检测方法标准依据：GB5009.228-2016食品安全国家标准食品中挥发性盐基氮的测定
1.范围
本标准规定了食品中挥发性盐基氮的测定方法。
本标准适用于以肉类为主要原料的食品、动物的鲜(冻)肉、肉制品和调理肉制品、动物性水产品和海产品及其调理制品、皮蛋(松花蛋)和咸蛋等腌制蛋制品中挥发性盐基氮的测定。
**法半微量定氮法
2.原理
挥发性盐基氮是动物性食品由于酶和细菌的作用,在腐败过程中,使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。挥发性盐基氮具有挥发性,在碱性溶液中蒸岀,利用硼酸溶液吸收后,用标准酸溶液滴定计算挥发性盐基氮含量。
3.试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。
3.1试剂
3.1.1氧化镁(MgO)。
3.1.2硼酸(H3BO3)。
3.1.3三氯乙酸(C2HCl3O2)。
3.1.4盐酸(HCl)或硫酸(H2SO4)。
3.1.5甲基红指示剂(C15H15N3O2)。
3.1.6溴甲酚绿指示剂(C21H14Br4O5S)或亚甲基蓝指示剂(C16H18ClN3S·3H2O)。
3.1.795%乙醇(C2H5OH)。
3.1.8消泡硅油。
3.2试剂配制
3.2.1氧化镁混悬液(10g/L):称取10g氧化镁,加1000mL水,振摇成混悬液。
3.2.2硼酸溶液(20g/L):称取20g硼酸,加水溶解后并稀释至1000mL。
3.2.3三氯乙酸溶液(20g/L):称取20g三氯乙酸,加水溶解后并稀释至1000mL。
3.2.4盐酸标准滴定溶液(0.l000mol/L)或硫酸标准滴定溶液(0.1000moⅠL):按照GB/T601制备。
3.2.5盐酸标准滴定溶液(0.0100mol/L)或硫酸标准滴定溶液(0.0l00moL):临用前以盐酸标准滴定溶液(0.1000mol/L)或硫酸标准滴定溶液(0.1000mol/L)配制。
3.2.6甲基红乙醇溶液(1g/L):称取0.1g甲基红,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。
3.2.7溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L):称取0.lg溴甲酚绿,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。
3.2.8亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L):称取0.1g亚甲基蓝,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。
3.2.9混合指示液:份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿♂醇溶液临用时混合,也可用2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
4.仪器和设备
4.1天平:感量为1mg。
4.2搅拌机。
4.3具塞锥形瓶:300mL。
4.4半微量定氮装置:如图A.1所示。
4.5吸量管:10.0mL、25.0mL、50.0mL。
4.6微量滴定管:10mL,*小分度0.01mL。
5.分析步骤
5.1半微量定氮装置
按图A.1安装好半微量定氮装置。装置使用前做清洗和密封性检査。
5.2试样处理
鲜(冻)肉去除皮、脂肪、骨、筋腱,取瘦肉部分,鲜(冻)海产品和水产品去除外壳、皮、头部、内脏、骨刺,取可食部分,绞碎搅匀。制成品直接绞碎搅匀。肉糜、肉粉、肉松、鱼粉、鱼松、液体样品可直接使用。皮蛋(松花蛋)、咸蛋等腌制蛋去蛋壳、去蛋膜,按蛋:水=2:1的比例加入水,用搅拌机绞碎搅匀成匀浆。鲜(冻)样品称取试样20g,肉粉、肉松、鱼粉、鱼松等干制品称取试样10g,精确至0.001g,液体样品吸取10.0mL或25.0mL,置于具塞锥形瓶中,准确加入100.0mL水,不时振摇,试样在样液中分散均匀,浸渍30min后过滤。皮蛋、咸蛋样品称取蛋匀浆15g(计算含量时,蛋匀浆的质量乘以2/3即为试样质量),精确至0.01g,置于具塞锥形瓶中,准确加亼100.0mL三氯乙酸溶液,用力充分振摇1min,静置15min待蛋白质沉淀后过滤。滤液应及时使用,不能及时使用的滤液置冰箱内0℃～4℃冷藏备用。对于蛋白质胶质多、粘性大、不容易过滤的特殊样品,可使用三氯乙酸溶液替代水进行实验。蒸馏过程泡沫较多的样品可滴加1滴～2滴消泡硅油。
5.3测定
向接收瓶内加入10mL硼酸溶液,5滴混合指示液,并使冷凝管下端插亼液面下,准确吸取10.0mL滤液,由小玻杯注入反应室,以10mL水洗涤小玻杯并使之流入反应室内,随后塞紧棒状玻塞。再向反应室内注人5mL氧化镁混悬液,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏。蒸馏5min后移动蒸馏液接收瓶,液面离开冷凝管下端,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部,取下蒸馏液接收瓶。以盐酸或硫酸标准滴定溶液(0.0100mol/L)滴定至终点。使用1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液混合指示液,终点颜色至紫红色。使用2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液混合指示液,终点颜色至蓝紫色。同时做试剂空白。
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