操作简单、测量速度快、准确性较高、消耗试剂量小,在各级医院得到广泛应用。其缺点是仅能检测25-(OH)D的总含量,精密度和特异性稍差,仪器间的性能差异大,容易造成样品间交叉污染。
表2线性范围试验结果
2.3M16磁敏免疫分析仪的正确度评价结果
表3M16磁敏免疫分析仪准确度测试结果
2.4对比试验
注:A为Myo线性拟合曲线;B为Myo残差图;C为CK-MB线性拟合曲线;D为CK-MB残差图
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【Abstract】ObjectiveToexploreareliablemethodforthedeterminationofinsulin.MethodsGatherfastingagglutinatingblood,centrifugalizethemrespectivelytogettheserum,whichweredirectlysetoninstrumenttodetermine.ResultsLinearrang:0~335.0mIU/L,senitivity:themeanquantumof0mIU/LIRI,10.1mIU/LIRI,152.0mIU/LIRIand335.0mIU/LIRIwere3808,30350,357399and684567.Specificity:whenthecontrolserumwasdetermined,themeasurevlaluewaswithinthestandarddeviation(SD),95%-105%.Precision:N=60CV≤5%.ConclusionChemiluminescenceisareliable,stablemeasurementmethodfordeterminationofinsulinwithhighsensitivity,precisionandspecificity.
1.1原理
IRI的测定是一种直接化学发光技术和双抗体两点夹心免疫分析法相结合的测定方法。第一种抗体称为标识抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体标记吖啶酯形成的;第二种抗体称为固相化抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体以共价键的方式与顺磁性颗粒相结合形成的。血清中的胰岛素与相应抗体发生免疫反应后产生光量子,其光量子数的多少与血清中胰岛素的浓度成正比,经标准曲线计算即可求得血清IRI的浓度水平。
2.3回收试验在IRI为25mIU/L的血清中分别加入浓度为1mg/L的胰岛素原、浓度为500μg/L的C-肽、浓度为1mg/L的胃泌素、浓度为1mg/L的胰高血糖素、浓度为1mg/L的胰泌素进行回收试验,分别测得其回收率为:100.8%,95.1%,96.6%,100.2%,101.6%。
2.5干扰试验当溶血(Hb>5g/L)、黄疸(胆红素>0.2g/L)时,对结果干扰甚微。
1康格非,巫向前.临床生物化学和生物化学检验,第2版.北京:人民卫生出版社,2001,256.
2ChevenneD,TrivinF,PorquetD.Insulinassaysandreferencevalues.DiabetesMetab,1999,25(6):459-476.
随着检验医学的发展,临床生化、临床免疫等亚专业学科都取得了长足进步,分子生物学等学科更是引起实验医学领域的革命性突破[2]。医学院校对新兴学科的重视不言而喻,与之相对的是临床检验基础学科的教育逐渐薄弱。笔者在带教工作中发现,部分实习生对聚合酶链反应技术比较熟悉,对牛鲍式血细胞计数板进行细胞计数的原理却比较模糊。虽然当前全自动血细胞分析仪已经普及,但仍无法完全取代人工计数,一些基础技术是仪器分析的重要补充,在检验医学中仍占有相当重要的地位[3]。在实习期间,带教老师应加强对基础技术的指导,避免实习生走入重高端、轻基础,重仪器、轻人工的误区。
2仪器设备自动化导致实习内容减少
当前,实验室自动化程度越来越高,全自动生化仪、血细胞分析仪、化学发光仪等先进的自动化设备承担了检验科的大部分日常工作,从而使实习内容减少、技术趋向简单化。例如全自动生化仪与化学发光仪虽然实验原理不同,但操作的步骤方法大致相同,实习生在单调重复的操作中可能会产生检验工作简单、容易的错误想法。针对这种情况,带教老师应该改变教学重点、丰富教学内容,在实习生能够熟练操作仪器后,转为指导学生进行仪器的设置维护工作。当前,室内质量控制已经成为实验室质量保证体系的重要组成部分,带教老师还应该带领学生熟悉质量控制程序,掌握Levey-Jennings质控图、即刻法质控图及Westgard多规则质量控制方法等,为以后的质量控制工作打好基础。带教老师还可以指导学生尝试编写SOP文件,制作简单的教学PPT,使实习内容多元化。
3检验与临床疏离对实习生带教的影响
卫生部人事司2001年正式设立检验医师岗位,可参与临床诊疗工作[4]。至今十余年过去了,检验医师在大部分三级医院并没有发挥预期的作用,他们很少参与查房、会诊等临床医疗活动,检验科与临床科室在医疗、教学、科研等方面的合作情况也不容乐观。2004年姜梅杰等[5]提出的医学院校检验医学专业设置进一步规范化,重点培养检验医师系列人才的设想依然任重道远。在这种背景下,实习生对检验工作的理解偏向简单与狭隘,例如,对检验结果的解释仅限于是否处于正常范围,没有结合临床综合判断的意识。在实习生管理工作中,带教老师除了指导学生操作实践,还应该指导学生根据不同的临床状况对实验报告进行解读,让实习生树立检验必须结合临床的正确理念。
4工作任务与带教任务的冲突
目前中国医疗资源不足、医护人员工作繁忙,工作任务的繁重易使带教老师对实习生的管理产生不放手或过度放手的倾向。例如,免疫荧光技术等手工项目,操作繁琐,易出现人为误差,带教老师需付出极大的精力指导和监督才能使学生顺利完成实验,为了保证报告的按时发出,部分带教老师会减少教学内容,只让学生了解、观看实验而不放手学生进行实践;对于一些操作判定比较简单的实验技术,如胶体金免疫技术,有些带教老师又会忽略监督指导,放手实习生独立完成而不加审核,这些都是错误的。不放手会使实习生丧失学习兴趣,学无所得;过度放手则可能让带教老师失去纠正错误的机会,造成严重的后果。
5忽视对实习生思想与情商的培养
受社会上拜金主义错误思想的影响,部分学生实习态度不端正,认为实习不过是免费为医院打工,在工作中不积极、不主动,缺乏学习热情。对于这种观念带教老师不能一笑置之,应该及时批评教育。实习是学生进入社会前的试练,正确的态度才能有正确的结果,认真学习带教老师教授的知识和经验,对自己、对社会都将有极大的帮助。除了操作技能的培训,情商的培养也应纳入带教老师的教学范畴。在教学工作中,带教老师应注重学生沟通能力、协作能力的培养,指导学生如何与患者正确沟通交流,带领学生处理简单的医疗纠纷。
关键词:免疫学检验;教学改革;项目教学法
1实验教学目的
免疫学实验教学目的是通过实验教学环节,促进学生对课堂理论知识的理解,在"动手"操作专业基本技能之中培养学生严谨的科学态度、分析问题和解决问题的能力与创新思维。具备对免疫学检验技术的正确选择与应用评价的基本素质,了解免疫学检验学科的发展方向,为将来临床免疫学检验奠定基础。
2实验教学内容安排
3项目教学法的实施
3.2基本技能模块项目实施方法正确的实验技能操作是实验质量的保证,培养学生严谨的科学作风,是以后工作的保障。在实验教学中,要注重学生操作技能的培养,包括基本实验操作手法,基本仪器操作,维护以及生物安全意识等。项目包括凝集反应、沉淀反应、免疫电泳技术、ELISA、斑点金免疫层析技术、荧光免疫技术、免疫细胞检测技术。教学过程:老师提出项目,学生进行实验项目准备包括实验器材准备、试剂的配制,仪器的校准等,这就要求学生对实验内容提前预习。实验过程中保证人人动手,老师随时纠正错误和解答问题,实验结束前老师与学生一起进行实验结果分析及实验方法评价。
3.3临床检验项目模块实施方法依据临床免疫学检验的工作任务设计了5个实验模块:免疫细胞检测,感染性疾病的检测,自身免疫病的检测,肿瘤标志物的检测,特种蛋白的检测。每个模块又选取典型,临床常用的检验项目7个教学项目,包括单个核细胞分析及检测、IgG的检测、梅毒血清学诊断、伤寒血清学诊断、乙肝血清标志物检测、自身抗体检测等。教学实施过程:教师展示病例,提出问题,发放临床标本;学生4人一组进行检测,评价检测结果。病例的选取要符合实践性、针对性,更重要的是具有启发性[4]。如:病例:患者李某某,女,18岁,主述"不规则发热伴大小关节疼痛月余,伴面部蝶形红斑1个月"。患者1个月前无明显诱因出现乏力,发热,体温37~38℃,日光照射后出现皮疹。患病以来,精神饮食差,体重下降5kg。体温37.8℃,脉搏100次/min,呼吸频率20次/min,血压120/90mmHg,口腔溃疡。血清IgG24.5g/L,IgA3380mg/L,IgM2960mg/L,C3补体0.53g/L,C4补体0.08g/L,RF
4教学效果
项目教学法的实施促进教师素质提高。项目实施过程中,学生会查阅大量资料,设计实验路线,在试验过程中若发现问题肯定会向老师请教,教师必须具备扎实的理论基础,丰富的实验技能,有更高的水平的判断力,对于实验中的问题的均能给予解释指导。另外,目前没有适合的教材进行项目教学,因此教师必须自己选择合适的项目内容进行实施,这要求教师选取具有临床价值,难易程度适中,能激发学生学习兴趣,并且能有效的将专业理论与实践结合起来的内容,这就要求教师必须有较高的综合素质。
总之,《免疫学检验》实验实施项目教学法对于培养学生扎实的操作技能、创新能力、综合能力及团队精神具有很大的作用。学生的学习兴趣得到很大提高。学生通过完成对项目的检测过程,锻炼多方面能力,如文献检索、查阅资料的能力,思考问题、解决问题的能力,主动学习,终身学习的能力等。项目教学法选取教学内容均是临床常见检测项目,接近临床实际工作,为学生顺利走上工作岗位做好了铺垫,为临床医疗和患者健康提供更好的服务。
[1]王兰兰.临床免疫学检验的现状与发展趋势[J].中华检验医学杂志,2013,36(1):29-31.
[2]代林远,王利平.以检验项目为载体实施免疫学检验课程改革[J].卫生职业教育,2011,29(12):153-154.
关键词:医学监测仪器,自动化与集成化,模块化,智能化,便携化,环保化,国产化
引言:
随着社会与科学技术的不断发展和进步,医学检验也有了质的飞跃,由以往的纯手工转变为仪器检测。在电脑、微电子以及新型材料不断更新引进的情况下,医学检验仪器也在与时俱进而且品种日渐增多,但多少都存在着一定的不足与局限性。随着计算机、生物化学、电子技术、分子生物学、物理学以及仪器材料学等领域高科技、新技术的出现,医学检测仪器将向自动化与集成化、模块化、智能化、便携化、环保化和国产化等方向发展。
检测仪器自动化与集成化
随着现代检验学以及计算机技术的不断发展,科研及临床部门进一步提高了对临床实验室的要求,自动化仪器也逐渐替代了人工检验,从而大大提高了检验项目的数量以及检验速度。若检验结果的计算、记录与报告仍然采用人工方法来进行,将很难适应以及跟紧实验室的正常运作,我们需要运用计算机网络来解决这一问题。但装备全自动检验系统需要的费用很高,因此在一些中小型医院和经济欠发达地区基层医院的发展被限制。
1、检测仪器模块化
2、检测仪器智能化与简约化
[1]吕勇.滥用抗生素产生的危害及滥用的原因[J].辽宁中医药大学学报,2008,(09):108―109.