标本采集和运送是细菌和真菌培养成功的最最重要的关键！但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人自己完成,所以也是最不容易做好的事情，而且不知道问题所在之处，由此引发的最主要后果是阳性率下降，这也是临床医生最不能接受的问题.因此,临床微生物检验标本采集应规范化,有助于临床合理使用抗菌药物.
表1血和脊髓
标本类型
采集
重复采样限制
说明
原则
装置和
最小量
转运
储存
血培养
培养瓶的消毒：弃去瓶顶塑料帽,用75%乙醇棉球消毒瓶顶橡皮塞,待干60秒。
静脉穿刺消毒：严格按照皮肤消毒步骤操作（建议使用洗必泰）。
血液培养必须特别注意消毒，避免皮肤表层细菌造成污染。
采得的血首先应打入需氧瓶，然后再打入厌氧培养瓶，有利于更好地分离出真菌、绿脓杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌。
成人：8~10ml/瓶.
新生儿：1～3ml/瓶.
常规血培养应该包括至少一个需氧培养瓶和一个厌氧培养瓶（称“1套”）。
一些数据显示，另加一个厌氧瓶比仅仅是用需氧瓶的效果好.
≤2h，常温，禁止冰箱保存。
≤24h，常温，，禁止冰箱保存。
3套/24h
急性脓毒病：10min内从不同的部位采集2-3套。
急性心内膜炎：1-2h从3个分离部位采3套。
亚急性心内膜炎：从不同部位采3套，间隔15min，如24h内为阴性，要再采3套。
原因不明发热：从不同部位采2-3套，间隔≥1h，如24h内为阴性，须再采3套。
主要病原菌：
沙门菌、布氏杆菌、其他革兰阴性杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌。
以下菌应视为非病原菌（除非大于1次血培养分离出）：
芽孢杆菌属、凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、棒状革兰阳性杆菌
脊髓
注意无菌操作
接种血培养瓶≥1ml
≤24h，常温，禁止冰箱保存。
1/d
少量脊髓可直接接种培养基
培养瓶种类：未用过抗菌药物的需氧培养瓶（兰色）；
未用过抗菌药物的厌氧培养瓶（紫色）；
用过抗菌药物的需氧培养瓶（绿色）；
用过抗菌药物的厌氧培养瓶（棕色）；
儿童需氧培养瓶（黄色）
表2脑脊液
CSF
1.用2%碘酒消毒采集部位。
2.用专用的针头插入
3.进入蛛网膜下腔后，采集液体，放入无菌试管中。
无菌试管，
细菌≥1ml，
真菌≥2ml，
抗酸杆菌≥2ml
细菌：不要冷冻；
≤15min,常温
≤24h
常温
无
应同时做涂片直接镜检和培养。
培养时可打入血培养瓶中。
标本≥1ml时需要离心。1500g/15min
B群β溶血链球菌（新生儿），流感嗜血杆菌（2月-2岁儿童），肺炎链球菌，脑膜炎奈瑟氏菌、新生隐球菌、结核分枝杆菌。
表3鼻咽喉标本
标本
类型
鼻
用预先被无菌盐水湿润的拭子插入鼻孔约2cm，对着鼻粘膜用力旋转，蘸取粘膜上分泌物，缓慢抽出，将拭子直接送检。
拭子转运
≤2h,常温
≤24h,
喉
用压舌板压舌，用无菌拭子从咽后、扁桃体和发炎区域采样，不要碰触舌头和面颊。
喉拭子培养不能用于会厌发炎的患者。
主要病原菌：A群β溶血链球菌
可选择性报告：溶血隐秘杆菌
表4尿
女性，
中段
1.用肥皂水完全清洗尿道区域
2.用湿纱布垫漂洗
3.分开阴唇，开始排尿
4.采集中段尿
无菌广口容器≥3ml。
4℃
女性尿中的衣原体抗原可能难以检出。
若培养2种以上细菌生长，报告“混合菌群”，可疑污染。
男
性
，
1.用肥皂和水完全清洗阴茎头
3.回缩包皮，开始排尿
4.采集中段。
直接
导
管
1.用肥皂和水完全清洗尿道区域
3将导管无菌插入膀胱
4.流过15ml尿之后，采集尿入无菌容器内
无菌防漏容器≥3ml。
该方法可能导致尿道菌落进入膀胱并增加医源性感染的危险
滞留
1.用70%乙醇消毒导管采集部分
2.用针头和注射器无菌采集5-10ml尿
3.转入无菌管或容器内
滞留导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。
大肠埃希菌、变形杆菌、克雷伯菌、其它革兰阴性杆菌
肠球菌、腐生葡萄球菌、纯的金黄色葡萄球菌
表5下呼吸道标本
下支气管肺泡灌洗吸出液、支气管冲洗液或刷子刷出物、气管抽吸物，肺穿刺或活组织
将抽吸物或洗出物放入痰采集器内，将刷出物放入有盐水的无菌容器内。
无菌容器>1ml
定量分析管40-80ml液体量，做刷出物的定量分析，可将刷出物放入0.5ml的胰蛋白酶大豆肉汤中
痰，咳出
在医生或护士的直接指导下采集标本，让患者清洗咽喉或漱口，患者深咳肺部痰，不要唾液。
无菌容器
细菌：
>1ml
真菌：3-5ml
分支杆菌：5-10ml
合格的标本应在低倍视野下≤10个鳞状细胞。
若标本中含有食物拒收。
肺炎链球菌在2小时内死亡。
冷藏保存不会检出肺炎链球菌。
痰，诱导性
主要致病菌：肺炎链球菌、克雷伯菌属、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌
非病原菌：酵母菌、草绿色链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌
表6粪便
常规
培养
直接置入一清洁、广口的无菌容器
无菌容器≥2g或者≥1.5ml
≤1h,常温
梭状芽
孢杆菌
将液体或软大便直接送入清洁、广口无菌容器内。
无菌容器：≥2g或者≥1.5ml
1-2h,4℃
＞24h,-20℃
培养：
2d，4℃，
3d，4℃或-70℃更长用于毒素检测
1/2d
患者应该是每24h排泻液体或软大便≥5次的患者。
-20℃冷冻易于使细胞毒素快速丢失。
E．coli
O157:H
将液体或血便放入一清洁、干燥的容器
无菌容器≥2g或〉2ml
≤24h,4℃
有腹部痉挛的患者在发病6小时内采集到的血或液状便效果更好
直肠拭子
1.小心插入无菌拭子超越肛门括约肌约2-4cm
2.轻轻旋转拭子，在肛门隐窝取样
3.用于检测病原的拭子上应能看到粪便
≤24h,常温
对淋球菌、志贺氏菌、弯曲菌及肛门携带的B群链球菌的检测，或不能留样的患者，是保留的方法。
婴儿和有腹泻症状的患者推荐用拭子做常规病原菌检测。
沙门菌、志贺菌、弯曲杆菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌
产毒性大肠杆菌或难辨梭菌（在常规的试验室可能不开展）
表7眼部标本
结膜
分别用（无菌盐水预湿）拭子绕每一个结膜滚动采集标本。
即使只有一个眼睛感染，如可能，对每一结膜都要取样；可使用未感染眼作为对照，和分离的感染眼的细菌进行比较；如费用限制，可根据革兰氏染色的结果，帮助对培养物进行解释，以确定固有菌群
角膜
刮擦
在麻醉下，用刮勺在溃疡或者创伤边缘刮取碎屑，直接接种在培养基平板上培养和涂片。
直接培养接种血平板和巧克力平板。
≤15min，常温
24h,常温
建议：培养用拭子采样要先于麻醉药的应用，而角膜刮擦可稍后进行。
眼部感染所获取的标本量很少，建议取样后直接接种在平板上培养和涂片。
液体或
抽取液
用针头抽吸液体。
或直接将少量液体接种于培养基
也可进行真菌培养。
因为麻醉药对于一些病原体有抑制作用，所以要在用麻醉药之前采样。
表8耳部标本
内耳
对复杂的，反复的或慢性顽固的中耳炎做鼓室穿刺术：
接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液体；
对破裂的鼓室，借助耳科诊视器，用软杆拭子收集液体。
无菌容器或拭子转运培养或厌氧培养基
≤2h，常温
≤24h，常温
喉或鼻咽部的拭子培养结果不足以诊断中耳炎的致病因子，不应该递送
外耳
用湿拭子将耳道的碎屑或痂皮拭去，
在外耳道用力旋转拭子取样
≤24h，4℃
1/d/
患有外耳炎患者，需要深部耳拭子，因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂窝织炎；
对于外耳道应用力取样，表面取样可能采不到蜂窝组织炎链球菌
表9脓肿
开放性
用无菌盐水拭去表面渗出物，
用拭子深入溃疡基底部或边缘部采集。
拭子送检系统
组织或液体拭子优于拭子标本，如必须用拭子，采集2个，分别做培养和革兰氏染色
封闭性
用注射器抽吸，将所有标本转入厌氧转运装置
厌氧送检系统≥1ml
从脓肿底部或脓肿壁的取样，结果更好
取样时，可能会带入与感染过程无关的定植细菌
液体：
腹部的、羊膜的、腹水的、关节穿刺液、心包的、腹膜的、滑膜的、胸膜的、胸腔穿刺液
1.用2%碘酒充分消毒皮肤
2.经皮穿刺抽吸或外科获取标本
3.立即转运至实验室
4.尽量多呈送液体：不要将拭子浸入液体内转运
用于细菌和酵母菌的血培养瓶或无菌容器或厌氧转运系统。
细菌≥1ml
真菌≥10ml
分枝杆菌≥10ml
≤1h，常温
≤24h,常温；
心包液或用于真菌培养的液体，≤24h,4℃
羊水和后穹隆穿刺液应用厌氧系统送检，革兰染色前不需离心。其他液体检测最好用细胞离心制备物做革兰氏染色。
体液（特别是关节液）如果清亮且无脓，床旁直接注入血培养瓶。
关节液中的吞噬细胞很活跃，可在几小时内杀死细菌。
主要病原菌：金黄色葡萄球菌、化脓链球菌、其它β溶血链球菌、铜绿假单胞菌、其它革兰阴性杆菌、
非病原菌：凝固酶阴性葡萄球菌、少量的棒状革兰阳性杆菌
表10男女生殖器标本
羊膜
1.经羊膜穿刺、剖宫产、子宫内导管抽吸
2.将液体转入厌氧转运系统
厌氧转运系统，≥1ml
不能接受用拭子采集或经阴道抽吸的羊膜标本，因为有潜在的阴道共生菌的污染
前列腺
1.用碘制剂消毒皮肤
2.用导管抽吸液体
宫颈
1.用涂有润滑剂的扩阴器使宫颈可见
2.用拭子从宫颈上拭去粘液和分泌物，丢掉拭子
3.用新的无菌拭子紧贴宫颈内壁轻轻采样
拭子转运系统
可在渗出液中发现淋球菌，而衣原体可感染特定的细胞。
后穹隆
抽吸液
厌氧培养，〉1ml
子宫内膜
1.通过导管经宫颈采样
2.将标本全部转入厌氧转运系统
妊娠产物
1.将组织的一部分送入无菌容器
2.如果从剖宫产获得，立即转入厌氧转运系统
无菌容或厌氧转运系统
不要处理恶露，该标本的培养不一定提供临床上有意义的结果，而且该结果可能会有误导作用。
女性尿道
患者排尿1h后采集
1.拭去尿道口的分泌物
2.用拭子通过阴道，靠耻骨联合，按摩尿道，采集尿液
如未获得尿液，用肥皂洗外尿道，并用水冲洗，用泌尿生殖道拭子插入尿道2-4cm,旋转拭子2s
阴道
1.清除过多的分泌物和排出液
2.用无菌拭子或吸管从阴道穹隆部粘膜处获取分泌物
3.如果需要涂片，再用一个拭子
女性或男
性的损伤
1用无菌盐水清洗损伤部位，用解剖刀刃切去损伤表面
2.使渗出物聚集
3.按压损伤底部，用无菌拭子用力采集渗出物
用暗视野显微镜检查来辨认梅毒螺旋体，用载玻片接取渗出液，加盖玻片，放在保湿的装置里（每个平皿用一个湿纱布）立即转运到实验室。检测梅毒的标本不交送培养
男性前列腺
1.用肥皂和水清洗阴茎头
2.通过直肠按摩前列腺
3.用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内
拭子转运或无菌管
男性尿道
用泌尿道生殖拭子插入尿道腔2-4cm，旋转拭子，至少停留20s，而使之容易吸收
淋病奈瑟菌、滴虫、酵母菌或女性的细菌性阴道病综合征、孕妇携带的B群β溶血链球菌
表11真菌
皮肤
真菌
用75%乙醇清洗患处、在损伤的边缘轻轻挂擦皮肤表面。不要出血。将样本置于清洁容器内或两个清洁玻片之间。
清洁容器，刮擦的量足以覆盖图钉头部
1/d部位
如标本处于两玻片之间被呈送，应将两玻片粘牢，并置于信封内
组织
用无菌容器呈送
小样本应滴加几滴无菌生理盐水保持湿润
不能使组织干涸
厌氧转运系统或无菌旋帽瓶，需要加一些盐水
≤15min,
呈送组织的量尽可能多。
不要呈送在表面简单摩擦拭子
头发，皮肤真菌病
1.用镊子采集至少10-12根具有完整并部感染头发
2.放入清洁的管内或容器内
清洁容器10根头发
在刮擦损伤的同时，如有头皮屑，应采集。注意近期所采取的人和抗真菌治疗
指甲，皮肤真菌病
1.用75%乙醇的纱布（非棉花）擦指甲
2.剪去感染的部分，从指甲下收集材料或碎片
3.将材料放入清洁容器内
清洁容器刮擦的足量以覆盖图钉头
表12医院感染监控标本
采集原则
物体表面
1.用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，要求采样面积≥100cm2,连续采样4个。
2.用含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子一支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各五次，并随之转棉拭子。
3.剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。
4.门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
医疗器械
1.将存放在有效期内的医疗器械直接送微生物科室。
空气（平板暴露法）
2.布点方法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距离墙壁1m处；室内面积>30m2，，设4角及中央5点，4角的布点部位距离墙壁1m处。
3.采样方法：将普通营养琼脂平板（直径为9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距离地面1.5m。采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。
医务人员手
1.被检人洗手消毒后（切勿擦干），五指并拢。
2.将棉拭子浸泡在含相应中和剂的无菌洗脱液中。
3.用棉拭子从双手屈指面从指根到指端往返涂擦两次（一只手涂擦面积约30cm2，），并随之转动采样棉拭子。
4.剪去操作者手接触的部位，将棉拭子投入10ml的含相应中和剂的无菌洗脱液的试管中，立即送检。
5.将采样管在混匀器上震荡20s或者用力振打80次。
6.用无菌吸管吸取1ml带检样品接种于灭菌平皿。
7.每一个样本接种在2个平皿，再加入已溶化的45~48摄氏度的营养琼脂15~18ml，边倾倒边摇匀，待琼脂凝固。