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2023.12.18云南
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文末有彩蛋，坚持到最后哈~
surprise
血清为细胞提供的成分包括：
1.基本营养物质；
2.激素；
3.生长因子；
4.结合蛋白、血清蛋白等；
5.促接触和伸展因子；
6.蛋白酶抑制剂；
7.微量元素和离子。
常用血清分类
以上三种血清中胎牛血清的品质最高，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少，因此价格也最高。
血清使用注意事项
01血清的使用与选择
血清的使用浓度一般在5%~20%，最常用是10%。有些细胞需要胎牛血清才能生长，而有些细胞有小牛血清就能生长。因此，要根据具体用途与需要选择合适的血清。
02血清的储存与解冻
1.储存：建议将血清储存在-15℃~-20℃。注意：建议不要将血清储存在-80℃中！（因为储存在-80℃，解冻时巨大的温差会使血清产生更多的沉淀。）
2.解冻：不建议于4℃过夜解冻，也不建议直接将冷冻的血清放在37℃水浴或者温箱中解冻，因为若血清没有混匀，底部的蛋白会变性形成沉淀。
血清解冻的方法（三步法）
注意：在水浴过程中，血清要完全浸入水中，同时在融化过程中要慢慢摇动瓶身混匀血清，但在摇动中尽量不要产生泡沫。血清在解冻后，可以根据实验需求分装成单次用量，密封好后立即放回-20℃冰箱继续储存以供进一步使用，这样可以有效避免反复冻融的问题。
血清使用常见疑问解答
1
血清中出现沉淀或絮状物的原因？
·
····
●解冻过程中未混匀；
●γ-辐照：不会损害血清的理化特性或细胞培养性能；
●反复冻融：使血清脂蛋白发生变性造成浑浊；
●血清中残留的纤维蛋白原：残留的纤维蛋白原在解冻后会转化为纤维蛋白，过量的纤维蛋白在血清中表现为可见的絮状物质。
2
如何去除血清中的沉淀或絮状物？
···
使用400g离心，不建议直接过滤血清以去除絮状物质，因为过滤器可能会堵塞或者截留重要的蛋白质。
3
如何检测血清是否被污染？
将1mL待测血清直接倒在细菌琼脂平板上，在37℃培养之后观察菌落的生长情况。在油镜（放大1000倍）下观察革兰氏染色，以确定是否受到污染。不建议用37℃孵育的血清直接检测无菌性，因为在37℃孵育之后，血清中的磷酸钙沉淀物会增加。
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