常用染色液的配制

⒈碘-碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂。

配方:碘化钾2g;蒸馏水300ml;碘1g

先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。

⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。

配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉;95%酒精10ml;过滤后再加入10ml甘油

(2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。

(3)苏丹III70%乙醇的饱和溶液。

⒊1%醋酸洋红(acetocarmine)酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。

配方:洋红1g;45%醋酸100ml

煮沸2h左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用。

⒋改良苯芬品红染色液(Carbolfuchsine)核染色剂。

配制步骤:先配成三种原液,再配成染色液。

原液A:3g碱性品红溶于100ml70%酒精中。

原液B:取原液A10ml加入到90ml5%石炭酸水溶液中。

原液C:取原液B55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。

(原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用)

染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差)。

适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2~3年不变质。山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差。

⒌中性红(neutralred)溶液用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。

配方:中性红;蒸馏水100ml

使用时再稀释10倍左右。

⒍曙红Y(伊红,eosinY)酒精溶液常与苏木精对染,能使细胞质染成浅红色,起衬染

作用。

配方:曙红;95%酒清100ml

也常用于95%酒精脱水时,加入少量曙红溶液,其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。

⒎钌红(rutheniumred)染液钌红是细胞胞间层专性染料,其配后不易保存,应现用现配。配方:钌红5~10mg;蒸馏水25-50ml

⒏龙胆紫(gentianviolet)为酸性染料,适用于细菌涂抹制片。

配方:龙胆紫0.2~1g;蒸馏水100ml

⒐苯胺兰(anilineblue)溶液为酸性染料,对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等,尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色,对于高等植物多用于与番红作双重染色。

配方:苯胺兰1g;35%或95%酒精100ml

⒑间苯三酚(phloroglucin)溶液用于测定木质素。

配方:间苯三酚5g;95%酒精100ml

注:此溶液呈黄褐色即失效。

⒒橘红G(orangeG)酒精溶液为酸性染料,染细胞质,常作二重或三重染色用。

配方:橘红G1g;95%酒精100ml

⒓番红(safraninO)为碱性染料,适用于染木化、角化、栓化的细胞壁,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色,与橘红G、结晶紫作三重染色。

配方:(1)番红水溶液番红0.1或1g;蒸馏水100ml

(2)番红酒精溶液番红0.5或1g;50%(或95%)酒精100ml

(3)苯胺番红酒精染色液

甲液番红5g+95%酒精50ml

乙液苯胺油20ml+蒸馏水450ml

将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀,过滤后使用。

配方:(1)固绿酒精液固绿0.1g;95%酒精100ml

(2)苯胺固绿酒精液固绿1g;无水酒精100ml;苯胺油4ml

配后充分摇匀,过滤后使用。现配现用效果好。

⒕苏木精(hematoxylin)染液苏木精是植物组织制片中应用最广的染料,是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料,而且可以分化出不同颜色。配方很多,现举海登汉氏(Heidenhain's)苏木精染色液,又称铁矾苏木精染色液。

配方:甲液(媒染剂):硫酸铁铵(铁明矾)2-4g;蒸馏水100ml

(必须保持新鲜,最好临用之前配制)

乙液(染色剂):苏木精0.5-1g;95%酒精10ml;蒸馏水90ml

配制步骤:(1)将苏木精溶于酒精中,瓶口用双层纱布包扎,使其充分氧化(通常在室内放置两个月后方可使用)。(2)加入蒸馏水,塞紧瓶口,置冰箱中可长期保存。

切片需先经甲液媒染,并充分水洗后才能以乙液染色,染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。

铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂,但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。

⒖亚甲基蓝染液常用于细菌、活体细胞等的染色。

取亚甲基蓝,溶于100ml蒸馏水中即成。

⒗詹纳斯绿B(JanusgreenB)染液

将绿溶于100ml蒸馏水,配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。⒘硫堇染液

取克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。使用此液时,需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能成多色反应。

18.黑色素液

水溶性黑素10g,蒸馏水100mL,甲醛(福尔马林)。可用作荚膜的背景染色。

19.墨汁染色液国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。用作荚膜的背景染色。20.吕氏(Loeffier)美蓝染色液

A液:美蓝(methyleneblue,又名甲烯蓝),95%乙醇30mL;

B液:。

混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液,按1∶10或1∶100稀释均可。

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