薛素强1，李冰2，陈盛絮2，唐旭麒1，刘庚明1，林颖仪3，郭霄峰3
1.广州市华南农大生物药品有限公司，广东广州511300；
2.茂名市动物疫病预防控制中心，广东茂名525099；
3.华南农业大学兽医学院，广东广州，510642）
摘要：建设人民群众向往的幸福美满生活，公共卫生管理水平提升是重要的环节，狂犬病的防控是公共卫生管理重要的一部分。随着城乡犬猫等宠物饲养数量的增多，给我国狂犬病的防控提出严重的挑战。优质动物狂犬病疫苗的推广和应用是消灭人间狂犬病的重要技术手段。狂犬病灭活疫苗（dG株）由华南农业大学研制，广州市华南农大生物药品有限公司生产。我们以该疫苗免疫广东省茂名市茂南区联塘村全部犬，之后随机采集免疫后0日，3个月和12个月犬的血清60份，进行狂犬病抗体检测。结果显示，免疫后3个月，狂犬病抗体阳转率由45.00%，提高至90.00%；免疫后12个月，抗体阳转率仍维持在80.00%。该结果表明，狂犬病灭活疫苗（dG株）是一种安全高效的动物用狂犬病疫苗。
狂犬病是由狂犬病病毒侵害中枢神经系统而引起的一种急性致死性人兽共患传染病，病死率高达100%[1]。狂犬病病毒几乎能感染所有温血动物[2]，犬在病毒的传播中起重要作用。建设人民群众向往的幸福美满生活，公共卫生管理水平的提升是重要环节，狂犬病的防控是公共卫生管理的重要部分。随着城乡犬猫等宠物饲养数量的增多，给我国2030年消灭人间狂犬病提出了挑战。优质动物狂犬病疫苗是控制狂犬病的重要武器。2017年8月，广州市华南农大生物药品有限公司联合茂名市动物疫病控制中心在茂名市茂南区联塘村开展“科技下乡”活动，使用狂犬病灭活疫苗（dG株）免疫联塘村全部家养犬，并检测免疫后0天、3个月和12个月犬的狂犬病抗体，以评价狂犬病灭活疫苗（dG株）的免疫效果，为后续狂犬病防控过程中疫苗的选择提供重要的科学依据。
1材料与方法
1.1疫苗
狂犬病灭活疫苗（dG株），500头份，批号:1609108，有效期至：2017年9月12日，由广州市华南农大生物药品有限公司生产、提供。
1.2试验动物
茂名市茂南区联塘村全部家养犬，约500头。
1.3疫苗的免疫及血清的采集
按狂犬病灭活疫苗（dG株）的使用说明书进行。3月龄以上健康犬，每头注射疫苗1头份，之后免疫犬分散在农户家按原状态饲养。于免疫当日，免疫后3个月和12个月随机抽取免疫犬60头，经前肢静脉采血液、分离血清。
1.4狂犬病抗体的检测
样品采集后冷藏运送至华南农业大学兽医微生物实验室（CNAS认证狂犬病抗体检测实验室）以ELISA方法检测免疫犬的狂犬病抗体。所用试剂为SYNBIOTICS生产的ELISA试剂盒。
1.5结果判定
参照OIE陆生动物诊断试验与疫苗手册[3]，抗体滴度≥0.6EU/mL判为保护和抗体阳转。2结果
2.1免疫数量
本次将狂犬病灭活疫苗（dG株）经颈部皮下免疫茂名市茂南区联塘村全部家养犬，共计493头。
2.2抗体滴度与抗体阳转率
免疫前0天、免疫后3个月和6个月随机采集免疫犬的血液，分离血清，以ELISA方法测定犬的狂犬病抗体。结果显示，免疫前仅有27头犬的抗体滴度达到或超过0.6EU/mL，抗体阳转率仅为45.00%，平均抗体滴度2.39EU/mL。免疫3个月后，抗体阳转的犬达到54头，抗体阳转率提高到90.00%，平均抗体滴度为5.37EU/mL。免疫12个月后，抗体阳转的犬仍有48头，抗体阳转率维持在80.00%，平均抗体滴度为3.55EU/mL（表1、表2和图1）。
表1茂名市茂南区联塘村犬狂犬病抗体滴度情况
表2茂名市茂南区联塘村犬狂犬病抗体滴度情况
图1茂名市茂南区联塘村犬狂犬病抗体滴度情况
2.3临床发病情况
茂南区联塘村2017年9月至2018年12月未有犬狂犬病和人狂犬病发病报道。
3分析与小结
3.1疫苗有效性
狂犬病灭活疫苗（dG株）在实验室条件下能产生较高抗体滴度和抗体阳转率[4][5]，但因田间饲养条件的差异，抗体阳转率稍低[5]，但也大大超过了OIE推荐的70%[3]。该疫苗在田间对农村家养犬经1头份/头一次免疫，再次确证免疫后能快速产生抗体，抗体阳转率高；免疫后12个月抗体滴度达3.55EU/mL，抗体阳转率为80.0%，明显高于OIE要求标准。徐彬等[6]对深圳南山区犬猫狂犬病抗体进行了调查，他们发现深圳市经过10年连续使用进口狂犬病灭活疫苗免疫，2017与2018年的强制免疫一个月抗体阳转率分别为81.03%和87.05%，与狂犬病灭活疫苗（dG株）免疫后12个月相当。而深圳市南区免疫犬猫后12个月狂犬病抗体阳转率仅为43.72%[6]，远远低于70%的保护要求，亦远远低于狂犬病灭活疫苗（dG株）免疫后12个月的水平。
3.2疫苗安全性
按1头份/头一次免疫493头犬，观察12个月，没有发现免疫犬死亡、休克、过敏反应等问题，表明该产品安全，可以用于犬的免疫。
3.3免疫程序的调整
使用该疫苗的免疫程序可调整为首次免疫仅需一针，一年免疫一次。作者亲历参与防疫人员的免疫工作，顶着酷暑，冒着狗咬风险，一日走几万步，用时5日才免疫完成。相对其他国产狂犬病灭活疫苗，首次免疫需要2次。防疫人员需要甄别犬是否为首次免疫，然后3周再次重复一次。费事、费力、费财，不利于政府的高效率运转。首次免疫仅需一针，一年免疫一次无疑是好的选择。
3.4坚定做好集中免疫工作
坚定做好集中免疫工作，推进强制免疫，将免疫工作落到实处，茂南区联塘村的免疫效果就是绝佳的例证。使用好的国产疫苗经过一次免疫，就可达到70%保护的要求，2030年国家消灭狂犬病是可期待的。
参考文献：
[1]陶田谷晟，杨显超，吴秀娟，等.上海地区犬类主要疫病血清学调查[J].上海畜牧兽医通讯，2017(3)：24-25.
[2]肖璐，王忠田，滕颖，等.狂犬病的流行现状和防控措施[J].中国兽药杂志，2010，44(9):53-57.
[3]世界动物卫生组织（OIE）编著，农业部兽医局组译.OIE陆生动物诊断试验与疫苗手册(哺乳动物、禽类与密蜂)[M]，2012第七版.
[4]孙招金，薛素强，刘晓慧，等.ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较[J].中国预防兽医学报，2003，（3）:204-206.
[5]施赫赫，宋伟科，黄永亮，等.狂犬病基因工程灭活疫苗（Hep-Flury-dG株）的免疫效力[J].中国人兽共患病学报，2012，28(7):664-668.
[6]徐彬，陈言，张柳瞻，等.深圳南山区犬、猫狂犬病抗体及病原检测分析[J].广东畜牧兽医科技，2019，44（1）:38-39.