开篇:写作不仅是一种记录,更是一种创造,它让我们能够捕捉那些稍纵即逝的灵感,将它们永久地定格在纸上。下面是小编精心整理的12篇免疫球蛋白e,希望这些内容能成为您创作过程中的良师益友,陪伴您不断探索和进步。
鼻息肉是耳鼻咽喉科的常见病,患病率约占成年人的1%~2%,术后复发率约为10%~20%[1],是一种由多种因素所致的鼻黏膜慢性炎性病变,发生机制尚未十分清楚。其最常见的组织学特点是以嗜酸粒细胞(EOS)为主的炎性细胞浸润和组织水肿。本研究通过检测鼻息肉组织中免疫球蛋白E(IgE)和白细胞介素5(IL-5)水平,同时观察EOS浸润的程度,探讨IgE和IL-5在鼻息肉中EOS浸润聚集机制的作用。
1资料与方法
1.2检测方法将标本室温融化,称重后剪碎,每100mg组织加生理盐水1ml,在冰浴中用BY89-1电动玻璃匀浆器(宁波新芝科技器材研究所)将组织细胞碾碎,用低温离心机(德国)于4℃、以5000r/min,离心10min,取上清液备用。
1.2.1IgE测定使用美国Beckman公司Accessimmoassaysystem,应用连续两步免疫酶法(Sandwich法)检测标本组织中IgE水平。
1.2.2IL-5测定应用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)。试剂盒购自美国TPIInc公司,按照试剂盒说明书进行操作,设零孔及阴性对照孔。用法国PasteurLP400酶标仪测各孔450nm吸光度(A)值。酶标仪根据标准品浓度及A值,自动得出标准曲线,由标本的A值分别在相应的标准曲线上推算出各个组织标本中IL-5水平(ng/L)。
1.2.3组织学观察鼻息肉及下鼻甲黏膜的石蜡包埋标本,切片,苏木精-伊红常规染色。使用NIKONE600型显微镜(日本)行双盲法检测,每个标本随机选取2张切片,从中随机观察10个高倍视野(×400),手工计数鼻息肉组织和下鼻甲黏膜下、血管周围的EOS数,其平均值为该标本EOS浸润数。
2结果
3讨论
鼻息肉是一种常见病,既往多认为鼻息肉的发生与慢性炎症和变态反应有关。近年来随着免疫学和分子生物学的进展,国内外学者认为鼻息肉的发病机制是多因素、多步骤的过程,并发现多种细胞因子在鼻息肉中存在并影响其发生及病理变化[2]。
综上所述,IgE在鼻息肉中高表达,表明局部变态反应存在于鼻息肉中,它对鼻息肉中IL-5的表达上调具有重要作用;IgE与鼻息肉中高表达的IL-5通过不同的方式对鼻息肉中EOS的浸润聚集具有重要作用。使EOS进一步增加聚集,以致损伤上皮细胞黏膜固有层,黏膜固有层疝出导致息肉再次形成。
参考文献
1BachertC,GevaertP,HoltappelsG,etal.Nasalpolyps:fromcytokinesgrowth.AmJRhinol,2000,14:279-290.
2向东,郭剑峰,张呼和,等.CD43、20及总IgE在鼻息肉组织中表达的研究.中华耳鼻咽喉科杂志,2001,15(11):486-488.
[关键词]多发性骨髓瘤;免疫固定电泳;免疫球蛋白;血清蛋白电泳
Laboratorydiagnosisandevaluationof78casesofmultiplemyeloma
HUANGCuibo
(DepartmentofClinicalLaboratory,theNationalHospitalofGuangxiZhuangAutonumousRegion,Nanning530001,China)
[Abstract]Objective:Toevalutethediagnosticvalueofserumimmunofixationelectrophoresis(IFE),serumproteinelectrophoresisandimmunoglobulinassayinthemutiplemyeloma(MM).Methods:Serumsamplefrom78patientswithMMweredetectedandcomparedbyIFE,serumproteinelectrophoresisandimmunoglobulinassay.Results:78patientswithMMofIFEwerepositive.Mbeltappearedin72serumsamples,inwhichIgG,IgA,IgM,freelightchainanddoublechaintypewere52.6%,29.5%,1.3%,15.1%and2.5%.ThemajorMproteinofIgGandIgAwasκtypeand12patientswithrenalinsufficiencyweresubjecttoλtype.Contentofimmunoglobulinandlightchaintypeincreasedobviously,accompanyingwithelseabnormalcomponent.Conclusion:SerumproteinimmunofixationelectrophoresiscanbevaluabletothediagnosisofMMwithaccuratetypeforMprotein,goodspecificity,highsensibility,atthesametimedecreasemisseddiagnosisandmisdiagnosis.
[Keywords]Multiplemyeloma;immunofixationelectrophoresis;Immunoglobulin;Serumproteinelectrophoresis
M蛋白是多发性骨髓瘤(MM)的特征之一,它是由单细胞系浆细胞株所合成的单一免疫球蛋白,免疫固定电泳(IFE)是免疫球蛋白增殖病鉴定的一项新技术,它包括琼脂凝胶电泳和免疫沉淀两个过程的操作,它能对M蛋白进行准确分型和鉴定。笔者将78例多发性骨髓瘤患者血清进行血清蛋白电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋白测定,现分析如下:
1材料与方法
2007年1月~2009年12月在我院住院的多发性骨髓瘤患者78例,按WHO制订的诊断标准确诊,其中,男54例,女24例;男女比例为2.25∶1;最小年龄33岁,最大年龄83岁,中位年龄57岁。其中12例以肾功能不全入院,后确诊为多发性骨髓瘤。
1.2方法
①血清蛋白电泳:采用法国SebiaHydrasys全自动电泳分析系统进行电泳和扫描。②免疫固定电泳:采用法国SebiaHydrasys全自动电泳分析系统及原装配套试剂盒,取按操作规程稀释的患者血清10μl加入点样梳内,经琼脂糖凝胶板电泳后,在每份样本的6个泳道上分别加入抗IgG,抗IgA,抗IgM,抗KAP,抗LAM血清10.5μl。孵育,固定,沉淀蛋白,吸去多余的血清,干燥,酸紫染色,脱色,烘干,观察结果。③免疫球蛋白含量测定:采用美国德灵公司生产的BN2特种蛋白分析仪及原装配套试剂盒,利用免疫散射比浊法进行测定。
78例多发性骨髓瘤分型结果:IgG占52.6%,IgA占29.5%,IgM占1.3%,游离轻链型占15.1%,其中IgG,IgA型以κ型为主。首诊以肾功能不全入院的12例患者中,IgGλ型6例,IgAλ型3例,IgGκ型2例,LAM型1例,λ型占了75%。
78例多发性骨髓瘤血清免疫固定电泳检出率均为100.0%,血清蛋白电泳的检出率为92.3%,其中IgA和轻链型血清蛋白检出率分别为82.0%和63.0%。因此免疫固定电泳的检出率明显高于血清蛋白电泳。
各型多发性骨髓瘤的免疫球蛋白定量结果见表1。表1显示同型的免疫球蛋白显著升高。
表1各型多发性骨髓瘤的免疫球蛋白定量结果(mg/dl)
Tab.1Quantitativeresultsofvarioustypesofmultiplemyelomaimmunoglobulin(mg/dl)
血清蛋白电泳虽然具有简单、快速、经济的优点,但在多发性骨髓瘤出现M蛋白早期或非恶性单克隆γ球蛋白增多时,多克隆性免疫球蛋白常不减低,单克隆性蛋白因含量低,在血清蛋白电泳中M蛋白峰弱或隐含于正常β或γ区带而被忽略。另外轻链病和重链病的M成分在蛋白电泳图上通常不明显,在血清蛋白电泳中不一定出现M带,易造成漏诊,此时应进行免疫固定电泳,因免疫固定电泳灵敏度为0.5~1.5g/L,其灵敏度高于血清蛋白电泳。在本组实验中,血清蛋白电泳检出率为92.3%,其中轻链型检出率仅占63.0%,IgA型检出率为82.0%,免疫固定电泳检出率均为100.0%,检出率明显高于血清蛋白电泳,而且免疫固定电泳能对M蛋白进行准确分型。M蛋白的分型对多发性骨髓瘤的诊断和鉴别诊断、预后及治疗具有重要意义。由于不同的免疫球蛋白类型会出现不相同的临床结果[4]。免疫固定电泳能有效地减少漏诊,同时能快速地为临床提供确诊依据。
多发性骨髓瘤是单克隆浆细胞恶性增殖,产生的免疫球蛋白是均一的单克隆性,呈同一型、同一亚型、同一基因型。恶性浆细胞的增生,抑制正常免疫球蛋白的产生,因此M蛋白所属免疫球蛋白显著增高(大多在30g/L以上)[5]。由表1可知,不同类型的多发性骨髓瘤中,同型的免疫球蛋白明显升高,其他各种免疫球蛋白正常或相对降低。M蛋白的数量反映肿瘤容量的大小和单克隆增生的程度,而免疫球蛋白定量测定有助于确定M蛋白的类别及数量。因此,多发性骨髓瘤患者应进行免疫固定电泳对M带准确分型后,测定免疫球蛋白含量有助于临床观察疗效。
免疫固定电泳技术是一种特异、灵敏及分辨率高的快速分离及鉴别单克隆蛋白的方法,它具有比骨髓细胞学检查更简单、快速的优势。因此免疫固定电泳是快速鉴别与诊断多发性骨髓瘤的最理想的方法,同时免疫球蛋白的测定能进一步印证分型结果,并能给临床观察疗效提供有利的依据。
[参考文献]
[1]杨志才,高玉杰,张春明,等.多发性骨髓瘤血清蛋白电泳与免疫分型[J].国际检验医学杂志,2005,26(1):34-35,38.
[2]KyleRA,childJA,AndersonK.Criteriafortheclassificationofmonoclonalgammopathies,multiplemyelomaandrelateddisorders:areportoftheInternationalMyclomaWorkingGroup[J].BrJHaematol,2003,121(5):749-757.
[3]KnudsenLM,HippeE,HjorthM,etal.Realfunctioninnewlydiagnosedmultiplemyeloma――ademographicstudyof1353patients,TheNorclicMyelomanstudyGroup[J].EurJHoematol,1994,53(4):207-212.
[4]KloucheM,BradwellAR,WilhelmD,etal.SubclasstypingofIgGparaproteinsbyimmunofixationelectrophoresis[J].ClinChem,1995,41(10):1475-1479.
近日笔者遇上这么一个病人:她因为在产前检查中发现患有乙肝,其丈夫坚持一定要其引产,理由是乙肝会传染给腹中胎儿。那么问题有没有如此严重呢
患了乙型肝炎或是乙肝病毒携带者的妈妈,她们所生的婴儿有40%以上可因垂直传播而染上乙肝病毒。若妈妈的e抗原阳性或是其他复制指标阳性,则婴儿染上乙肝病毒的机会更大,可达90%以上。那么,是不是这样的妈妈就没有办法保护她们的孩子呢当然不是。
目前,临床上已采取这样的方法乙肝妈妈在怀孕的最后3个月里,每月分别注射乙肝高效价免疫球蛋白(HBIG)200国际单位,新生儿在出生后24小时内,倘若条件允许,则最好在6小时内注射乙肝高效价免疫球蛋白200国际单位,15天后再注射200国际单位的乙肝高效价免疫球蛋白,然后分别于出生后1个月、2个月和7个月注射基因乙肝疫苗10微克。倘若是e抗原阳性的母亲,则基因乙肝疫苗的注射剂量为20微克。注射部位为上臂三角肌皮下或肌肉。据统计,使用这种接种方法,乙肝或乙肝病毒携带者的母亲所生的新生儿保护率可达95%。
但是,我们仍遗憾地看到,仍有5%左右的乙肝和乙肝病毒携带者妈妈所生的婴儿,在进行免疫接种后半年以上仍不产生乙肝表面抗体(抗HBs),或仅产生低滴度的乙肝表面抗体(小于10国际单位/升)。这种情况即属于免疫失败,这部分婴儿仍可感染乙肝病毒。这种免疫失败的原因可以从以下几个方面分析:
宫内感染:胎盘受到某些病理和生理影响,通透性发生改变,乙肝病毒可通过胎盘而侵入胎儿体内。由于胎儿尚未发育完全,很容易产生免疫耐受,或乙肝病毒基因与胎儿肝细胞基因发生整合,这种胎儿分娩后虽经乙肝高效价免疫球蛋白及乙肝疫苗注射,仍不能使已有的感染消除。
免疫功能低下:免疫功能低下的人,乙肝表面抗体产生比正常人低。如果乙肝病毒潜入白细胞、肝脏或其他组织中,则乙肝高效价免疫球蛋白不能中和它,当乙肝表面抗体滴度降低后,乙肝病毒会再次出现于血中。
乙肝病毒低水平感染:乙肝病毒低水平感染,也可以造成免疫失败。
基因变异:乙肝病毒基因变异也可以造成免疫失败。疫苗注射后虽可产生乙肝表面抗体(抗HBs)。但同时乙肝表面抗原也出现阳性。
其他因素:如被丙肝病毒和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者,对乙肝疫苗反应一般很差。另外由于乙肝疫苗免疫原性不足、剂量不足等原因也可造成免疫失败。
对于以上种种情况所致的免疫失败者,宜进行重复接种,再补种一次基因乙肝疫苗,最终约有半数可出现有效免疫。
【关键词】六味地黄丸;胃溃疡;免疫球蛋白;白细胞介素-2;中西医结合疗法
Keywords:Liuweidihuangpills;Gastriculcer;Immunoglobulin;IL-2;Chinesetraditionalmedicine
抑制胃酸分泌是最常用的促进溃疡愈合手段,尽管H2受体拮抗剂及质子泵抑制剂使治愈率明显提高,但病情容易反复,难以痊愈。消化性溃疡中医辨证多有不同程度的脾气亏损,导致患者机体免疫功能发生障碍,处于相对抑制状态[1]。大量研究表明,六味地黄丸具有补益脾胃的功效,对机体免疫系统具有明显的调节作用[2]。因此,本实验据此采用在西药抗酸药治疗方案的基础上,辨证加服中药六味地黄丸,观察六味地黄丸对大鼠乙酸胃溃疡模型的治疗作用,探索其辅助抗酸药物治疗胃溃疡的机理。
1材料
SD大鼠30只,雌雄各半,体重(180±20)g,由浙江大学实验动物中心提供;六味地黄,河南省宛西制药股份有限公司产品;雷尼替丁胶囊,杭州民生制药有限公司产品;免疫球蛋白试剂盒,四川迈克科技有限责任公司产品;IL-2ELISA试剂盒为RD公司产品。
2方法
2.1动物模型建立及分组取大鼠24只,参照Okabe乙酸诱导法[3],大鼠禁食16h,3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,剑突下作腹正中切口,分离出胃,以内径4mm的玻璃管按在胃前壁胃小弯角切迹下方约5mm处的浆膜面上,向玻璃管内注入100%乙酸0.1ml,持续1min,用生理盐水棉签擦拭2次,轻拉大网膜覆盖在乙酸涂抹面,将胃还纳入腹腔,缝合腹壁。造模3d后,随机分为4组,每组6只:模型对照组(以生理盐水等量灌服)、六味地黄丸组(20g·kg-1灌服)、雷尼替丁组(30mg·kg-1灌服)和六味地黄丸加雷尼替丁组(六味地黄丸20g·kg-1加雷尼替丁30mg·kg-1灌服)。另取6只未造模大鼠作为正常对照组,予等量生理盐水,各组动物均每d给药,7d后提取标本。
2.2观察指标
2.2.1溃疡指数和抑制率分别结扎贲门、幽门端后取胃,向胃内注射中性甲醛溶液固定胃壁15min,然后沿胃大弯剪开,测定溃疡指数和抑制率。以溃疡面积作为溃疡指数,溃疡面积(S)=1/4×溃疡长径(DL)×短径(DS)×π;抑制率(%)=(对照组损伤指数-给药组损伤指数)/对照组损伤指数×100%。
2.2.2血清免疫球蛋白及IL-2含量的检测大鼠眼眶采血2ml,静置30min,3000r/min离心30min,取血清放入20℃冰箱保存待测。采用单向免疫扩散法检测血清IgA,IgG,IgM含量,ELISA法检测血清IL-2的变化。
2.3统计学处理应用SPSS统计分析软件对数据进行统计学分析,数据均以±s表示,做差异的显著性分析,P
3结果
3.1六味地黄丸对各组大鼠溃疡指数及溃疡抑制率的影响肉眼观察,正常对照组大鼠胃粘膜光滑,未见充血、水肿及溃疡灶;模型对照组,溃疡灶与溃疡边缘有明显分界,侵犯粘膜并穿越粘膜下层或深达肌层,溃疡灶表面覆盖白苔,边缘充血水肿,呈典型的胃溃疡病理改变(图1a)。六味地黄丸组(图1b)、雷尼替丁组(图1c)和六味地黄丸加雷尼替丁组(图1d)比模型对照组溃疡指数均明显降低(P
3.2六味地黄丸对各组大鼠血清免疫球蛋白及IL-2的影响实验结果显示,正常对照组、模型对照组和雷尼替丁组间血清免疫球蛋白IgA,IgG,IgM差异无显著意义(P>0.05);六味地黄丸组、六味地黄丸加雷尼替丁组与上述3组相比较,IgA、IgM含量明显升高(P
与正常对照组比较,aP
4讨论
综上所述,制酸剂在大鼠乙酸胃溃疡的治疗中仍占主导地位,六味地黄丸通过提高细胞免疫和体液免疫水平,对大鼠乙酸胃溃疡具有治疗作用,在联合抗酸药药物治疗胃溃疡中,对于提高疗效有一定的辅助作用。本研究应用中医辨证施治传统理论,通过中西医结合的方法,探明六味地黄丸辅助抗酸药药物治疗胃溃疡的作用和机理,在促进溃疡愈合的治疗中弥补了西药的不足。但是六味地黄丸通过何种途径提高血清中IL-2、免疫球蛋白IgA,IgG,IgM的水平,其在剂量、疗程、优化完善方剂及治疗方案等方面还有待进一步深入的研究。
[1]李瑞炎.胃癌患者T细胞亚群的检测及临床价值[J].数理医学杂志,2003,16(2):171.
[2]赵素贤,王秀琴,李宝红.大鼠实验性脾虚胃溃疡证病结合模型回肠5-HT及其受体和IL-2、IL-6变化的研究[J].解剖学报,2007,38(2):226.
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[8]姬艳,王虹.胃溃疡患者血清IL-2、IL-6水平[J].放射免疫学杂志,2001,14(6):367.
【关键词】POEMS综合征;心脏病变
POEMS综合征是一组病因不明,以多系统器官受损为表现的浆细胞病或浆细胞异常增生综合征,临床比较少见,并以神经系统病变为突出表现[1-3]。我院在2010年4月收治1例以心脏病变为首发症状的POEMS综合征患者,现报告如下。
1临床资料
1.1病历摘要
患者,男性,63岁。入院前8月无明显诱因,出现活动后胸闷,胸骨后气堵干,自行休息3~5min左右缓解,晕厥,黑朦摔倒在地,约2min后自行清醒,未予重视。之后症状进行性加重,于3个月前就诊我院心内科,诊为“亚急性心肌梗死”经拜阿司匹林,氯吡格雷,达肝素钠,单硝酸异山梨酯扩冠,阿托伐他汀钙"等治疗,症状好转出院。14天前出现胸骨中下段闷痛,胸骨后气堵感加重,静息状态仍感气促。稍活动气促明显,夜间喜高枕卧位(大约2~3枕),偶有夜间阵发性呼吸困难。查体:T36.0℃、P50次/min、R12次/min、BP110/70mmHg。神清,全身皮肤及黏膜无黄染,浅表淋巴结未触及肿大,口唇无紫绀,伸舌居中,颈软,颈静脉稍充盈无怒张,双中下肺可闻及湿性音,心界稍向左下扩大,心率50次/min,律齐,S1低钝,S2中强,各瓣膜听诊区未闻及杂音,腹平软,无压痛、反跳痛,肝脾肋下未触及,肝肾区无扣击痛,移动性浊音阴性。双下肢轻度浮肿,双侧腱反射减弱,双侧巴氏征、克氏征、布氏征阴性。
1.2实验室辅助检查
2讨论
[1]韦中玲,汪兴洪.POEMS综合征一例[J].皖南医学院学报,2010,29(2):127.
[2]陈兴泳,孟祥武,唐荣华,等.POEMS综合征18例临床分析及文献复习[J].中风与神经疾病杂志,2010,27(3):257.
[3]张勇,陈文明.POEMS综合征研究与治疗进展[J].中国误诊学杂志,2009,9(1):12-13.
HBV基因组(HBV-DNA)由双链不完全环形结构的DNA组成,含3200个核苷酸。由于其宿主范围较小,体外细胞培养分离病毒尚未成功。近年随着分子克隆技术的应用及体外培养细胞系转染的成功,对HBV复制过程有了进一步的了解。HBV-DNA分为负链(长链)及正链(短链)所组成。其负链有4个开放读码框架(ORF):①S基因区,由S基因,前S2(pre-S2)基因、前S1(pre-S1)基因组成。②C基因区,由前C基因和C基因组成。③P基因区,编码HBV-DNAp,并具有逆转录酶活性;④X基因区,编码HBxAg,并具有激活HBcAg基因的作用。
HBV突变株研究:由于HBV复制方式有其特殊性,即mRNA中间体进行逆转录过程中,由于缺乏校对酶易发生HBV-DNA序列内变异。①S区基因突变导致HBsAg亚型改变及血清HBsAg阻性、HBV-DNA阳性乙型肝炎,使临床诊断困难。一些人接种乙肝疫苗后产生抗-HBs,但仍可被HBV的S区基因突变株感染,而逃避宿主的免疫反应。②前C基因区突变与HBV感染后免疫及重型肝炎发病有关。③P区基因突变可致HBV复制减弱或停止。④X区基因突变可使HBxAg合成障碍。
乙型肝炎的主要发病机制是肝细胞受乙肝病毒入侵后,并不直接引发肝细胞病变,乙肝病毒复制的表面抗原、e抗原和核心抗原都释放在肝细胞膜上,激发人体的免疫系统辨认,并发生反应,这种在细胞膜上发生的抗原、抗体反应可造成肝细胞的损伤和破坏,从而引起一系列的临床症状。
乙肝病毒的抗原与肝细胞膜结合要产生新的抗原,叫肝细胞特异性抗原(LSP)。人体免疫系统在产生肝细胞膜特异性抗体的同时会刺激K细胞(杀伤细胞)K细胞通过肝细胞膜上的Fe受体与肝细胞膜的特异性抗体复合物结合,对肝细胞起杀伤作用,同时消灭部分病毒,(称为ADCC)。当人体免疫反应不足时,抵抗力降低,这种引起消灭部分病毒的作用时强时弱,以致不能完全清除乙肝病毒,造成慢性肝细胞病变就周而复始的持续存在,导致疾病迁延不愈。由于乙型肝炎的特殊发病机制使其不容易治疗,所以搞好乙型肝炎的预防特别重要。
特异性免疫预防
乙肝疫苗预防:乙肝疫苗预防是根本途径。自1986年起我国已经大批量生产血液性乙肝疫苗,经上亿次接种证明了该疫苗的免疫原性且安全。
(1)接种对象:所有新生儿、学龄前儿童为主要对象,其次为乙肝患者和表面表面抗原(HBsAg)携带者和密切接触血液的人员,如医务人员、血液透析者与意外受乙肝病毒感染者。
(2)免疫途径:乙肝疫苗的免疫途径有肌肉和皮下注射可分为臂三角肌和臀部两种,一般不主张臀部注射,因为臀部脂肪丰富妨碍乙肝疫苗的吸收,不能诱导产生足够的表面抗体,故以臂三角肌为宜。对婴儿可接种大腿前外侧肌肉,皮下接种乙肝疫苗适宜血友病患者,可防止肌肉注射引起的血肿。
(3)免疫程序剂量:①对表面抗原阴性母亲的新生儿可采取0、1、6月龄程序,每次10μg。②表面抗原和e抗原(HBsAg)和(HBeAg)双阳性的母亲所生的新生儿应予生后6小时内注射乙肝免疫球蛋白(HBIC)1支,生后1个月再注射1支乙肝免疫球蛋白(HBIC)。2、3、6月龄时各注射1支20μg的乙肝疫苗。③对单纯表面抗原阳性母亲的新生儿,应0、1、6月龄接种20μg的乙肝疫苗。④急性乙肝病毒感染者和密切接触者,应检查表面抗原、表面抗体和核心抗体(HBsAg)、抗-HBS和抗-HBC三项均为阴性者,为易感者,按0、1、6个月程序接种30、10、10μg乙肝疫苗。
非特异性预防
主题词抗乙肝免疫核糖核酸
透天凉带病原状态/针灸疗法肝炎,乙型/针灸疗法T
多年来,治疗由于母婴垂直传播而成慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者,欲使乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阴转,较因为其它传染途径所致之HBsAg阳性者,着实难矣。笔者1996年1~8月应用"透天凉"针刺法联合抗乙肝免疫核糖核酸(抗HBViRNA)专项治疗因垂直感染的慢性HBV携带者(ASC)64例,并与单用抗HBViRNA进行对照,其结果差异有明显意义(P
共观察128例,男86例,女42例;年龄14~27岁;病程最短13.5年,最长26年,平均为18.5年。所选病例之母或患有多年慢性乙型肝炎(CPHB),或为ASC,而且血清HBsAg及乙肝病毒e抗原(HBeAg)为双阳性。其中以母亲为主体的家庭HBsAg聚集现象的84例,另有27例患者之父HBsAg及HBeAg亦为双阳性。本组病例大多无临床症状及阳性体征,就诊前查肝功能均正常。其乙肝病毒标志物(HBVM)检测结果:应用聚合酶链氏反应(PCR)法测得全部病例血清乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)均为阳性。其中HBsAg、HBeAg及乙肝病毒核心抗体(抗HBc)阳性者56例;HBsAg、乙肝病毒e抗体(抗HBe)及抗HBc阳性者72例。按就诊日期先后随机分为治疗及对照两组,每组64例。两组于治疗前均分别检测了免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及淋巴细胞转化试验(LTT),其中治疗组免疫球蛋白有36例低于正常值,15例略高于正常值,余13例正常。LTT有41例低于正常值,23例正常。对照组免疫球蛋白有32例低于正常值,14例略高于正常值,余18例正常。LTT有39例低于正常值,余25例正常。两组临床资料经统计学处理P>0.05,有可比性。
2治疗方法治疗组肌肉注射抗HBViRNA(北方制药厂生产)3mg/次,每周2次;另采用"透天凉"手法针刺足三里、内关、合谷穴,得气后须"动留针"(即每隔5分钟使用透天凉手法行针1次),30分钟后起针,每日1次。对照组肌肉注射抗HBViRNA3mg/次,每周2次。两组均3个月为一疗程,两个疗程后即停止治疗。每个病例均于停止治疗后随访1年,在观察期间两组均停止使用任何抗病毒、护肝及免疫调节剂等药物。
3治疗效果
两组治疗1疗程后血清HBVM各项阴转率为14%~26%,且两组间差异无明显意义,P>0.05。治疗2个疗程及停止治疗1年后随访情况见表1、表2。
从表1可以看出治疗2个疗程后,血清HBVM阴转率治疗组已明显优于对照组,经统计学处理P
治疗2个疗程以后,两组均复检了免疫指标。治疗组中免疫球蛋白原低于及略高于正常值者均恢复至正常,原正常者无变化;LTT原低于正常值者亦皆恢复至正常,原正常者亦无变化。对照组免疫球蛋白及LTT原低于正常值者部分病例恢复至正常,原正常及高于正常值者无明显变化。
4体会大多学者认为,ASC之所以持续HBsAg阳性,主要是宿主产生免疫耐受现象。因此,如何促使机体产生正常的免疫应答,是清除HBV的重要手段。有文献报道,应用"透天凉"法针刺足三里、内关、合谷穴,可以增强人体的免疫功能,亦可以调节人体的免疫状态[1]。
本文治疗组经临床验证,疗效确切。对照组用药后血清免疫指标原增高者则未能得到改善。足三里是强壮穴,与内关、合谷相配,确能补虚扶正,激发人体正气,进而祛除病邪。本文治疗组其HBVM阴转率无论近期或远期效果均优于对照组,P
抗HBViRNA用于治疗乙型肝炎曾一度被临床医生所认可,由于其疗效逊于干扰素等药物,故近期有被冷落之势。但该药或改变给药途径[2],或与它法(如本文"透天凉"针刺法)联合应用,其效果仍不亚于其它抗病毒或免疫调节剂。"透天凉"针刺法是一种复式补泻手法,是从《内经》针下寒的基础上发展而来的,其操作比较复杂,只有熟练掌握其基本要领,方能达到预期的治疗效果。
5参考文献
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2蔡聪麟,等.大剂量抗乙肝免疫RNA腹腔注射治疗慢乙肝的疗效观察.临床肝胆病杂志,1998;(1):63
1产前护理
1.1加强围生期保健
孕妇在妊娠20周左右需做乙肝六项化验。凡孕妇血清试验HbsAg(+)者应在传染科和产科医生共同监护下,平安度过孕期。做好产前检查。如果HbsAg(+)者,需要进一步检查e抗原,核心抗体为新生儿接种疫苗做好准备。同时定期复查肝炎病毒血清标志物及肝功,密切观察有无肝炎症状如乏力、恶心、厌油肝区痛等症状,如有以上症状随时看医生。
1.2饮食护理
孕期加强营养满足胎儿营养需要,孕妇应多摄取高蛋白、高碳水化合物和高维生素食物。
1.3HbsAg(+)母亲在怀孕第7、8、9月份注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)200IU,HBIG能起到宫内阻断作用,降低胎儿在官内感染率。母婴传播是乙肝病毒传播的主要途径。母婴传播引起乙肝病毒感染约占婴儿感染1/3。而官内传播是母婴传播的一种。乙肝免疫球蛋白直接中和母亲血中游离病毒颗粒,降低母体外周血中HBV浓度,减少HBV胎盘传播。孕期多次注射HBIG,抗-HBs通过胎盘到达胎儿体内,使期在宫内获得被动免疫,减少HBV宫内感染。由于婴儿T细胞功能尚未完全发育,对HbsAg有免疫耐受,容易成为慢性携带状态。以后发展为肝硬化或原发性肝癌。因此HbsAg(+)孕妇在孕7、8、9月份注射HBIG尤为重要。
1.4HbsAg(+)孕妇有肝功变化,有肝炎临床症状者,产前护理如下。
1.4.1隔离
按乙型肝炎隔离。消化道隔离。孕妇用品、餐具应专用。用品应严格消毒处理。产科门诊设有专用诊查室,室内物品按传染科常规消毒处理。
1.4.2健康教育
对孕妇做好卫生知识宣传rqg。传授卫生防疫知识,向孕妇及家属讲解肝炎与母婴的相互影响和利害关系。隔离可以避免传染家人重要意义。
1.4.3妊娠早期妊娠早期患有急性肝炎。为症状轻者应积极治疗,可继续妊娠。慢性活动性肝炎妊娠后对母婴威胁较大,故适当治疗后终止妊娠。
1.4.4妊娠中晚期尽量避免终止妊娠、避免手术、药物对肝脏的影响,加强胎儿监护,防治妊娠期高血压疾病。避免妊娠延期或过期。
1.4.5患有急性肝炎孕妇,至少应于肝炎痊愈后半年,最好两年后怀孕。
1.5加强心理护理
HbsAg(+)孕妇心理压力大,担心婴儿健康,孕期是否平安度过,恐惧分娩过程。因患传染疾病产生顾虑,精神紧张、焦虑,产生自卑心理。我们加强对孕妇心理护理,给其讲解乙肝一些知识,胎儿知识,了解孕期保健、卫生知识,了解分娩过程。
给孕妇以精神上安慰、支持、理解。疏导孕妇紧张情绪,消除思想顾虑,保持孕妇好心态,对当母亲充满信心。
2产后护理
2.1隔离
孕妇住院应住在隔离病房,以免交叉感染。餐具应专用并进行严格的终末消毒,应有专用厕所。临产及分娩应有隔离待产室、产床。产后母婴应严格隔离,母亲不要咀嚼食物给孩子吃防止因口腔粘膜破损而造成传播。转贴于
2.2心理护理
医护人员应主动关心产妇,尽量排除因宫缩引起紧张、恐惧及不适感,消除孕妇因隔离而引起孤独和自卑的心理负担,以促产程顺利进行。
2.3密切观察出血倾向
2.4尽量缩短第二产程,减少孕妇体力消耗。分娩后及时给宫缩剂,以促进宫收缩,减少出血。
2.5注意无菌操作,防止感染。HbsAg(+)产妇在分娩时易将HBV传播给婴儿。在分娩时胎儿接触阴道内血液、分泌物或吸人、吞咽血液和羊水而受感染。分娩时尽量保持新生儿少受损伤,少受羊水和阴道分泌物污染。
2.6注意水电解质平衡,注意血压、尿量变化。
2.7对重症患者,密切注意凝血机制障碍或DIC迹象,严密观察神志情况,以防止肝、肾功能衰竭。
2.8产后应用对肝脏损伤小的广谱抗生素控制感染是防止肝炎病情恶化的关键。给予头孢菌素类或氨苄西林等。如果不易哺乳者及时回奶,不能用对肝脏有损害药物如雌激素、可口服生麦芽或乳房外敷芒硝。
2.9HbaAg(+)产妇哺乳一般认为肝炎产妇不宜喂奶。因哺乳及营养需要量增加都给肝脏加重负担。、由于HbsAg(+)携带者的乳汁有较高滴度,极易传染婴儿,故不应哺乳。但近年来又有新观点。如果母亲血HbsAg、HbeAg、抗-HBc三项阳性或后二项阳性产妇不宜哺乳。乳汁HBV-DNA阳性者不宜哺乳。目前主张只要新生儿接受免疫,仅HbsAg阳性母亲可以为婴儿哺乳。但为了新生儿安全,最好不哺乳。
乙肝疫苗:主动免疫,新生儿出生后24小时内注射乙肝疫苗5ug,生后1、6个月再分别注射乙肝疫苗5ug。新生儿对疫苗的免疫应答良好,体内产生抗-HBs,可有效地保护新生儿肝脏不受HBV的感染。
免疫球蛋白的注射:被动免疫。母亲HbsAg(+)新生儿出生后24小时内注射乙肝免疫球蛋白200IU,二周后再注射乙肝免疫球蛋白200IU,可减少或阻止乙肝病毒进入肝脏。乙肝免疫球蛋白母婴双重免疫,大大提高阻断效果,降低乙肝病毒在宫内感染。
抗核抗体(ANA)谱
ANA是以细胞核成分(核酸、白)为靶抗原的自身抗体的总称,包括抗双链DNA抗体、抗可提取的核抗原抗体等。ANA的检测通常采用间接免疫荧光法,报告中给出阳性滴度以及核型,不同核型通常可以提示ANA中的主要成分,而高滴度ANA阳性对于结缔组织病的诊断有重要意义。
可提取的核抗原抗体(抗ENA)以小分子核糖白(盐水可提取的非组蛋白成分)为靶抗原的自身抗体的总称。以下是最常见的抗ENA抗体。
抗Sm抗体(抗Srmith)常与抗nRNP同时存在,对SLE的敏感性约30%,特异性达99%,因此是SLE的标记性抗体,但是与SLE的疾病活动性无关。
抗SSB抗体抗SSB抗体阳性总是伴有抗SSA抗体阳性,抗SSB抗体较抗SSA抗体对干燥综合征的诊断更具特异性。
抗Scl-70抗体为系统性硬化症的标记性抗体,阳性率低,约为20%。一些研究显示抗Scl-70抗体阳性患者预后不良,易早期出现严重的器官损害。
抗Jo-1抗体是炎症性肌肉病(多发性肌炎/皮肌炎)的标记抗体。但阳性率
抗核糖体P蛋白抗体(抗rRNP)是诊断SLE的特异性抗体,常在SLE活动期存在,阳性率20%左右。抗rRNP抗体阳性患者精神神经狼疮的发生率高。随患者病情稳定,抗rRNP抗体可能消失,但通常需要1-2年后方可能转阴。
抗着丝点抗体(AcA)主要见于硬皮病中。尤其是CREST综合征(即钙化症、雷诺现象、食管运动障碍、硬指及毛细血管扩张)中的阳性率可以高达80%。原发性胆汁性肝硬化患者中抗线粒体抗体阳性的同时常伴ACA阳性。
抗核小体抗体(AnuA)是SLE的早期标记性抗体。阳性率约50%,特异性>95%。
类风湿关节炎抗体谱
需要指出的是,RF在RA中的阳性率仅约70%。因此不能根据RF阴性就排除类风湿关节炎的诊断;RF还可见于多种其他自身免疫性疾病(如干燥综合征、系统性红斑狼疮、系统性血管炎等),在干燥综合征患者中RF阳性率达60%。此外,在肝病、慢性感染、肿瘤患者中也可以出现RF阳性,甚至在正常老年人也可以检测到低滴度RF阳性。因此,不能看到RF阳性就诊断患者为类风湿关节炎,需要详细询问患者的病史,并结合临床情况。
抗磷脂抗体综合征可以在没有任何其他疾病的情况下出现,称为原发性抗磷脂抗体综合征;也常常在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征等患者中出现,这种情况称为继发性抗磷脂抗体综合征。
自身免疫性肝病抗体谱
自身免疫性肝病是由于自身免疫紊乱所介导的慢性肝脏炎症性疾病,主要包括自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化(PBC)和硬化性胆管炎,临床表现为小同程度的肝酶升高、高v-球蛋白血症和自身抗体阳性,严重者可进展为肝硬化,甚至肝衰竭。自身免疫性肝病抗体谱中以下几种抗体临床非常重要,需要了解。
抗平滑肌抗体(SMA)主要见于自身免疫性肝炎,高滴度SMA阳性对其诊断的敏感性>90%。需要注意的是,低滴度SMA还可见于干燥综合征、酒精性肝硬化、炎症性肠病、白塞病、心肌炎、传染性单核细胞增多症、肿瘤等。
抗线粒体抗体(AMA)靶抗原是线粒体膜上的多种蛋白,成分复杂。分为MI-M9等多种亚型,AMA-M2型抗体是PBC的特异性抗体,>1:80阳性对PBC诊断的特异性达97%。
抗SP100在PBC患者中抗SP100的阳性率为10%-30%。可以出现在临床肝损伤表现之前,对于PBC诊断。尤其是AMA阴性PBC患者的诊断具有重要意义。
免疫球蛋白
免疫球蛋白也是人体抵御感染的重要机制,低免疫球蛋白血症者易发生各种感染,分泌型IgA可以通过消化道和呼吸道黏膜,是机体黏膜局部免疫的主要因素。
另外,在人类,IgG是唯一能通过胎盘的Ig类型,母体的IgG通过胎盘转移给胎儿是一种重要的自然被动免疫,对于新生儿抗感染具有重要意义。
补体
补体是存在于正常人和动物血清与组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质,可辅助特异性抗体,介导免疫溶菌、溶血作用,故称为补体补体系统包括30余种蛋白受体,是人体免疫系统的重要组成部分,临床上最常检测的补体成分是c3和c4。
补体增高常见于各种感染性疾病和部分肿瘤性疾病等,类风湿关节炎患者中补体多正常或略有升高,而补体降低往往临床意义更大,常见于SLE活动期、免疫复合物介导的慢性肾小球肾炎、急性链球菌感染后肾小球肾炎等,除对疾病诊断有帮助外,也是判定疾病活动性的重要指标:
人白细胞抗原B27(HLA-B27)
小结
目的制备人原发性胆囊癌单克隆抗体,对其特异性进行研究。方法以胆囊癌细胞系SGC-996免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,获得稳定分泌抗SGC-996单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞。结果杂交瘤细胞符合融合细胞核型特点,有较强的成瘤性。抗体亚类为IgG1。相对应的抗原主要表达在胞质和胞核中,分子量约为67kD。抗体对胆囊癌有较强的免疫反应,其他癌组织、癌旁组织及间质、正常胆囊上皮和成纤维细胞均呈阴性。结论建立一株杂交瘤细胞系,能稳定分泌单克隆抗体,该抗体具有较高特异性。
【关键词】胆囊癌;杂交瘤;单克隆抗体;免疫组织化学/免疫细胞化学
Keywords:HumangallbladderCarcinoma;Hybridoma;MonoclonalAntibody;Immunohistochemistry;Immunocytochemistry
原发性胆囊癌(primarycarcinomaofthegallbladder,PCG)是胆道系统常见的恶性肿瘤,早期无特殊症状,给胆囊癌的诊断,尤其是早期诊断,带来很大困难。寻找原发性胆囊癌特异性肿瘤标志物,为胆囊癌的早期诊断及预后提供可靠、准确的判断指标,已成为研究原发性胆囊癌生物学行为的重要环节。本研究以人原发性胆囊腺癌细胞株为免疫原,制备该细胞株单克隆抗体,并对其特异性进行了研究。
1.1实验动物
Balb/c小鼠,雌性,9~12周龄,购自第二军医大学实验动物中心。
1.2组织与细胞株
胆囊癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、肺成纤维细胞,由同济大学肿瘤研究中心提供;SP2/0骨髓瘤细胞,购自中科院上海细胞所。病理组织切片取自同济大学附属同济医院。
1.3主要试剂
PEG1500、HAT、HT购自SIGMA公司;SABC免疫组化试剂盒购自华美公司;小鼠单抗免疫球蛋白亚型鉴定试剂盒购自晶美公司。
1.4方法成
1.4.1单克隆抗体制备
采用9~12周龄雌性Balb/c小鼠,以5×105SGC-996胆囊癌细胞免疫3次,每次间隔2周,前两次为腹腔注射,末次为尾静脉注射[1]。末次免疫后3天取脾细胞;与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0以5∶1比例在50%PEG1500作用下进行融合。用含HAT的DMEM培养液在96孔板中选择培养,当杂交瘤细胞长满孔底2/3,取上清液用ABS-ELISA法进行克隆筛选,选择对SGC-996细胞呈强阳性反应的克隆,扩大培养于含20%小牛血清的DMEM培养基和5%CO2的孵箱中,部分冻存[2]。1×105杂交瘤细胞接种于注射过石蜡的Balb/c小鼠腹腔中,7天后获得富含单抗的腹水。
1.4.2单克隆抗体鉴定
杂交瘤细胞核型分析、腹水型McAb效价测定按文献报道[3,4]的方法进行。McAb免疫球蛋白类型及亚类鉴定参照试剂盒说明书操作。
1.4.3免疫细胞化学和免疫组织化学染色
参照常规SABC法进行。切片抗原修复,放于0.01M枸橼酸钠缓冲液中,煮沸10min。本实验共检测细胞株7种,肿瘤组织切片47例。
1.4.4单抗识别抗原的提取和分析
以膀胱癌细胞为对照,取对数生长期SGC-996细胞及EJ膀胱癌细胞,用PBS冲洗细胞后,加入细胞裂解液,置冰上放置20min后,用刮匙将细胞从瓶壁上刮下;在4℃条件下,10000r离心20min;取含蛋白质的上清液,常规方法行SDS-PAGE和Westem-blot,二抗为碱性磷酸酶标记的羊抗鼠IgG(1∶500),BCIP/NBT显色。
转贴于
2.1杂交瘤细胞株建立
融合细胞生长情况良好(图1),采用ABS-ELISA法筛选,选取OD值较高而细胞数量较少的孔进行亚克隆,经4次亚克隆筛选抗体阳性率逐次图1融合后7天杂交瘤细胞×400
Fig.1hybridomacells×400(sevendaysaftercombination)提高,达100%。选一株持续分泌单抗并且滴度最高的杂交瘤,命名为4E6。核型分析显示(图2),
图2杂交瘤细胞染色体×400
Fig.2TheChromosomalmorphologyofhybridomacell×400杂交瘤细胞核内既有中间着丝、亚中部着丝点等骨髓瘤细胞染色体标记,又有小鼠脾细胞顶端着丝点染色体标记,染色体数目达100条以上,符合小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的核型特点。杂交瘤细胞接种小鼠腹腔一周后,肠系膜上密布粟粒大小的肿瘤,有较强的成瘤性,(图3)。冻
图3杂交瘤细胞成瘤性
Fig.3tumorigenicityofhybridomacellline存半年后复苏的杂交瘤细胞,仍能分泌抗体,具有较高的活性。
2.2单克隆抗体的生物学特性
小鼠单抗免疫球蛋白亚型鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体亚型为IgG1,轻链类型为κ链(图4)。ABS
图4抗体免疫球蛋白亚型
Fig.4IsotypeoftheMcAb4E6
-ELISA法测定培养上清液及腹水的效价均大于1∶128000,效价较高。免疫组织化学、免疫细胞化学及Westem-blotting发现(图7)该抗体对应抗原蛋白在胞质和胞核中均有表达,分子量约为67kD。
2.3单克隆抗体与肿瘤组织的反应性
细胞系免疫细胞化学的半定量测定(图5A,B),结果见表1。胆囊癌免疫组织化学染色(图6)及各类癌组织免疫组织化学染色的半定量检测见表2。表1免疫细胞化学的半定量结果表2免疫组织化学染色结果
本研究以人胆囊癌细胞为免疫原,用淋巴细胞杂交瘤技术获得了一株能持续稳定分泌抗人胆囊癌单抗的杂交瘤细胞,命名为4E6。阳性克隆筛选中,普通ELISA检测的灵敏度多数报道为20ng/ml~100ng/ml,且间接法ELISA抗原包被浓度需达到1μg/ml~10μg/ml[5]。我们用胆囊癌细胞SGC-996包被96孔板作为抗原对抗体进行检测,并依据文献[6]进行实验方法改进,采用ABS-ELISA法,取得了较好结果。
免疫细胞化学染色结果显示,SGC-996、GBC-SD胆囊癌细胞均呈强阳性反应,而胃癌细胞BGC-803、BGC-823,MCF-7乳腺癌细胞、EJ膀胱癌细胞和WI38人肺成纤维细胞则均为阴性反应。免疫组织化学染色结果,胆囊癌均呈强阳性反应;食管癌、胃癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌、膀胱癌等癌组织和正常胆囊上皮,癌旁组织及间质均为阴性。这些结果说明,该单克隆抗体对胆囊癌有高度特异性,而正常组织则阴性反应,提示其识别的抗原极有可能是一种肿瘤标志物。另外,Western-blot实验中,将膀胱癌作为对照,抽提了胆囊癌和膀胱癌细胞总蛋白,杂交的结果显示,4E6单抗所针对的抗原在胆囊癌中有较高的表达,而在膀胱癌中无表达。进一步验证了免疫细胞化学的结果。
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【Keywords】Cholestasis,intrahepatic
Pregnancy
Estrogens
Progesterone
Immunity,cellular
资料与方法
一、研究对象
选择1996年6月~1997年1月华西医科大学附属第二医院门诊及住院者中,ICP患者50例(ICP组)及正常妊娠妇女50例(对照组),两组产妇年龄分别为27.3±2.4岁,27.03±2.9岁,孕周分别为36.9±1.6周,36.50±2.5周,均为单胎初产妇。ICP组纳入标准:(1)妊娠前无肝脏、胆道等急慢性疾病史;(2)妊娠期出现躯干及四肢皮肤瘙痒;(3)实验室检查,血清总胆酸升高,转氨酶有轻度或中度升高;总胆红素及直接胆红素正常或升高;(4)无皮肤病者;(5)分娩后上述症状及实验室检查均逐渐恢复正常。
二、方法
1.雌、孕激素水平的检测:采用放射免疫法,药盒购自卫生部上海生物制品研究所。
2.T淋巴细胞亚群检测:采用碱性磷酸酶及抗碱性磷酸酶法(APAAP)法,药盒购自军事医学科学院生物制剂发展中心。
3.免疫球蛋白的检测:采用单向免疫扩散法,药盒购自卫生部上海生物制品研究所。
三、统计学处理
结果
一、激素水平的变化
雌、孕激素水平均随孕周增加而升高。两组结果均显示,ICP组雌激素水平高于对照组(P<0.01),而孕激素水平在两组间的差异无显著性(P>0.05),见表1。
表1两组雌、孕激素测定结果(μg/L,)
组别例数雌激素孕激素
对照组5016.92±4.98225.71±84.51
ICP组5025.89±6.85253.77±67.50
二、体液免疫的变化
ICP组的免疫球蛋白IgG水平低于对照组(P<0.01)而免疫球蛋白IgM、IgA及补体C3、C4水平与对照组相比,差异无显著性,见表2。
三、细胞免疫指标的变化
ICP组辅-诱导性T细胞(CD4+)、成熟T细胞(CD3+)与对照组相比,差异无显著性(P>0.05,P>0.2)。细胞毒性-抑制性T细胞(CD8+)水平则较对照组低(P<0.05),CD4+/CD8+比值增高(P<0.05),见表3。
讨论
一、免疫功能的改变与ICP发病的关系
1.体液免疫的变化:妊娠期随着胚胎的生长发育,胎儿的免疫系统相应建立。20周的胚胎即可合成免疫球蛋白。所以,胎儿对通过胎盘透入的母体抗原能够产生免疫反应。然而,正常妊娠时并没有排斥反应发生。究其原因,除免疫耐受外,还存在着其它免疫调节作用,其中之一即为封闭抗体。大量的研究证实,封闭抗体为IgG及其亚类抗体,这种抗体具有保护作用,能与滋养层细胞的表面抗原结合,封闭其抗原决定簇使其不能与母体细胞毒性T细胞结合,并免受母体致敏淋巴细胞的攻击。在临床上已证实,反复自然流产与封闭抗体缺乏有关[1,2]。本研究显示,ICP患者的IgG水平较正常妊娠明显减少,这种封闭抗体的减少导致保护作用减弱,而发生免疫反应。
2.细胞免疫功能的改变:CD4+的主要作用是促进B细胞、T细胞和其它免疫细胞的增殖与分化,协调免疫细胞间的相互作用。CD8+中的抑制性T细胞(Ts)的主要作用是抑制B细胞产生抗体免疫应
表2两组体液免疫指标测定结果(g/L,)
组别例数IgGIgMIgAC3C4
ICP组505.89±0.741.02±0.421.04±0.571.09±0.270.56±0.16
对照组507.89±1.851.15±0.421.017±0.571.02±0.290.62±0.19
P值<0.01>0.05>0.2>0.5>0.1
表3两组细胞免疫指标测定结果(%,)
组别例数CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+
ICP组5069.9±7.2443.37±4.3819.06±1.932.23±0.38
对照组5073.67±6.8145.4±4.8326.43±2.891.73±0.23
P值>0.05>0.2<0.05<0.05
答,在机体的免疫调节中,起主要作用。CD4+与CD8+细胞间通过相互协调、相互制约,从而调控着机体的免疫状态。因此,CD4+/CD8+比值的变化在免疫调控中发挥着更加主要的作用。本实验发现ICP患者CD8+水平明显下降,CD4+/CD8+比值增高,这可能与患者母-胎免疫平衡失调,保护反应减弱,排斥反应增强有关。
转贴于参考文献
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1.乙型肝炎免疫预防措施:最有效的预防乙型肝炎措施就是及时有效地进行免疫接种
1.1.主动免疫:接种乙肝疫苗。乙肝疫苗能刺激机体产生保护性抗体,免疫作用持久,适用于所有的易感人群。
1.2.被动免疫:注射乙肝免疫球蛋白。乙肝免疫球蛋白主要用于接触后的紧急和暂时性预防。
2.乙肝病毒血清标志物的临床意义
在免疫接种前需要做乙肝病毒血清学指标检查,一般检查乙肝的检验项目,有5项,也称乙型肝炎五项指标(HBV-M),或说“两对半”。“两对半”的检查结果,用加减号(即+、-)表示。(+),表示阳性;(-),表示阴性。这5项检查,分别是:表面抗原(简称:HBsAg)、表面抗体(简称:抗HBs)、e抗原(简称:HBeAg)、e抗体(简称:抗Be)、核心抗体(简称:抗HBc)。九种常见模式
2.1.五项阴性,过去和现在未感染过HBV.
2.2.核心抗体(抗HBc)阳a.既往感染未能测出抗-HBs;b.恢复期HBsAg已消,抗-HBs尚未出现;c.无症状HBsAg携带着.
2.3e抗体(抗Be)、核心抗体(:抗HBc)阳性a.既往感染过HBVb.急性HBV感染恢复期;c.少数标本仍有传染性.c.1.HBV感染已过;c.2抗HBs出现前的窗口期.
2.4表面抗体(抗HBs)阳性a.注射过乙肝苗有免疫;b.既往感染;c.假阳性.
2.5表面抗体(抗HBs)、e抗体(抗Be)、核心抗体(抗HBc)阳性急性HBV感后康复.
2.6表面抗原(HBsAg)核心抗体(抗HBc)阳性a.急性HBV感染;b..慢性HBsAg携带者;(c.传染性弱.
2.7表面抗体(抗HBs)、核心抗体(抗HBc)。既往感染,仍有免疫力.HBV感染,恢复期.
2.8表面抗原(HBsAg)、e抗体(抗Be)、核心抗体(抗HBc)。a.急性HBV感染趋向恢复;b.慢性HBsAg携带者;c.传染性弱.即俗称的“小三阳”.
2.9表面抗原(HBsAg)、e抗原(简称:HBeAg)、核心抗体(简称:抗HBc)?急性或慢性乙型肝炎感染.提示HBV复制,传染强.即俗称的“大三阳”.
2.哪些人需要免疫接种乙肝疫苗:接种乙肝疫苗的重点群体有两部分,一部分是新生儿,一部分是成年人
2.1现在新生儿都实行免疫规划,一出生就接种乙肝疫苗;
2.2成人打疫苗前需先进行化验,化验结果显示乙肝病毒表面抗原、表面抗体和核心抗体均阴性,转氨酶正常才可以接种乙肝疫苗。但一般来说为保险起见,凡没有感染过乙肝病毒、自身乙肝抗体不足者都应该注射乙肝疫苗。处于HBV感染高度危险状态的易感者(未感染过HBV的人)应接种乙肝疫苗。主要包括:
①全部新生儿及幼儿园未接种过乙肝疫苗的孩子;
②传染科、口腔科、血液室、透析室和经常接触血液的工作人员;
③新加入某一群体的人员,如新入伍的战士、新入学的大学生;
④从事食品服务行业者及保育工作人员;
⑤发育障碍者,收容所中的患者和工作人员;
⑥血液透析患者;
⑦使用血液制品者;
⑧器官移植前的患者;需长期应用免疫抑制剂者;
⑨乙肝病毒携带者的家庭接触者;
⑩注射成瘾者;长期教养机构中的犯人。
3乙肝疫苗预防接种的具体方法乙型肝炎疫苗全程接种共3针
3.1一般新生儿、儿童、成年人接种乙肝疫苗10vg/支,按0、1、6月免疫,三角肌内注射。