生化反应曲线是整个生化反应过程的记录，通过查看反应曲线我们可以知道这个结果是否可靠，也可以发现一些仪器故障（试剂针加样不足、冲洗机构冲洗问题），也能提醒我们光源灯能量不足（俗称，换灯泡），也能查看速率法项目是不是底物耗尽。
那么，到底怎么去看生化反应曲线呢？
一、生化反应曲线基础理论
分光光度仪原理，运用的是朗伯-比尔定律：A=KbcA为吸光度，K为摩尔吸光系数，它与吸光物质的性质及入射光的波长λ有关，c为吸光物质的浓度，单位为mol/L，b为吸收层厚度，单位为cm。Lambert-Beer定律适合于任何均匀非散射的介质，当相应的比色杯每一次通过光路系统时，光路系统会测量并记录下相应的吸光度。
光路系统可以测量后分光后12个波长的相应吸光度。常用波长:340,376,415,450,480,505,546,570,600,660,700,800nm，多数检测项目都使用双波长检测方法。（可去除干扰物对检测结果的影响）
全自动生化分析仪常用的方法：终点法和速率法。
1.终点法
2.连续监测法（速率法）
连续监测法也可用于测定呈线性反应的代谢物浓度，一般是某些基于酶法测定的代谢物。酶活性（U/L）＝ΔA/min×理论（或校准）K值。代谢物浓度CU=ΔA/min×校准K值。
二、反应曲线是什么？
炒菜，应该大家都会吧？
其实，生化项目的检测过程跟炒菜比较相似，炒菜的基本流程是：放油→放菜→放盐，如果每隔18秒，对菜的味道进行打分并记录，再把各个点连接绘成一条曲线的话，炒菜的反应曲线大致是这样的，见下图：
如果只是把油→菜→盐，按顺序放进锅里，这一锅菜应该是没法吃的，对吧？至少得在放油、菜、盐的时候用锅铲搅拌混匀一下，对吧？于是炒菜的反应曲线变成了这样，见下图：
那么，对应的生化项目检测(以奥林巴斯AU系列为例)是这样的：首先，仪器会向反应杯加入试剂1(R1)，紧接着加入样本(S)，搅拌混匀，3分钟后加入试剂2(R2)，搅拌混匀。在这个过程中，仪器会每隔18秒测试一次吸光度并记录，总共28(0-27)个点，然后连接成线，就是我们所看到的反应曲线，见下图：
所以，反应曲线是项目检测整个过程的记录，相当于是一个静态的录像。
三、反应曲线怎么看？
一般正常的反应曲线：a.比较平滑，无明显的跳点；b.加入R2前后吸光度会发生明显的变化(低浓度样本除外)；c.终点法的反应曲线，会有一段曲线的吸光度基本无变化；d.速率法的反应曲线，基本成一条直线(两点速率法除外)。
生化的反应曲线可以分为终点法和速率法两大类，以下列举了一些正常的反应曲线供参考：
1.终点法的反应曲线：
2.速率法的反应曲线：
随着反应的进行，吸光度越来越大，但速率保持不变，R2之后基本成一条直线，无明显跳点(两点速率法除外)，如下图：
注：上图在加入R2之前为虚线，是因为R1+S的体积小于仪器要求的最低的反应总体积。
我们在看反应曲线的时候，眼里是一条曲线，脑袋里面浮现的应该是整个的检测过程，去还原仪器的动作，分析从什么时候吸光度突然变得异常。你可以想象成这盘菜是怎么炒出来的。
四、反应曲线有什么用，什么时候用得着？
1)结果出现负值(终点法项目)
a.反应曲线有可能是一条直线，样本或R2有可能没有加入；
b.R2加入之前的吸光度比加入后还高，试剂1和试剂2位置放反或者严重脂血标本。
2)结果明显偏低(速率法项目)
反应曲线可能变成了类似于终点法的曲线，也就是我们通常说的底物耗尽，需要稀释重测。
3)试剂过期或污染、搅拌棒破损、携带污染以及冲洗站滴水也会在反应曲线上有所体现。
4)总之，在结果比较可疑的情况下，可以调出反应曲线看看是否正常，有助于找出问题所在。
注意事项：
1.不同厂家或型号的仪器，加入样本和试剂的顺序可能不同，比如，日立是S+R1+R2。
3.部分仪器没有把各个点连接起来，所以看到的是由点组成的曲线。
4.看反应曲线时，注意纵坐标的刻度，就像远看是美女，近看就不一定了。
五、常见正常反应曲线简易图
终点法
速率法
六、常见异常反应曲线
1.比色杯异常：
2.搅拌棒问题
3.冲洗站问题
4.底物耗尽
七、如何避免底物耗尽带来的误差？
一方面，在审核报告时，要综合考虑整张报告单各个项目的结果，对有疑问或者矛盾的项目结果，要查看反应曲线，并及时与临床医生沟通，结合病人的情况评估检测报告是否存在偏差。
由于不同厂家的仪器所给定的参数不同，底物耗尽的参数大概分两种：