内蒙古农业大学“乳品生物技术与工程”教育部重点实验室2014.05
1．LactobacilluscaseiZhang的分离与筛选
2．LactobacilluscaseiZhang的益生功能评价
a)LactobacilluscaseiZhang对高脂血症大鼠脂质代谢的影响
b)LactobacilluscaseiZhang对机体抗氧化能力的影响
c)LactobacilluscaseiZhang对肝损伤的改善保护作用
d)LactobacilluscaseiZhang对糖耐量受损改善作用和Ⅱ型糖尿病的预防作用
e)LactobacilluscaseiZhang对病原性大肠杆菌的拮抗作用
f)LactobacilluscaseiZhang的免疫调节作用
g)LactobacilluscaseiZhang对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响
h)LactobacilluscaseiZhang在人体肠道中的定植及对肠道菌群的影响
3．LactobacilluscaseiZhang基因组学及蛋白质组学研究
4．LactobacilluscaseiZhang稳定性研究
5．LactobacilluscaseiZhang直投式发酵剂的开发及产业化
6．LactobacilluscaseiZhang在发酵乳制品和发酵豆乳制品中的研究开发及产业化
7．LactobacilluscaseiZhang在益生菌固体饮料、益生菌片剂及益生菌胶囊等健康食品中的研究开发及产业化
8．LactobacilluscaseiZhang研究开发获得的奖励
图1LactobacilluscaseiZhang的益生功能
LactobacilluscaseiZhang研究开发摘要
1.LactobacilluscaseiZhang的分离与筛选[1-10]
LactobacilluscaseiZhang是2001年分离自内蒙古锡林郭勒盟正蓝旗草原上自然发酵酸马奶（Komiss）中的一株具有优良益生特性的干酪乳杆菌（图2~图7）。
酸马奶是以新鲜马奶为原料，经乳酸菌和酵母菌等微生物共同自然发酵形成的酸性、低酒精含量乳饮料，在蒙古族中已有几千年的制作和食用历史。几千年的蒙医临床实践表明，酸马奶对胃肠道、心血管和呼吸道疾病具有明显的辅助治疗作用。
图2内蒙古锡林郭勒草原图3牧民挤马奶
图4马奶自然发酵图5采集自然发酵酸马奶样品
图6L.caseiZhang菌种保藏图7L.caseiZhang扫描电镜图
LactobacilluscaseiZhang是从内蒙古农业大学乳酸菌菌种资源库(中国第一个最大的原创性乳酸菌菌种资源库，保藏乳酸菌3,388株)保藏的243株分离自自然发酵酸马奶中的乳杆菌中优选的1株具有优良益生特性的乳杆菌。该菌株在消化系统中具有优异的耐受胃酸、胆盐和牛磺胆酸钠水解能力。
LactobacilluscaseiZhang在pH2.0的人工胃液中消化3小时后继续在pH8.0的人工肠液中消化24小时后的存活率高达73.5%(图8)。LactobacilluscaseiZhang可耐受的最大胆盐浓度为1.6g/100mL，其对Caco-2细胞的黏附率为4.31%，对牛磺胆酸钠解共轭所产生的游离胆酸量为2.28mM/L。
图8L.caseiZhang在人工消化系统中的耐受能力
利用LactobacilluscaseiZhang全基因组芯片，对发酵乳LactobacilluscaseiZhang菌体和单纯LactobacilluscaseiZhang菌体通过人工胃肠液的转录谱进行了分析(图9)，结果表明，存在于发酵乳中的菌体与纯菌体转录谱差异显著。与发酵乳中的菌体转录谱相比，无发酵乳保护纯菌体的转录谱中大量的基因表达显著上调，说明单纯的菌体在通过人工胃肠道时会面临较多应激因素；与此相反，大部分编码核糖体蛋白、氨基酰-tRNA合成酶以及ATP结合转运蛋白的基因表达显著下调控。这一研究结果与无发酵乳保护情况下菌体细胞存活率较低的研究结果相一致。
图9L.caseiZhang纯菌体和发酵乳保护下的菌体在人工胃液中转运的差异表达基因功能分类
2.LactobacilluscaseiZhang的益生功能评价
2.1LactobacilluscaseiZhang对高脂血症大鼠脂质代谢的影响[11-13]
高脂血症大鼠摄食LactobacilluscaseiZhang(2.0×108CFU/d)30d后，大鼠血液中的甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量分别下降了31.3%和30.8%；肝脏组织中的总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量分别下降了20.4%和17.5%(图10)，同时LactobacilluscaseiZhang可以调节血液中载脂蛋白的代谢，并可显著增加粪便中总胆汁酸的排出。这一研究结果表明，LactobacilluscaseiZhang可显著改善高脂血症动物的脂质代谢，具有良好的降血脂作用。
图10L.caseiZhang可显著降低血液中总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）
及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量，显著提升高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量
图11高脂血症大鼠喂食L.caseiZhang后肝脏中差异表达基因的功能分类
2.2LactobacilluscaseiZhang对机体抗氧化能力的影响[14-15]
用LactobacilluscaseiZhang饲喂大鼠28d(2.0×108CFU/d)，与对照组相比，LactobacilluscaseiZhang可使大鼠肝脏组织中的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活力极显著提高(P<0.01)
图12喂食L.caseiZhang后大鼠肝脏照片和组织切片图
图13L.caseiZhang可显著提高肝脏中GSH-Px和T-AOC水平，降低血液GOT和GTP水平
组A，B和C分别为正常对照组、高脂血症模型组和正常预防组。组A和组C饲喂正常饲料，其余组饲喂高脂饲料。组D、E和F为饲喂由低到高不同剂量L.caseiZhang的干预治疗组。组C、D、E和F中饲喂L.caseiZhang的
2.3LactobacilluscaseiZhang对肝损伤的改善保护作用[16、17]
以酒精性肝损伤大鼠为模型，用LactobacilluscaseiZhang喂饲大鼠30d(低剂量组L：1.0×108CFU/d、中剂量组M：2.0×108CFU/d、高剂量组H：1.5×109CFU/d)，同时灌服65度白酒7g/(kg.bw.d)；对照组不喂饲LactobacilluscaseiZhang，只灌服65度白酒7g/(kg.bw.d)
结果显示：LactobacilluscaseiZhang可显著降低肝脏中碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)的活性(P<0.01)
调节肝脏中CYP3A1/GAPDH和CYC/GAPDH的基因表达水平
图15L.caseiZhang可有效修复酒精性肝损伤肝
以脂多糖和D-半乳糖诱发肝损伤（LPS/D-GalN）大鼠为模型，用LactobacilluscaseiZhang喂饲大鼠30d(1.0×109CFU/d)，试验设计对照组(CTRL)、LPS/D-GalN组（L/G）、LPS/D-GalN+LactobacilluscaseiZhang组（L/G+LCZ）和LPS/D-GalN+地塞米松组（L/G+DXM）。结果显示：LactobacilluscaseiZhang能够显著减低L/G组动物肝脏丙氨酸转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平，同时降低丙二醛（MDA）含量，提高超氧化物歧化酶（SOD）活性。降低肝脏NO的含量及NO合成酶（INOS）的活性、降低肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达。此外，LactobacilluscaseiZhang能显著减低肝脏TLR4的表达以及蛋白质水平、磷酸化的I-κB和核因子NF-κB的转运。
这些结果表明LactobacilluscaseiZhang通过抗氧化和抗炎症的益生特性能够保护由脂多糖和D-半乳糖引起的肝损伤。部分试验数据见图16-18。
图18L.caseiZhang可以有效保护肝脏
2.4LactobacilluscaseiZhang对糖耐量受损改善作用和Ⅱ型糖尿病预防作用[18]
采用高果糖水诱导SD大鼠高胰岛素血症合并糖耐量受损来评价益生菌LactobacilluscaseiZhang（1.0×109CFU/d·只）的预防及改善作用。试验分为正常组（NC）、预防组（LP）和对应模型组（HMⅠ）、治疗组（LT）和对应模型组（HMⅡ）5个组。
结果表明，LactobacilluscaseiZhang可以显著预防和改善糖耐量受损，并显著提高肠道乳杆菌和双歧杆菌数量和显著降低肝糖原含量和梭菌数量（p<0.05
以Ⅱ型糖尿病大鼠为模型，对试验大鼠（正常对照组、预防组（从试验前21d开始喂饲LactobacilluscaseiZhang(4.0×109CFU/d)直至试验结束）、Ⅱ型糖尿病模型组）进行了为期42d的试验，试验结果表明：预防组与Ⅱ型糖尿模型组相比空腹血糖和餐后2小时血糖水平都明显降低(P<0.01
胆汁酸水平(p<0.05
益生菌LactobacilluscaseiZhang可以对糖耐量受损大鼠口服糖耐量曲线AUC表现出良好的预防和改善作用，同时对大鼠Ⅱ型糖尿病的形成和疾病发展有着良好的预防作用。但具体机制存在一定差异。
对糖耐量受损的预防机制主要可能是LactobacilluscaseiZhang可以减少肠道对大量果糖的吸收以及降低GLP-2水平从而降低体重和胰岛素水平。
2.5LactobacilluscaseiZhang对病原性大肠杆菌的拮抗作[19-21]
用LactobacilluscaseiZhang饲喂小鼠15d(4.0×107CFU/d)，然后分别用E.coliO157和E.coliK88对小鼠进行攻毒，试验结果表明，摄食LactobacilluscaseiZhang可以使攻毒后小鼠的存活率由33.4%提高至94.4%(图23)。
攻毒4天后取对照组和实验组未死亡小鼠的肠内容物，用选择性培养基分离纯化大肠杆菌和乳酸菌，并进行基因组ERIC-PCR扩增分析，结果表明停止饲喂LactobacilluscaseiZhang的第4天从小鼠肠道内仍然能分离LactobacilluscaseiZhang，但未分离到E.coliO157和K88，饲喂LactobacilluscaseiZhang可使小鼠肠道中大肠杆菌总数明显低于对照组(p<0.01)
图24L.caseiZhang可显著降低攻毒小鼠肠道中E.coliO157和E.coliK88含量
（M：DL2000Maker；1：E.coliO157；2：E.coliK88；3-16：各试验组小鼠肠道中大肠杆菌。）
2.6LactobacilluscaseiZhang的免疫调节作用[22-29]
用LactobacilluscaseiZhang喂饲小鼠15d(低剂量组（Ldose）：2.5×108CFU/d、中剂量组（Mdose）：5.0×108CFU/d、高剂量组（Hdose）：1.0×109CFU/d)，结果表明：LactobacilluscaseiZhang可明显上调血液中IFN-γ和IL-12水平(P<0.05)
同时LactobacilluscaseiZhang可显著提高小鼠外周血中CD3+、CD4+、CD8+的比例(P<0.01)
上述研究表明：LactobacilluscaseiZhang对小鼠的细胞免疫、体液免疫及肠黏膜局部免疫具有调节功能。
图25L.caseiZhang具有显著的免疫调节作用
结果表明LactobacilluscaseiZhang能够促进巨噬细胞NO、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6以及干扰素(IFN)-β的分泌，还能够提高NO合成酶的转录。此外，LactobacilluscaseiZhang活菌能够显著抑制聚肌胞苷酸诱导的NO、iNOS和TNF-α的表达，并提高TNF-β的表达，能够显著上调聚肌胞苷酸诱导的干扰素调节因子3(IRF3)基因的表达活性。
LactobacilluscaseiZhang能够通过增加巨噬细胞中Toll受体的表达、增强促炎调节因子的分泌以及Ⅰ型干扰素的分泌，进而保持先天免疫系统的敏感性。部分数据见图28、图29。
2.7LactobacilluscaseiZhang对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响[30-33]
以H22荷肝癌瘤小鼠为模型，用LactobacilluscaseiZhang喂饲小鼠12d(低剂量组（Ldose）：2.5×108CFU/d、中剂量组（Mdose）：5.0×108CFU/d、高剂量组（Hdose）：1.0×109CFU/d)。结果显示：摄食LactobacilluscaseiZhang组的巨噬细胞吞噬百分率、吞噬指数、小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-β)含量与对照组比较均有显著提高(P<0.01)
实验组H22肿瘤细胞癌基因Bcl-2蛋白表达明显降低，而抑癌基因Bax蛋白表达增强，与荷瘤对照组相比差异显著(P<0.01)
caseiZhangContorlL.
癌基因Bcl-2在H22肿瘤细胞中的表达情况（Hdose组）
ContorlL.caseiZhang
抑癌基因Bax在H22肿瘤细胞中的表达情况（Hdose组）
图32L.caseiZhang抑制癌基因Bcl-2表达及促进抑癌基因Bax表达的肝脏组织切片图
2.8LactobacilluscaseiZhang在人体肠道中的定植及对肠道菌群的影响[34-35]
结果表明，食用LactobacilluscaseiZhang28天时，LactobacilluscaseiZhang在志愿者粪便中平均含量为8.55log10CFU/g，停止食用2周时为5.52log10CFU/g，这说明LactobacilluscaseiZhang不仅可以在人体肠道中存活，而且可以在人体肠道中定植并繁殖(图33)。
LactobacilluscaseiZhang可以显著增加人体肠道中双歧杆菌属(p<0.01)
应用454焦磷酸测序对食用LactobacilluscaseiZhang的志愿者肠道内菌群构成进行分析，共分析了72份样品（24位志愿者，采集每位志愿者食用前、食用中、食用后3份样品），平均每份样品得到20,749条16SrRNA序列，共得到1,493,928条高质量的16SrRNA序列。通过UnweightedUniFrac聚类分析，发现不同年龄段的人群肠道微生物构成差异显著（p<0.001
中年人服用LactobacilluscaseiZhang后肠道菌群结构趋向于青年人的肠道菌群结构（P<0.001
焦磷酸测序结果也表明：食用LactobacilluscaseiZhang后人体肠道内有益菌群(Bifidobacterium和Lactobacillus)数量显著增加，而致病菌以及潜在致病菌(Clostridium，Escherichia和Serratia)数量有效减少，使肠道菌群趋于健康化(图38、图39)。
3.acilluscaseiZhang基因组学及蛋白质组学研究[36-49]
3.1LactobacilluscaseiZhang基因组学研究
图40L.caseiZhang全基因组图谱
3.2LactobacilluscaseiZhang蛋白质组学研究
图41L.caseiZhang在不同生长阶段2-DE图谱
0代1000代
图43LactobacilluscaseiZhang革兰氏染色显微照片
5.LactobacilluscaseiZhang直投式发酵剂的开发及产业化[51-58]
采用RT-PCR技术系统地研究了LactobacilluscaseiZhang在不同发酵条件和发酵不同阶段16个关键酶基因表达模式的变化，包括葡萄糖激酶、β-葡萄糖苷PTSEII、磷酸-丝氨酸结合蛋白磷酸化酶等，建立了LactobacilluscaseiZhang在高密度发酵过程中的代谢分子机制（图44）。根据LactobacilluscaseiZhang的代谢分子机制和营养需求，对增菌培养基成分和含量进行筛选和优化，确定了LactobacilluscaseiZhang的高密度发酵工艺，发酵液活菌数大于2.0×1010CFU/mL(图45)。
抗冷冻方面的研究中，发现冷冻干燥过程中糖类的添加对LactobacilluscaseiZhang细胞膜的zeta电位、疏水性、流动性和完整性均有不同程度的影响，在此基础上开发出了适合LactobacilluscaseiZhang冷冻干燥过程中有效的抗冻保护剂。
基于上述研究，LactobacilluscaseiZhang经真空冷冻干燥可得到活到活菌数2.0×1011CFU/g以上的高活力发酵剂，可以满足益生菌制剂和各类发酵制品的要求。
2010年6月，合作企业投资6000万人民币，成功的将LactobacilluscaseiZhang发酵剂进行了工业化生产，产品中活菌数大于2.0×1011CFU/g，达到国际同类产品水平（图46～图49）。
图463000余平方米的GMP生产车间图47L.caseiZhang高密度发酵系统
图48全自动控制系统图49L.caseiZhang发酵剂品质控制
6.LactobacilluscaseiZhang在发酵乳制品和发酵豆乳制品中的研究开发及产业化[59-81]
6.1LactobacilluscaseiZhang在牛乳和豆乳中的发酵及贮藏特性的研究[59、60]
将LactobacilluscaseiZhang按1.0×107CFU/mL接种量接种于牛乳中，37℃恒温发酵，结果显示，至发酵终点（pH4.5）时，其活菌数为1.0×108CFU/mL；将发酵乳4℃贮藏28天，其活菌数可保持1.0×108CFU/mL以上，发酵乳具有良好的口感和风味（图50、图51）；并且，LactobacilluscaseiZhang可以有效抑制霉菌和酵母菌对发酵乳的后期污染（图52）。
将LactobacilluscaseiZhang按1.0×107CFU/mL接种量接种于豆乳中，37℃恒温发酵，至发酵终点（pH4.5）时，其活菌数可达1.3×109CFU/mL（图53），4℃贮藏28天期间，LactobacilluscaseiZhang在豆乳中活菌数仍保持在1.0×109CFU/mL，活菌数无明显降低（P<0.01
图53L.caseiZhang在豆乳和牛乳发酵过程中pH及活菌数的变化情况
为了探明LactobacilluscaseiZhang在豆乳中生长的分子机理，利用LactobacilluscaseiZhang全基因组基因芯片和蛋白质组技术对其在牛乳和豆乳发酵过程中进行了转录组学和蛋白质组学比较分析。
蛋白质组学分析表明：LactobacilluscaseiZhang在豆乳中生长，较牛乳共有144个差异表达蛋白点，其中迟滞生长期34个，对数生长期64个，稳定生长期46个，三个时期表达上调控蛋白点分别为24个、34个和33个，编码这些表达上调控蛋白质的基因主要参与氨基酸和核苷酸的转运和代谢（图55）。
图55L.caseiZhang在牛乳和豆乳发酵过程中不同时期的蛋白质表达图
6.2LactobacilluscaseiZhang发酵豆乳饮料、发酵乳及活性乳酸菌饮料中的产业化应用
根据上述基础研究数据，建立并优化了LactobacilluscaseiZhang发酵乳和发酵豆乳益生菌饮料的生产工艺。2010年，采用独特的2段发酵工艺，LactobacilluscaseiZhang益生菌发酵豆乳饮料—百益多(LactobacilluscaseiZhang与BifidobacteriumlactisV9共同发酵)在青岛君益食品有限公司投产，产品中活菌（LactobacilluscaseiZhang和BifidobacteriumlactisV9）达到580亿CFU/100mL，是目前我国市场上益生菌饮料中最高活菌数的5倍，且在货架期内活菌数一直保持不变，产品见图56。
图56益生菌发酵豆乳饮料—百益多
7.LactobacilluscaseiZhang在益生菌固体饮料、益生菌片剂和益生菌胶囊等健康食品中的应用与产业化
根据LactobacilluscaseiZhang优良的益生特性和贮藏稳定性，北京和美科盛生物技术有限公司推出了含有LactobacilluscaseiZhang的复合益生菌片—益生和美(含L.caseiZhang、B.lactisV9和L.plantarumP-8，总活菌数大于3000亿CFU/100g，其中含L.caseiZhang含量大于1000亿CFU/100g)（图58）。
图58复合益生菌片剂—益生和美
北京中研万通科技中心营养食品公司陆续推出了含有Lacto-bacilluscaseiZhang的复合益生菌冻干粉—给力1号(含LactobacilluscaseiZhang高达1000亿CFU/100g)和复合益生菌胶囊—肠寿(含LactobacilluscaseiZhang高达1000亿CFU/100g)，产品见图59、图60。
北京灵君康美生物科技有限公司陆续推出了含有LactobacilluscaseiZhang的超级益生菌组合—LA片剂(含LactobacilluscaseiZhang高达1000亿CFU/100g)和LA固体饮料(含LactobacilluscaseiZhang高达2500亿CFU/100g)，产品见图61、图62。
8.LactobacilluscaseiZhang研究开发获得的奖励
(1)2009年，―功能性益生乳酸菌高效筛选及应用关键技术‖获国家科技进步二等奖（证书号：2009-J-251-2-10-D04），证书见图63。
(2)2011年，―益生菌LactobacilluscaseiZhang—从基础研究到产业化开发‖获教育部高等学校科技进步二等奖（证书号：2011-249），证书见图64。
(3)2010年，―益生菌LactobacilluscaseiZhang的筛选及基因组学和蛋白质组学的研究‖获内蒙古自治区自然科学一等奖（证书号：2009-Z-001-1-01-D1），证书见图65。
(4)2009年，―益生菌LactobacilluscaseiZhang基因组学和蛋白质组学的研究‖获第六届大北农科技成果奖（国家奖社字第0149号），证书见图65。
图63L.caseiZhang的研究开图64L.caseiZhang的研究开发成果获
发成果获教育部科技进步二等奖成果获国家科技进步二等奖
图65L.caseiZhang的研究开发成果获内蒙古自治区自然科学一等奖和第六届大北农科技成果奖
进入审查阶段发明专利8项（截止到2014年5月）：
(1)发明人：张和平、李妍、高鹏飞、赵文静；申请日：2008年11月6日；发明名称：干酪乳杆菌Zhang高密度培养方法、使用它们制备冻干菌粉的方法与所得到的冻干菌粉及其用途；申请号：200810175856.7；
(2)发明人：张和平、王记成、郭壮；申请日：2008年12月4日；发明名称：干酪乳杆菌Zhang发酵乳及其制备方法；申请号：200810180275.2；
(3)发明人：张和平、董成、崔利敏；申请日：2008年12月16日；发明名称：含有干酪乳杆菌Zhang的干酪及其制备方法；申请号：2008101803197.1；
(4)发明人：张和平、张家超；申请日：2012年12月21日；发明名称：一种LactobacilluscaseiZhang（CGMCC1697）的检测方法；申请号：201210559154.5；
(5)发明人：张和平、王记成；申请日：2012年12月21日；发明名称：一种干酪乳杆菌在改善酒精性肝损伤中应用；申请号：201210528510.7；
(6)发明人：张文羿、张和平；申请日：2013年09月04日；发明名称：一种干酪乳杆菌中谷胱甘肽转硫酚分布规律的快速定性检测方法；申请号：201310395515.1；
(7)发明人：张文羿、张和平；申请日：2013年09月04日；发明名称：一种干酪乳杆菌中肌醇代谢基因簇的快速定性检测方法；申请号：201310396346.3；
(8)发明人：高鹏飞、姚国强；申请日：2014年02月01日；发明名称：一种全燕麦固态混菌发酵生产益生菌活菌粉剂及其制备方法；申请号：201410123174.7。
发表的研究论文（截止到2014年5月）：
1.张和平,那日苏.蒙古族的酸马奶.中国乳品工业,1993,21(4):165-168
2.乌日娜,张和平,孟和毕力格.酸马奶中乳杆菌L.caseiZhang和ZL12-1的16SrDNA基因序列及聚类分析.中国乳品工业,2005,33(6):4-9.
3.张和平,孟和毕力格,王俊国,孙天松,徐杰,王立平,云月英,乌日娜.分离
自内蒙古传统发酵酸马奶中L.caseiZhang潜在益生特性的研究.中国乳品工业,2006,34(4):4-10.
4.JunguoWang,XiaChen,WenjunLiu,MeiYang,Airidengcaicike,HepingZhang.IdentificationofLactobacillusfromKoumissbyConventionalandMolecularMethods.EuropeanFoodResearchandTechnology,2008,227(5):1555-1561.
5.RinaWu,LipingWang,JichengWang,HaipingLi,BiligeMenghe,JunruiWu,MingruoGuo,HepingZhang.IsolationandPreliminaryProbioticSelectionofLactobacillifromKoumissinInnerMongolia.JournalofBasicMicrobiology2009,49(3):318-326.
6.王记成,郭壮,闫丽雅,刘小鸣,陈卫,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang与商业益生菌对胃肠转运耐受性及发酵特性的比较.中国食品学报,2009,9(5):14-21.
7.ZhuangGuo,JichengWang,LiyaYan,WeiChen,XiaomingLiu,HepingZhang.InvitroComparationofProbioticPropertiesofLactobacilluscaseiZhang,aPotentialNewProbiotic,withSelectedProbioticStrains.Lwt-FoodScienceAndTechnology,2009,42(10):1640-1646.
8.刘文俊,乌日娜,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang的多项分类鉴定.中国乳品工业,2009,37(2):14-18.
9.周琦,王记成,郭壮,闫丽雅,张青,刘小鸣,陈卫,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang在马乳中发酵特性及人工胃液耐受性研究.乳业科学与技术,2009,134(1):5-9.
10.JichengWang,ZhiZhong,WenyiZhang,QiuhuaBao,AibinWei,HeMeng,HepingZhang.ComparativeAnalysisoftheGeneExpressionProfileofProbioticLactobacilluscaseiZhangwithandwithoutFermentedMilkasaVehicleduringTransitinaSimulatedGastrointestinalTract.ResearchinMicrobiology,2012,163(5):357-365.
11.云月英,王立平,陈永福,孟和毕力格,张和平.喂饲LactobacilluscaseiZhang对大鼠体内脂质代谢的影响.微生物学通报,2006,33(3):60-64.
12.ZhiZhong,WenyiZhang,RuitingDu,HeMeng,HepingZhang.EffectofLactobacilluscaseiZhangStimulatesLipidMetabolisminHypercholesterolemicRatsbyAffectingGeneExpressionintheLiver.EuropeanJournalofScience
39/45
LipidandTechnology,2012,114(3):244-252.
13.张勇,杜瑞亭,何秋雯,礼贺,张和平.饲喂益生菌LactobacilluscaseiZhang对高脂日粮大鼠肝脏脂质代谢的作用.中国农业科学,2012,45(5):943-950.
14.王俊国,孟和毕力格,张和平,陈永福,包秋华.干酪乳杆菌Zhang对大鼠抗氧化能力的影响.营养学报,2009,31(1):63-65.
15.YongZhang,RuitingDu,LifengWang,HepingZhang.TheAntioxidativeEffectsofProbioticLactobacilluscaseiZhangontheHyperlipidemicRats.EuropeanFoodResearchandTechnology,2010,231(1):151-158.
16.YuzhenWang,YunxuLi,JimingXie,YongZhang,JinlingWang,XiaolinSun,HepingZhang,ProtectiveeffectsofprobioticLactobacilluscaseiZhangagainstendotoxin-andD-galactosamine-inducedliverinjuryinratsviaanti-oxidativeandanti-inflammatorycapacities,InternationalImmunopharmacology,2013,(15)30–37.
17.谢基明,王玉珍,张威,云小乐,巩培,刘竟然,赵世敏,康洪斌,张和平,益生菌L.CaseiZhang对大鼠急性肝损伤的保护作用及其对TLＲ4-EＲK-PPAＲ-γ通路的影响.中国免疫学杂志,2013,29(9)910-913.
18.YongZhang,LifengWang,JiachaoZhang,YunxuLi,QiuwenHe,HeLi,XiaoGuo,JianlinGuo,HepingZhang,ProbioticLactobacilluscaseiZhangameliorateshigh-fructose-inducedimpairedglucosetoleranceinhyperinsulinemiarats,EurJNutr,2014,53(1):221-232.
19.张和平,张七斤,任贵强,包秋华.乳酸杆菌对攻毒小鼠的保护作用和对肠道菌群的影响.微生物学通报,2007,34(3):447-451.
20.刘勇,张勇,包艳,张和平.4株益生菌的表面特性及抑制致病菌作用研究.中国食品学报,2010,10(2):28-34.
21.孙洁宇,高鹏飞,麻士卫,杜瑞亭,王明芳,邓承远,高杰,张和平.益生LactobacillluscaseiZhang对小鼠急性毒性的研究.中国农业科技导报,2009,11(5):77-82.
22.张和平,张七斤,孟和毕力格,任贵强.L.caseiZhang对小鼠T淋巴细胞亚群及血清IgG和肠黏膜SIgA的影响.中国乳品工业,2006,34(10):4-8.
23.托娅,苏雅勒玛,张和平.乳杆菌L.caseiZhang对小鼠血清中细胞因子水平的影响.食品科学,2006,27(11):488-491.
24.托娅,张和平.一株分离自内蒙古传统酸马奶中的乳酸杆菌LactobacilluscaseiZhang对小鼠免疫功能的影响.中外医疗,2008,11:39-42.
25.YaTuo,QijinZhang,FuliangChu,JustinMerritt,MenheBilige,TiansongSun,RuitingDu,HepingZhang.ImmunologicalEvaluationofLactobacilluscaseiZhang:aNewlyIsolatedStrainfromKoumissinInnerMongolia,China.BMCImmunology,2008,19(9):68.
26.杜瑞亭,托娅,张和平.干酪乳杆菌Zhang对小鼠肠道免疫功能的影响.营养学报,2009,31(4):396-400.
27.YuzhenWang,JimingXie,NaWang,YunxuLi,XiaolinSun,YongZhang,HepingZhang,LactobacilluscaseiZhangmodulatecytokineandToll-likereceptorexpressionandbeneficiallyregulatePolyI:C-inducedimmuneresponsesinRAW264.7macrophages.MicrobiologyandImmunology,2013,57(1):54-62.
28.Geriletu,RihuaXu,HonglinJia,MohamadAlaaTerkawi,XuenanXuan,HepingZhang.ImmunogenicityofOrallyAdministratedRecombinantLactobacilluscaseiZhangExpressingCryptosporidiumParvumSurfaceAdhesionProteinP23inMice.CurrentMicrobiology,2011,62(5):1573-1580.
29.益生菌LactobacilluscaseiZhang对巨噬细胞中NO/INOS表达的影响及其机制,张威,谢基明,云小乐,董仕超,王玉珍,张和平.内蒙古农业大学学报.35(2):93-97.
30.温晓庆,托娅,段智变,张和平.L.caseiZhang肽聚糖体内外抗肿瘤作用.山西农业大学学报,2008,28(3):353-361.
31.托娅,杜瑞亭,张和平.益生菌L.caseiZhang对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及机制.肿瘤防治研究,2010,37(4):463-465.
32.托娅,张和平.乳酸杆菌LactobacilluscaseiZhang的抗肿瘤作用及机制.分
子诊断与治疗杂志,2010,2(6):394-399.
33.托娅,张和平.益生菌L.caseiZhang对H22荷瘤小鼠化疗的减毒增效作用.内蒙古医学院学报,2011,33(02):20-24.
34.张家超,郭壮,孙志宏,陈卫,张和平.益生菌对肠道菌群的影响—以LactobacilluscaseiZhang研究为例.中国食品学报,2011,11(9):58-68.
35.454pyrosequencingrevealschangesinthefaecalmicrobiotaofadultsconsumingLactobacilluscaseiZhang,JiachaoZhang,LifengWang,ZhuangGuo,Zhihong
41/45
Sun,QimuGesudu,LaiyuKwok,Menghebilige,HepingZhang.FEMSMicrobiolEcol.2014:1-11.
36.WenyiZhang,DongliangYu,ZhihongSun,XiaChen,QiuhuaBao,HeMen,SongnianHu,HepingZhang.CompleteNucleotideSequenceofPlasmidplca36IsolatedfromLactobacilluscaseiZhang.Plasmid,2008,60(2):131-135.
37.XiaChen,ZhihongSun,HeMeng,HepingZhang.TheAcidToleranceAssociationwithExpressionofH+-ATPaseinLactobacilluscasei.InternationalJournalofDairyTechnology,2009,62(2):272-276.
38.XiaChen,MeiYang,ZhihongSun,WenjunLiu,TiansongSun,HeMeng,HepingZhang.MolecularCloningandCharacterizationofAlphaSubunitofH+-ATPaseinLactobacilluscaseiZhang.CzechJournalofFoodSciences,2009,27(1):49-54.
39.RinaWu,WeiweiWang,DongliangYu,WenyiZhang,YanLi,ZhihongSun,JunruiWu,HeMeng,HepingZhang.ProteomicAnalysisofLactobacilluscaseiZhang,ANewProbioticBacteriumIsolatedfromTraditionallyHome-madeKoumissinInnerMongoliaofChina.MolecularandCellularProteomics,2009,10:2321-2338.
40.WenyiZhang,RinaWu,ZhihongSun,TiansongSun,Hemeng,HepingZhang.MolecularCloningandCharacterizationofBileSaltHydrolaseinLactobacilluscaseiZhang.AnnalsofMicrobiology,2009,59(4):721-726.
41.WenyiZhang,DongliangYu,ZhihongSun,CaicikeArirideng,SongnianHu,HeMeng,HepingZhang.PreliminaryAnalysisofGlutathioneS-transferaseHomologyfromLactobacilluscaseiZhang.AnnalsofMicrobiology,2009,59(4):727-731.
42.WenyiZhang,DongliangYu,ZhihongSun,RinaWu,XiaChen,WeiChen,HeMeng,SongnianHu.andHepingZhang.CompleteGenomeSequenceofLactobacilluscaseiZhang,aNewProbioticStrainIsolatedfromTraditionalHome-madeKoumissinInnerMongoliaofChina.JournalofBacteriology,2010,192(19):5268-5269.
43.WenyiZhang,ZhihongSun,TingSun,HepingZhang.PCRScreeningandSequenceAnalysisofIolClustersinLactobacilluscaseiStrainsIsolatedfromKoumiss.FoliaMicrobiol,2010,55(6):603–606.
44.Rina
Wu,ZhihongSun,JunruiWu,HeMeng,HepingZhang.EffectofBileSalts
42/45
StressonProteinSynthesisofLactobacilluscaseiZhangRevealedbyTwo-Di-mensionalGelElectrophoresis.JournalofDairyScience,2010,93(8):3858-3868.
45.WenyiZhang,DongliangYu,ZhihongSun,WeiChen,SongnianHu,HeMeng,HepingZhang.TheComparativeAnalysisofaProphageRemnantLcazh1inRelationtootherLactobacillusProphages,ParticularlyLp3.InternationalJournalofDairyTechnology,2010,63(3):413-417.
46.WenyiZhang,ZhihongSun,DongliangYu,CaicikeAirideng,WeiChen,HeMeng,HepingZhang.ComparativeNnalysisofIolClustersinLactobacilluscaseiStrains.WorldJournalofMicrobiologyandBiotechnology,2010,26(11):1949-1955.
47.RinaWu,WenyiZhang,TiansongSun,JunruiWu,XiqingYue,HeMeng,HepingZhang.ProteomicAnalysisofResponsesofaNewProbioticBacteriumLactobacilluscaseiZhangtoLowAcidStress.InternationalJournalofFoodMicrobiology,2011,147(3):181-187.
48.乌日娜,岳喜庆,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang在酸胁迫下的蛋白质组学研究.食品与发酵工业,2012,38(7):17-20.
49.乌日娜,岳喜庆,刘文俊,陈永福,钟智,张和平.蛋白质组学在乳酸菌应激反应机制研究中的应用.食品科学,2013,34(1):324-327.
50.益生菌LactobacilluscaseiZhang在常规培养条件下连续传代1000代过程中稳定性研究.张文羿,白梅,张和平.中国乳品工业,2013,41(11):16-18.
51.李妍,高鹏飞,赵文静,麻士卫,周琦,潘向辉,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang高密度发酵中试工艺及动力学研究.中国农业科技导报,2008,10(5):65-71.
52.高鹏飞,李妍,赵文静,陈霞,崔景丽,张磊,张和平.益生菌L.caseizhang增殖培养基的优化.微生物学通报,2008,35(4):623-628.
53.崔景丽,张磊,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang固态发酵条件的优化.工业微生物,2009,39(1):1-4.
54.张磊,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang固态发酵培养基及发酵条件的优选.农产品加工,2009,2:68-71.
55.乌日娜,张和平,孟和,包秋华,陈霞,武俊瑞.干酪乳杆菌蛋白质双向电泳条件优化及图谱建立.食品与生物技术,2009,28(5):598-602.
56.李妍,赵文静,高鹏飞,张和平,陈永福.优化益生菌LactobacilluscaseiZhang高密度培养条件.微生物学通报,2009,36(2):181-186.
57.HaipingLi,MeijunLu,HongfangGuo,WeiLi,HepingZhang.ProtectiveEffectofSucroseontheMembranePropertiesofLactobacilluscaseiZhangSubjectedtoFreeze-Drying.JournalofFoodProtection,2010,93(3):884-892.
58.WenjingZhao,YanLi,PengfeiGao,ZhihongSun,TiansongSun,HepingZhang.
ValidationofReferenceGenesforReal-timeQuantitativePCRStudiesinGeneExpressionLevelsofLactobacilluscaseiZhang.JournalofIndustrialMicrobiology&Biotechnology,2011,38(9):1279-1286.
59.李晶,王鑫,高鹏飞,姚国强,赵洁,王晓伟,赵晓燕,孟和毕力格,张和平.益生菌在酸奶生产过程中对酵母和霉菌污染的控制,中国乳品工
业,2013,41(9):21-24.
60.JichengWang,RinaWu,WenyiZhang,ZhihongSun,WenjingZhaoandHepingZhang,ProteomiccomparisonoftheprobioticbacteriumLactobacilluscaseiZhangcultivatedinmilkandsoymilk,J.DairySci,2013,96(9):5603–5624.
61.张和平.益生乳酸菌LactobacilluscaseiZhang从基础研究到产业化开发.中国乳品工业,2005,39(10):32-36.
62.徐杰,云月英,张文羿,邵亚东,孟和毕力格,张和平.酸马奶中干酪乳杆菌发酵特性的研究.中国乳品工业,2006,34(7):23-27.
63.麻士卫,高鹏飞,王秋实,阎建军,邓承远,赵虎云.益生菌咀嚼片硬度与益生菌细胞存活率的关系.食品与发酵工业,2009,35(6):50-53.
64.董成,张和平,赵树平,包秋华.利用LactobacilluscaseiZhang开发益生菌新鲜干酪.食品与发酵工业,2008,34(1):140-146.
65.程涛,王记成,张和平.益生菌L.caseiZhang在酸乳酪中的发酵特性.中国乳品工业,2008,36(7):4-8.
66.闫丽雅,郭壮,王记成,张和平.益生菌L.caseiZhang在酸乳中发酵特性研究.乳业科学与技术,2008,4:151-156.
67.程涛,郭壮,王记成,闫丽雅,周琦,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang发酵特性的评价.中国乳品工业,2009,37(6):4-7.
68.郭壮,王记成,闫丽雅,张轩,刘小鸣,陈卫,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang对酸奶风味、质地及感官特性的影响.中国乳品工业,2009,37(11):14-20.
69.QiZhou,JichengWang,ZhuangGuo,LiyaYan,QingZhang,WeiChen,Xiao
44/45
mingLiu,HepingZhang.FermentationCharacteristicsandTransitToleranceofProbioticLactobacilluscaseiZhanginMareMilkduringStorage.InternationalJournalofDairyTechnology,2009,62(2):249-254.
70.JichengWang,ZhuangGuo,QingZhang,LiyaYan,WeiChen,XiaomingLiu,HepingZhang.FermentationCharacteristicsandTransitToleranceofProbioticLactobacilluscaseiZhanginSoymilkandBovineMilkduringStorage.JournalofDairyScience,2009,92(6):2468-2476.
71.JichengWang,ZhuangGuo,QingZhang,LiyaYan,YongfuChen,XiaChen,XiaomingLiu,WeiChen,HepingZhang.EffectofProbioticLactobacilluscaseiZhangonFermentationCharacteristicsofYogurt.InternationalJournalofDairyTechnology,2010,63(1):105-112.
72.其木格苏都，郭壮，王记成，孟和毕力格,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang对凝固型酸奶质构和挥发性风味物质的影响,中国农业科学,2013,46(3):-595-605.
73.王记成，郭壮，其木格苏都,张和平,孟和毕力格.益生菌LactobacilluscaseiZhang对凝固型发酵乳感官品质的影响,中国农业科学,2013,46(3):-575-585.
74.HaiKuanWang,ChengDong,YongFuChen,LiMinCuiandHePingZhang.ANewProbioticCheddarCheesewithHighACE-InhibitoryActivityand-AminobutyricAcidContentProducedwithKoumiss-DerivedLactobacilluscaseiZhang.FoodTechnologyandBiotechnology,2010,48(1):62–70.
75.张青,王记成,魏爱彬,闫丽雅,周琦,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang和BifidobacteriumanimalisV9在豆乳中生长及活性豆乳饮料中存活性研究.乳业科学与技术,2010,33(1):1-5.
76.其木格苏都,王记成,张家超,张和平.荧光定量PCR法检测益生菌饮料中LactobacilluscaseiZhang和BifidobacteriumlactisV9.中国乳品工业,2011,39(12):31-33.
77.张青,张和平.益生菌LactobacilluscaseiZhang和BifidobacteriumanimalisV
V9在豆乳中生长及活性豆乳饮料中存活性研究.河套大学学报,2011,8(4):67-75.
78.JichengWang,WenyiZhang,ZhiZhong,AibinWei,QiuhuaBao,YongZhang,TiansongSun,AndrewPostnikoff,HeMeng,HepingZhang.GeneExpressionProfileofProbioticLactobacilluscaseiZhangduringtheLateStageofMilk