1、猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒使用说明书【简介】试剂盒由抗原包被的微孔板,酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成,应用间接ELISA原理检测猪血清中抗猪瘟病毒抗体。【用途】猪瘟ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体。评估猪场猪瘟疫苗免疫状况,感染猪的血清学诊断。【原理】本试剂盒是采用猪瘟抗原包被微孔板,在试验中,加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有抗猪瘟病毒的特异性抗体,则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液
2、终止反应后,用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。【试剂盒主要成分】1包被抗原的微孔板2块(96孔/块)2阴、阳性对照血清各1管(0.5ml/管)3羊抗猪酶标二抗1瓶(20ml/瓶)420倍浓缩洗涤液1瓶(30ml/瓶)5底物A液、B液各1瓶(10ml/瓶)6终止液1瓶(10ml/瓶)7样品稀释液1瓶(50ml/瓶)8血清稀释板2块(96孔/块)9说明书1张【样品制备】取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。【洗涤液配制】使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温(25C左右),并摇动使沉淀的盐溶解(最好在37C水中加热5-10min),然后用蒸熠水或去离子水
3、作20倍稀释(例如:每板用20ml浓缩液加上380ml水),稀释好的洗涤液在4C可以存放7天。【样品稀释】在血清稀释板中按1:40的体积稀释待检血清(195卬l样品稀释液中加511l待检血清)o注意:阳性对照和阴性对照1:40稀释,(234卬l样品稀释液中加6卬l对照血清)。【注意事项】1试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,使用后放回2-8C。2不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。3不要用口移液。4TMB(底物液B)不要暴露于强光,避免接触氧化剂。5检测板拆封后避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,应尽快置于4C)。6待检血