招募68名在校非体育专业大学生为研究对象，所有研究对象对实验内容知情同意，均完成了运动风险筛查问卷调查、体力活动问卷、身体活动危险性检查表、膳食调查问卷。实验得到伦理道德委员会批准。
无规律运动，无严重传染病史，无肢体缺陷，无精神疾病，无严重器质性病变，至少一个月内未使用抗生素和抗腹泻药物。
PhusionHigh-FidelityPCRMasterMix，NEB公司；PowerMax试剂盒，MOBIOLaboratories公司；AgencourtAMPureXP60mLKit，BeckmanCoulter公司；AxygenGelExtractionKit(250)，Axygen公司；QubitdsDNAHSAssayKit，LifeTechnologies公司；LibraryQuantKitIlluminaGARevisedPrimers-SYBRFastUniversal，KAPA公司；HiSeq3000/4000SBSKit(300cycle)，Illumina公司。荧光定量PCR仪，Eppendorf公司；NanoDrop2000C，Thermo公司；PCR仪，BIOER公司；凝胶成像系统，Bio-Rad公司；Qubit2.0，LifeTechnologies公司；核酸分析仪，Agilent公司；高通量测序仪，Illumina公司。
16SrRNA基因作为可以对细菌进行种属鉴定的序列，包括10个保守区域和9个高变区域，高变区域可以体现细菌间的差异。本研究选择V4变异区的正向引物515F(5′-GTGCCAGCMGCCGCGGTAA-3′)和反向引物806R(5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′)进行PCR扩增。PCR反应体系(50μL)：PhusionHigh-FidelityPCRMasterMixwithHFBuffer25μL，515F和806R引物(10μmol/L)各3μL，DNA模板10μL，DMSO3μL，ddH2O6μL。PCR反应条件：98℃30s；98℃15s，58℃15s，72℃15s，25个循环；72℃1min。得到的PCR扩增产物用AgencourtAMPureXP60mLKit纯化，并使用QubitdsDNAHSAssayKit进行量化，最后使用IllluminaHiSeq4000双末端(Pair-End)2×150bp平台进行测序。
根据Barcode序列和引物序列把下机数据拆分为各个样本的数据。截去Barcode和引物序列后，使用VSEARCHV2.4.4对每个样品的Reads进行拼接，得到原始Tags数据(RawTags)。在此基础上对序列质量进行质控、过滤、去除嵌合体序列，得到有效数据，以97%的相似度进行OTU聚类和物种注释。根据聚类结果，使用QIIME和R软件，基于R包“VennDiagram”生成韦恩图，比较不同组之间共有和特有的OTU数目；基于QIIME计算α多样性的值，采用R中的ttest函数和Ape包进行组间香农-威纳指数(Shannon指数)比较并绘制主坐标分析(PrincipalCo-OrdinatesAnalysis，PCoA)图，对运动前后微生物群落结构进行显著性分析；不同分类水平的组间物种构成丰度图使用R包Barplot函数；组间差异物种使用LEfSe默认设置进行各组间分类单位上的检测。
使用SPSS19.0软件对数据进行差异性分析。符合正态分布的数据，描述采用均值±标准差表示，不符合正态分布的数据则采用M(P25，P75)表示；运动前后指标采用秩和检验或配对样本t检验。