喹乙醇是一种饲料添加剂,能提高饲料转化率,促进牲畜生长。但对大多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在致畸性,致突变,致癌作用。因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。《ZG兽药典》(2005版)也有明确规定,喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。
方法优势
迪马科技建立猪肉、猪肝等动物源性食品中喹乙醇代谢物解决方案,对比《GB/T20746-2006牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》,本方案:
不需要甲酸溶液消化、蛋白酶酶解、盐酸酸化等复杂操作步骤,采用2%甲酸乙酸乙酯作为提取液,采用ProElutPXA固相萃取柱,水、甲醇淋洗,2%甲酸乙酸乙酯洗脱;
方法检出限为0.27μg/kg,较国标方法《GB/T20746-2006牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》的方法检测限0.5μg/kg低,可供广大分析工作者使用。
以下为详细解决方案,敬请参考!
1、适用范围
适用于猪肉、猪肝等动物源性食品中喹乙醇代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的检测,检出限是0.27μg/kg,定量限是0.63μg/kg。
2、提取
(1)取2.0g样品,加入5g无水硫酸钠,搅匀,加入15mL2%甲酸乙酸乙酯,涡旋混合,振荡5min,8000rpm下离心2min,收集上清液;
(2)将下层残留物用10mL2%甲酸乙酸乙酯按照步骤(1)重复提取一次,合并两次上清液;
(3)将上清液在35℃水浴条件下,减压蒸至近干,再加入10mL2mo/LHCl水溶液超声溶解,转移至15mL离心管中,6000rpm下离心2min,取5mL下层清液,待净化。
3、净化
ProElutPXA150mg/6mL(Cat.#68304)
a活化:5mL甲醇,5mL水活化;
b上样:加入待净化液,弃去流出液;
c淋洗:加入10mL水,5mL甲醇,弃去流出液;
d洗脱:加入5mL2%甲酸乙酸乙酯,收集流出液;
e重新溶解:将流出液在35℃下减压蒸馏至干,用甲醇定容至1mL,供LC-MS/MS分析。
4、色谱条件
4.1液相条件
色谱柱:EndeavorsilC18,100×2.1mm,1.8μm(Cat.#87003)
流速:0.2mL/min
进样量:5μL
柱温:35℃
流动相:0.2%甲酸水:乙腈=40:60
4.2质谱条件
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表
5、添加回收结果
猪肉和猪肝中喹乙醇代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的LC-MS/MS检测添加回收结果
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