产品名称：CanineDistemperVirus(CDV)犬瘟热病毒RT-PCR试剂盒
产品规格：50次/盒
保存：低温运输，-20℃保存
保质期：12个月
本产品就是根据PCR原理专门开发的试剂盒，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。
2.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
3.产品精心优化且特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟除此之外的其它微生物DNA发生交叉反应。
4.PCRmix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5.本产品足够50次20μL体系的PCR反应。
6.本产品只能用于定性实验，不能用于定量。
7.本产品只能用于科研
规格及成份（具体信息详情以説明书为准）
编号
成分
规格
试剂一
2×ProbeqPCRMagicMix
500μL(本色盖)
试剂三
荧光PCR专用模板稀释液
1mL(黄盖)
试剂二
qPCR引物混合液
100μL(白盖)
试剂四
qPCR探针
50μL(棕色管)
试剂五
探针法qPCR阳性对照(1×10E8/μL)
50μL(红盖)
使用手册
1份
CanineDistemperVirus(CDV)犬瘟热病毒RT-PCR试剂盒样品的制备
1.如果有N个样品，必须设置N+2个提取反应，多出的两个中一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL牛乳头瘤病毒PCR阳性对照（1×10E6拷贝/μL，本试剂盒提供）再加上一定量的水作为制备的阳性对照（加水后其总体积跟样品一样，样品体积多少取决于所用试剂盒的要求）。可以用水作为制备的阴性对照。
2.用自选方法纯化上述N+2个样品的DNA。本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。
电泳分析?
1.取5-10uL扩增产物进行常规琼脂糖电泳，检测扩增效果，由于扩增产物较短，建议用1.5%-2.0%的琼脂糖凝胶。
2.阳性样品预期得到的扩增产物长度为200bp左右。如果两个阴性对照（样品制备阴性对照或PCR阴性对照）有此扩增产物，说明环境污染，则整个实验无效，不需要分析实验结果。
3.如果所有样品和PCR阳性对照均无此扩增产物，则说明有系统性的问题（试剂、设备、程序、操作等），需要重复并排查原因。
4.如果没有上述两种情况，则实验有效，可以分析样品的扩增结果。N+2个样品中有扩增产物的判定为阳性，无则判定为阴性。
数据处理：
1.如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品RNA浓度的log值，再推算出其浓度。
2.如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照Ct必须大于或等于40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct值应该小于或等于30。对待测样品，如果其Ct大于或等于40则为阴性，如果小于或等于35则为阳性。如果在35-40之间，则重复一次。若重复结果Ct值小于40，扩增曲线有明显起峰，该样本判断为阳性，否则为阴性。
CanineDistemperVirus(CDV)犬瘟热病毒RT-PCR试剂盒样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。阳性对照需单独放置，不要污染其他试剂。
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
4、自备试剂：样品DNA。
CanineDistemperVirus(CDV)犬瘟热病毒RT-PCR试剂盒注意事项
1所有操作严格按照说明书进行；
2试剂盒内各种组分使用前应自然融化，混匀并短暂离心；
3反应液应避光保存；
4反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
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