2020-2022年,每年的6-7月在潍坊市临朐县、安丘市和高新区采集白纹伊蚊幼虫带回实验室混合饲养繁殖至F1代,Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫以及羽化后3~5d的未吸血雌蚊备用。
幼蚊检测杀虫剂:97%残杀威、91.56%双硫磷、96.4%氯菊酯、7000ITU/mg苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillusthuringiensisisraelensis,Bti);成蚊检测药膜:0.08%高效氯氰菊酯、0.4%氯菊酯、0.07%高效氯氟氰菊酯、0.03%溴氰菊酯、0.5%马拉硫磷、2%毒死蜱、0.2%杀螟硫磷、0.2%虫威、0.05%残杀威。幼蚊检测药剂和成蚊检测药膜均由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供。
将待测药剂用丙酮倍比稀释配制成5~7个系列测试浓度。在各烧杯(250ml)中加入200ml脱氯水后再分别从各烧杯中吸出0.1ml液体,然后再加入0.1ml相应的待测药液并搅拌,而后每个烧杯中加入25~30只试虫。试验重复3次,以丙酮作为对照。室温控制在(25±1)℃,相对湿度为60%~80%。24h后观察结果,针头触碰幼虫,震颤或不能游动者判断为死亡。记录各组的死虫数。
将恢复筒接装在放隔板的一面,吸蚊管吸20~30只雌蚊,轻轻吹入筒内,瞬间关闭隔板,平行放置并剔除不健康蚊虫。在隔板另一面装上已衬贴药膜的接触筒,瞬间把隔板抽开,将恢复筒内蚊虫轻吹入接触筒,迅速关上隔板。将筒平放,试虫与药膜接触1h,打开隔板将蚊虫吹入恢复筒关闭隔板,取下恢复筒直立放置,糖水棉球置于尼龙网上。以白油与乙醚的混合物作为对照组。试验重复3次,计算24h死亡率。
死亡判断标准:试虫完全不动视为死亡。
通过现场查看和访问填表的形式获取潍坊市15个县(市、区)爱国卫生部门、疾病预防控制机构及有害生物防制公司等2020-2022年卫生杀虫剂的使用情况。
用SPSS19软件计算白纹伊蚊幼虫半数致死浓度(LC50)、毒力回归方程;成蚊接触筒法计算雌蚊接触药膜后24h的死亡率,对照组死亡率在5%~20%,须用Abbott公式校正,对照组死亡率>20%,实验无效。