你到底长啥样?——BV2上海富衡细胞贴壁

1990年,《JournalofNeuroimmunolo-gy》报道了一株通过用携带逆转录病毒(J2)的av-raf/v-myc癌基因感染原代小鼠小胶质细胞,从而获得的小鼠细胞系——BV-2[1]。

01

形态特征:

该细胞系具备了原代培养的小胶质细胞的形态学特点,为多形性细胞,存在圆形和梭形两种形态。

悬浮形态多为圆形,贴壁形态则既有圆形又有梭形,部分细胞会有短触角或凸起伸出。

02

生长特性:

半悬浮半贴壁

03

蛋白表达特性:

免疫组化结果显示BV2为MAC1、MAC2阳性,而MAC3、胶质细胞原纤维酸性蛋白、半乳糖脑苷脂为阴性。

04

BV2与ECO2细胞系对比:

它们都是小鼠小胶质细胞系,但彼此之间存在明显差异。主要区别在于BV2通过基因操纵使细胞永生化,而ECO2则是自发永生化的。此外,ECO2具有与BV2相同的一般特征,但需要添加集落刺激因子-1(CSF-1)才能培养。

如何正确培养BV-2

到底要怎么培养这个细胞呢?

1

BV2细胞是半贴壁半悬浮细胞,细胞出现大量悬浮或者完全呈贴壁状态时,都要引起重视,及时调整培养条件。

2

对培养条件较敏感,当培养基出现偏酸或者偏碱的情况时,细胞会出现大量脱落,悬浮生长。

应对措施:一般培养基中添加了酚红作为PH指示剂,要经常观察培养基颜色,判断培养基PH是否合适。

3

BV2细胞传代密度偏低时,易出现细胞触角变多、变长的情况。

应对措施:触角变多、变长的细胞贴壁会更牢,更不容易被胰酶消化下来,可以通过短时消化的方式,筛选掉这部分细胞,仅收集正常状态的BV-2进行培养。

具体操作:

(1)先轻轻吹打下部分贴壁不牢的细胞,和悬浮细胞一起收集下来。

(2)再用胰酶进行短时消化(1min),收集下脱落的细胞。

(3)将前面收集的细胞悬液进行离心收集(800~1000rpm,离心5min),再转移入新培养瓶中继续培养。

THE END
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