近年来，随着多款全球年销售额逾百亿美元的重磅抗体药物产品的出现，更多新型抗体药物如双特异性抗体、抗体偶联药物（ADC）、纳米抗体等如雨后春笋般不断涌现，引发了国内外新的研发热潮。
在抗体药物的早期发现阶段，进行体外筛选和功能性检测是非常关键的—步，这直接决定了抗体药候选分子的命运。义翘神州建立了抗体药体外活性检测平台，可向全球客户提供综合性的体外药效评价解决方案，全方位地支持您的抗体药研发项目，并帮助您更快速地完成体外药效试验以及获得优质药效的先导分子。义翘神州拥有丰富的试剂产品和全面的体外药效评价服务，全面支持客户的不同检测需求。
与特定靶点结合后，抗体药物通过细胞因子信号的激活或阻断、补体系统的活化及细胞杀伤等生物学作用发挥其治疗效果。抗体药物的活性测定是对药物的有效性和药物效价的测定，是抗体药物评价体系中必不可少的部分，是探索药物作用机制（MOA），提供药物IND申报依据的重要手段。
目前，针对抗体药物的体外活性分析方法，主要分为两类：抗原结合能力测定：ELISA法、流式细胞仪法、表面等离子共振效价测定法（Surfaceplasmonresonance,SPR）、生物膜干涉技术（Bio-LayerInterferometry,BLI）等。生物学活性测定：ADCC/ADCP/CDC检测试验、细胞增殖抑制试验、细胞杀伤活性验证、中和活性验证、细胞凋亡检测试验、细胞因子释放试验、抗体内化等。
服务特点
服务内容
客户需提供无菌样品，尽量低温保存运输；如无阳性对照，请提前告知；
常规使用兔补体，有特殊需求使用其他补体，需客户提供。
细胞复苏与扩增
抗体检测
数据分析
检测报告
剩余样品
抗体依赖增强效应（antibody-dependentenhancement，ADE）主要是指由病原体感染引起的机体作用。在病原体感染过程中，原有的中和抗体不仅不能阻止病毒侵入人体细胞，反而可以与Fc受体或补体相互作用，侵入巨噬细胞，粒细胞等，增强病毒在体内的复制，引起严重的病理反应。
应用报告基因法检测抗体的ADE效应，结果显示实验组没有ADE效应，阳性对照有ADE效应。
比较荧光信号可反映抗体内吞的差异，由于抗体与抗原结合后不一定会被靶细胞内吞，所以了解抗体内化能力，比较不同抗体的摄取情况，是ADC药物早期筛选和优化的关键指标。义翘神州提供专业高效的抗体内化检测服务，帮助客户准确地筛选ADC候选药物。
细胞种类丰富，细胞库有近300株细胞（肿瘤细胞系+改造细胞系）可供选择提供多种平台的检测：流式、共聚焦、高内涵具有出色的信噪比，检测结果稳定（重复性好）已在TROP2、PD1、Her2等多个靶点上验证
TROP2抗体内化检测案例展示
免疫荧光结果显示，1h后，TROP2抗体从细胞膜表面进入到细胞内部，细胞内部荧光信号增强，表明抗体已内化。
服务优势
免疫检查点、病毒及其受体结合后产生相应的生物学功能，中和/阻断抗体的效果评价在药物研发中起着重要的作用。例如，肿瘤免疫治疗中免疫检查点抑制剂，可阻断免疫检查点与其配体结合，抑制其介导的免疫耐受、增强免疫细胞活性，促进肿瘤细胞的免疫清除；病毒入侵机体后，中和抗体能够通过阻断病毒颗粒与其受体结合，并激活巨噬细胞、NK细胞等免疫细胞和补体等多种机制来杀伤、清除病毒颗粒以及受感染细胞。
亲和力是评价可逆反应过程中两个分子间相互作用强弱的特征参数，是了解分子以及识别生物学过程、药物的发现与筛选等的重要指标。目前业内常用的检测技术有表面等离子共振（Surfaceplasmonresonance,SPR）和生物膜干涉技术（Bio-LayerInterferometry,BLI）。SPR技术作为抗体领域分子互作的“金标准”，目前已经被中国、美国和日本药典收录。义翘神州拥有丰富和高质量的蛋白资源，如Fc受体蛋白、免疫检查点蛋白、生物素标记蛋白等，同时，我们也拥有完整的一体化分子互作检测服务平台，为客户提供抗体筛选、活性检测、表位作图、一致性评价和质量控制检测服务。
服务范围
抗体药物通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥其抗肿瘤活性。抗体药在细胞膜表面上与生长因子竞争结合受体，阻断信号传递过程，从而阻止细胞的生长和扩散，诱导细胞凋亡。例如，靶向HER2的抗体药通过与HER2胞外区域结合阻断HER2同源二聚体的形成，介导HER2受体的内吞及其在溶酶体中的降解，抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞的凋亡。细胞凋亡检测实验有助于研究抗体药的抗肿瘤作用机制，为体外药效评价提供了重要的参考指标。依托检测平台，义翘神州的细胞凋亡检测服务，以AnnexinV/7-AAD检测和线粒体膜电位检测两种方法为主，利用流式细胞仪检测不同类型、不同时期细胞凋亡状况及分析凋亡细胞比例等。
凋亡检测方法及案例展示
凋亡检测试剂盒推荐
细胞增殖抑制检测，是体外生物学活性检测中比较常见的筛选抗体药物的方法，通过检测细胞增殖活性，可以指示肿瘤细胞增殖活性，在抗体药物筛选及药效评价中发挥至关重要的作用。生长因子类靶点（如VEGF、HER2、EGFR）的抗体药物，通常通过阻断靶点和其受体的结合，从而抑制生长。因而在进行生物学活性测定时，可以采用细胞增殖抑制实验来测定。义翘神州提供细胞增殖抑制检测服务，同时我们拥有高质量细胞因子产品，可以高效准确地助力细胞增殖检测。
细胞增殖抑制试验通过阻断细胞因子与受体相互作用，影响细胞增殖状态来反映抗体的活性。该方法中细胞的生长对细胞因子具有依赖作用，当细胞因子与待测抗体结合后，无法与细胞表面受体结合，细胞增殖受到抑制。
细胞因子检测有多种途径，既可以检测外周血液中的细胞因子的浓度，也可以通过体外培养刺激淋巴细胞分泌细胞因子，放大药物对免疫细胞的刺激作用，从而预测药物引起细胞因子释放综合征的潜在风险。
最经典的细胞因子检测方法是ELISA法，通过测定靶细胞与抗体及刺激因子共培养后的细胞因子来评价抗体的生物学活性。义翘神州提供细胞因子检测服务，可应用于不同场景。同时依托抗体开发技术平台，义翘神州自主研发了细胞因子ELISA检测试剂盒，具有特异性强、灵敏度高和线性范围广等特点。
应用场景
免疫检查点
免疫检查点的拮抗剂/激动剂作用效果，检测T细胞分泌IL-2等细胞因子。
细胞因子靶向药
细胞因子或受体靶点的抗体药，可以阻断细胞因子-细胞因子受体，从而影响细胞分泌细胞因子。如IL17可以诱导NIH/3T3或HFF细胞分泌IL-6。
体外细胞因子释放试验
细胞因子释放测定法（CRA）是一项利用从健康受试者中采集的免疫细胞进行的体外评估。
服务流程
确定检测方案
签订合同
寄送实验材料
实验检测
结果分析并出具检测报告
案例展示
某些细胞因子具有促进细胞分泌其他细胞因子的作用，抗体通过阻断细胞因子对细胞的作用可抑制分泌，进而反映抗体的活性。
混合淋巴细胞反应(MLR)作为用来研究组织相容性抗原同种免疫应答反应的常见模型。简而言之，将不同类别白细胞混合在一起并进行检测。常见的三种MLR实验包括：DC+T，PBMC+PBMC以及T+T。其中DC+T是评估抗体药增强T细胞应答效果的经典实验之一。研究者需要根据候选药物作用机理以及研究目的综合判断MLR实验细胞类型。通过MLR检测，我们可以测定不同个体间主要组织相容性复合体(MHC)抗原的差异。特别是药物潜在免疫的活性或抑制作用可以使用该检测来确定。
混合淋巴细胞反应（MLR）主要用来评价免疫靶点的药物受试物对人的原代T细胞功能的影响，分析和鉴定受试物在由原代APC介导的T细胞活化中的抗原呈递效果。义翘神州可以为客户提供定制化的抗体功能检测服务。
双方进行沟通咨询
签订技术服务合同
双方沟通具体实验细节，确定实验方案
开展实验：从寄送样本到结果分析
反馈结果，出具服务报告
靶点蛋白是抗体药开发的关键试剂之一。义翘神州是全球领先的靶点蛋白供应商，为客户提供高质量靶点蛋白，覆盖细胞治疗、免疫检查点、细胞因子、酶和受体等，全面助力药物开发进程。
产品优势
自1986年第一个鼠源单克隆抗体药物MuromonabOKT3获批，美国FDA已累计批准100多款抗体药物，用于治疗乳腺癌、肝癌、肺癌、自身免疫病、过敏等疾病。另外，有众多抗体药物处于开发及审批中。义翘神州提供高品质研究级Biosimilar对照抗体生产服务，可交付高纯度和低内毒素的对照抗体，作为阳性对照用于体外药效评价实验。
基因合成及密码子优化(可选)
载体构建
表达及纯化
QC分析
交付内容
注意:标准服务包括A280检测抗体浓度和SDS-PAGE评价纯度，如需SEC-HPLC、内毒素、亲和力、ELISA、FACS等其他检测，请额外提出。
Anti-PDL1Antibody
细胞因子广泛应用于细胞增殖抑制检测、细胞因子释放检测、混合淋巴细胞反应（MLR）等实验。义翘神州开发了一系列高活性、高纯度、高批间一致性的细胞因子如M-CSF、VEGF165、IL-15和IL-21等，支持抗体药的开发。
更多高活性细胞因子及受体产品
体外细胞因子释放试验（CRA）通常被认为是治疗性抗体临床前安全性评估的一部分，常规评估的细胞因子包括IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α等。义翘神州开发了高品质的细胞因子ELISA检测试剂盒，每个试剂盒均经过八大QC标准检测，充分保证试剂盒的高性能及高批间一致性，适用于细胞因子释放、MLR检测等抗体药开发的不同应用场景。
八大QC放行标准
更多高品质细胞因子ELISAKits
混合淋巴细胞反应（MLR）是一种体外细胞免疫检测方法，是评估抗体药增强T细胞应答效果的经典实验之一。义翘神州开发了一系列高品质的CD3、CD4、CD8和CD86等流式抗体产品，具有特异性好、亲和力佳、信噪比优等特点，可用于MLR实验检测不同T淋巴细胞亚群或DC细胞的水平。
更多流式抗体产品列表
抗体药的功效不仅取决于Fab段与靶抗原的结合活性，还取决于Fc段与Fc受体的相互作用。两者的相互作用不仅影响了抗体药的半衰期，还介导了抗体依赖的ADCC、ADCP及CDC效应。预测抗体药物功能效价可通过体外检测抗体Fc段与Fc受体的结合。目前，抗体和Fc受体检测主要有FcRn和FcγR。
为支持抗体药物开发，义翘神州开发了一系列重组FcγRs/FcRn产品，涵盖多种亚型及其突变形式，支持抗体筛选、CMC阶段活性检测、一致性评价、安全性验证等不同应用场景。
Fc受体蛋白产品
FcγRs/FcRn产品优势
活性经ELISA/SPR/BLI验证高纯度：SDS-PAGE≥95%,SEC-HPLC≥90%完美的批间稳定性
提供Biotin定点标记蛋白（AVItag）HEK293/CHO细胞表达，更接近天然结构多种属，支持种属交叉验证