导语：如何才能写好一篇显微镜在医学检验中的重要性，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。
MicroscopicExaminationofBbloodSmearsontheNecessityofAnalyzingBloodTests
ZHANGQun-ying,XIANGJun-jun
(LongquanyiDistrictHospitaloftraditionalChineseMedicine,Chengdu610100,Sichuan,China)
Keywords：Bloodanalyzer;Bloodsmears;Microscopy;Blood
1资料与方法
1.1一般资料将2013年5月~12月共980份血液标本采用血液分析仪检查，对其中符合检查标准的400份标本进行血涂片瑞氏染色，瑞氏染液严格按照《全国临床检验操作规程》第3版要求配制[4]，染色后在显微镜下进行形态学观察，所用的血液分析仪为MindrayBC-5600全自动血细胞分析仪，所用显微镜为日本OlympusCX-21生物显微镜。
1.2方法本组研究中各种检查所用仪器均按要求进行日常维护，并做室内质控，保证检查结果的准确与可靠。将血液分析仪检测结果与血涂片显微镜检查结果进行对比分析。
2结果
血液分析仪检测结果与血涂片显微镜检查结果259例（64.75%）相符，141例不相符（35.25%），具体体现在：血液分析仪检测结果显示WBC正常或升高，N升高时，血涂片显微镜检查结果异常率为18.25%（73/400），当WBC正常或升高或降低，B、M计数改变时，血涂片显微镜检查结果异常率为11.5%（46/400），即将WBC正常或升高或减低，RBC、HB、MCV、RDW等指标异常时，红细胞形态有明显变化，见表1。
3讨论
近年来，随着血细胞分析仪的迅速发展，检测项目也从原来白细胞的二分类、三分类发展为目前的五分类，而且血细胞分析仪检测方法也不断在更新，因此，我国临床各级医院越来越依赖于血细胞分析仪，而且血细胞分析仪的出现给工作量极大的检验工作者带来了更高的效率。有调查结果显示，某市15所三级及二级医院，其中40%的医院基本不进行血常规检验的血涂片显微镜检查工作[5]。有研究显示，我国各级各类医院对血液标本进行血涂片显微镜下检查的重视程度也存在较大差异[6]。
血液分析仪显微镜检查包括白细胞分类、红细胞形态观察、血小板形态观察及分布等，迄今为止，即使再先进的血液分析仪的工作原理也是通过了解细胞大小、细胞所含固形物的多少、细胞所含固形物的成份等来对细胞进行分类，但这一过程易受到各种因素的影响。目前国内使用的MindrayBC-5600全自动血细胞分析仪对白细胞进行五分类是根据白细胞体积大小而分类的，不仅对嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及幼稚细胞进行区分，而且对异型淋巴细胞及中性粒细胞毒性改变不能加以识别，更重要的是，这种分类方法会将小粒细胞作为中间细胞，大片成簇的血小板作为白细胞。总之，目前的血液分析不能对血细胞核大小、形态、核中染色质情况、核仁大小、形态及细胞内特殊物质进行准确判断，而且细胞具有的多态性、异型淋巴细胞及原始细胞等细胞的结构、形态及内含物质的变化，均是血液分析仪无法准确判断的[7]，因此，对于白血病、类白血病及传染性单核细胞增多症等细胞数量大小变化不大的疾病则难以诊断[8]。
血涂片显微镜检查是指血液经推片、染色后在光学显微镜下观察红细胞、血小板形态、进行白细胞分类及寄生虫检查等的一种人工检验方法，血涂片显微镜检查在临床诊断各种疾病中有着重要的作用，如白血病的初诊以血涂片显微镜检查中发现幼稚红细胞，并辅以组化染色等进一步检查以确定诊断，而血细胞分析仪对白血病细胞中出现的Auers小体则无法辨认[9]。再如严重感染、败血症、恶性肿瘤等情况下，中性粒细胞可表现为细胞大小不均、空泡变性、核左移、巨杆状核及中毒颗粒等，这些中性粒细胞的毒性改变，血液分析仪也是无法辨认的。本组研究显示，血液分析仪检测结果显示WBC正常或升高，N、B、M升高时，血涂片显微镜检查结果有较高的异常率，表现为中毒颗粒、空泡等现象，当RBC、HB、MCV、RDW等指标异常时，红细胞形态有明显变化，应警惕有无贫血的发生。
为了使血涂片显微镜检查结果准确，在血涂片显微镜检查中，应注意血涂片及其染色的质量，涂片时应厚薄适中，边缘整齐，血膜头、体、尾明显。总之，血涂片显微镜作为血常规检查的基本部分，是目前血液分析仪进行血常规检查一个重要的也是关键的补充，只有将血涂片显微镜检查与血液分析析检查有机的结合，才能为临床检验提供更为可靠的检测结果，有效的避免了误诊或漏诊，从而可以为临床检验及患者的疾病诊断提供更准确的参考依据。
参考文献：
[1]宋颖,王青,李泳等.上海市2010年部分基层医院血液检验质量分析[J].检验医学,2012.
[3]常新剑,任俊宏.全自动血液分析仪进行血常规检验时血涂片分析的重要性[J].医学信息,2013.
[4]高丽娟.血涂片分析在血常规检验中的重要性[J].哈尔滨医药,2013.
[5]戴怀玉.血涂片镜检在血常规检验中的重要性分析[J].中外医学研究,2013.
[6]辛小明.血涂片镜检在血常规检查中的意义[J].基层医学论坛,2012.
[7]李艳珍.血涂片显微镜检查在血常规检验中的必要性分析[J].中国药物与临床,2013.
【关键词】医学高职高专检验仿真实训室仪器使用与保管
一、医学高职高专院校实训室仪器使用与保管存在的问题及分析
（1）学生的文化层次参差不齐，使得整体操作技能水平不高，对仪器的维护以及认知程度不足。
（2）教师对学生能正确使用仪器期望值过高。学生对实训室仪器充满好奇，想早点了解、熟悉。所以当老师介绍仪器使用时并没有认真听讲，但当进入实训室时发现了很多没有预想过的问题，学生上实验实训课人多、同时没在教师指导下使用仪器，很容易使仪器损坏。
（3）学生自身对仪器认识不到位。没有把仪器当作实验的重要实践技能工具，对仪器认识不透彻，不能将自己的兴趣与仪器很好的有机融合。习惯于被动的学习，不会主动的将仪器和技能、科研结合在一起。
（4）学校对实验实训人员队伍不够重视，管理实验实训仪器的实验教师队伍待遇低、自身责任心不强。实验实训教师没有对各类仪器进行培训，以为都是教师的事，不是自己的事。没有对新进仪器进行登记造册、档案管理。在实验者使用仪器后没有督促其登记。
（5）在学校进行教学的同时开展科研活动中，实验实训仪器故障后，没有及时登记故障原因、没有请工程师及时维修。使得实验实训室虽然仪器很多，但大多无法使用。主要是因为仪器当时故障时没有及时发现或没有及时登记进行维护。
（6）学生在学校没有很好的掌握实验实训仪器的原理、使用、维护，到医院实习、工作中会对仪器检测过程故障不好判断，会造成严重后果，检测结果发生误差，影响医生对病情的诊断。
二、实验实训仪器要加强管理及使用的重要性
（1）医学检验实验实训室仪器至关重要，不仅有助于学生在实训室得到技能培训。而且是医学生进入医院与在校学习实践的重要桥梁，如在实践中要求每个学生熟练地掌握普通单目显微镜到双目显微镜的使用技术，水平离心机与高速离心机使用技术，721、722分光光度计的使用，全自动血液分析仪、尿液分析仪、尿沉渣分析仪、全自动生化分析仪、酶标仪等仪器的正确使用，通过实验实训室使学生更好地走上临床。
（2）有助于仪器发挥更多的功能。医学检验仿真实训室的仪器比较贵重，如果损坏，不光造成经济损失，还会导致实验课的开出。因此，要对医学检验仿真实训室的仪器进行良好管理与维护。
（3）有助于提高学生的职业素质。降低学生在初学时因对仪器操作技术不熟练，标本对仪器污染的概率。通过严格的规章制度，增强了学生的对实训室仪器的正确使用观念和集体维护意识。
（4）在高职高专院校发展的今天，职业院校是当今的主流，教师在搞好教学的同时更注重自身的业务发展，进行学术交流、开展科研活动，更需要实验实训仪器。
三、高校、高职专科检验实训室仪器使用与保管的途径与方法
（2）制定班级分组组长、个人负责制：人手一台仪器时，在实验课前由组长到准备室领取仪器卡片，每四人一组，由组长按编号发给对应编号的学生。先由每位学生检查各自的显微镜是否完好，如没有问题签字，汇总交给组长后才能到准备室领取实验用品，实验教师通过组长汇总得知是否有仪器故障并及时排除。对于共用体积小的贵重仪器，在使用与管理时按班级学号分为4人一组，由组长到准备室签名领取实验仪器，才能上实验课，实验完毕后由组长清点完好后归还。
【关键词】血涂片镜检；血常规检验；血细胞分析仪
1.2仪器与试剂XE-2100血液分析仪以及相配套的原装试剂，双目光学显微镜以及瑞氏-吉姆萨复合染液。
1.3方法
在本次研究所收集的血细胞分析病例共有689例，血涂片镜检共有114例。其中发现异性淋巴细胞增多症有1例、传染性单核细胞增多症有2例、巨幼细胞性贫血有4例、缺铁性贫血共有5例、急性白血病2例，慢性粒细胞性白血病有1例，剩余99份血涂片镜检结果和血细胞分析仪结果一致。
随着医学技术的发展，血细胞分析仪在临床上面的应用越来越广泛，对于全血细胞在分析质量、效率以及精密度上面有了很大的提升作用，但是我院使用的是五分类法，五分类法是通过各种物理以及化学的技术，对白细胞进行分析并且获得外周血液当中五种常见的白细胞类型，也就是嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞以及单核细胞。对于幼稚细胞还不能够有效区分，更加不要说对异性淋巴细胞以及中性粒细胞毒性变等进行识别。这样的不足让我们知道血细胞分析仪在全血细胞计数分析当中只是一种过筛手段。如果遇到了可疑情况特别是病例条件之下，所检测出来的结果并不一定可靠，所以需要再通过人工涂片镜检来进行复查，当前很多医院没有复查的程序导致频繁出现医疗投诉或者是事故[2]。
全血细胞计数的检测结果，是需要用于临床患者的诊治以及预后当中，也有的是用于体检者健康状况的评估，当检测结果出现异常的时候需要使用血涂片镜检再次认真检查，将两种检测方法结果进行综合分析，这样能够有效的提高计数的准确率，更重要的是这样的复查能够让比较常见的贫血、感染性疾病以及白血病患者可以得到及时明确的诊断[3]。
参考文献
[1]余苗苗，周丽杰，金辉.血涂片分析在血常规检验中的重要性探析[J].中国保健营养，2012（10）：154-155.
【关键词】血液细胞检验，注意事项，质量控制
血常规检验不但为各种血液病的诊断及治疗提供了重要依据，也对其它系统疾病的诊断和鉴别提供了许多重要信息。因此，，血常规检测的准确与否至关重要。在临床医学中，为了取得可靠、有效、准确的血液检验结果，预防漏诊及误诊，对血液细胞检验做了大量的临床试验研究。在血液常规检测过程中，要对血液标本采集、血液标本稀释、血液标本储存、血液检验过程以及血液分析仪等进行有效的质量控制。
1血液细胞检验概述
2血液细胞检验的注意事项分析
2.1采集血液细胞样本应该注意事项
2.2血液细胞样本处理过程应注意的事项
采集到血液标本后，必须对标本进行抗凝剂抗凝处理，EDTA是目前使用较为普遍的抗凝剂，其对血小板以及白细胞形态的影响较小，适合用于血液细胞的检验。除了血液生理性因素以及采取部位等的影响外，血液标本的质量主要取决于抗凝剂与血液之间的比例。当抗凝剂的量不足时，血浆中会出现微凝血块，使用血细胞分析仪对具有微凝血块的标本进行检验时，微凝血块很可能会导致仪器阻塞，同时也会影响实验指标的准确性。
血液主要是由血浆及血细胞组成的红色黏稠混悬液。在对白细胞进行计数检验时，直接对白细胞进行血液计数是非常困难的，因而要在计数检验前要对血液进行合理的稀释处理。根据血细胞分析仪的基本原理，在对血细胞分析仪进行设计时，要将血液的计数容量及血液的稀释倍数充分考虑进去，作为重要的设计标准。
2.3血液细胞的储存时应注意的事项
3血液细胞检验的质量控制及措施
3.1制定完善的血液细胞检验质量控制管理机制
为了更好地提高血液细胞检验的质量，现代化的医疗机构应以先进的质量控制以及管理理念为指导，建立健全实验室检验质量控制机制，明确各工作岗位的检验人员的职责权限以及合理的奖惩制度。此外，还要制定严格的实验室操作标准，以规范实验人员的检验操作，使血液细胞检验工作的质量控制有据可循，为血液细胞检验的质量控制提供技术标准。
3.2优化血液细胞检验工作
优化血液细胞检验工作的流程，可以有效提高血液细胞检验的质量，为血液细胞检验的质量控制奠定基础。医院在对血液细胞检验结果进行质量控制时，应充分认识到检验工作流程对检验质量的提高以及质量控制的重要性。医疗机构应根据本院的血液细胞检验设备为基础，优化检验工作流程，促进医院血液细胞检验质量控制的顺利开展。
血液细胞检验过程的质量控制对血液细胞的检验质量有着重要的决定作用，在进行细胞检验前，应对仪器进行科学、准确得校验，并严格按照操作规程要求进行操作，以使检验质量满足临床诊断的要求，保证血液检验结果的精确度。
3.3血液检测分析仪的质量控制
血液分析仪细胞计数的最合适温度应保持在18～22℃之间，当温度过高或者过低时，都对测量结果产生影响；在打开血液分析仪后，首先要做实验室质控，并参与实验室间质评。实验室内的质量控制是血液细胞检验质量控制的重要环节；严格依照实验室操作程序对仪器进行操作，并采取相应的保养措施对仪器进行定期保养、清洗及浓缩冲洗，避免仪器发生堵塞现象；根据参数变化以及直方图确定细胞计数结果的准确性，所分析的准确性不高时，必须用显微镜进行复查；分析参数与实验结果之间的关系，将实验结果与临床分析相比较，判断二者是否相符，如果出现异常结果，应主动与临床实践相联系。
结语
总之，影响临床血液细胞检验结果的因素较多，要想取得科学、准确的检验
结果，对实验过程要应进行严格的监督及管理，确保实验室检验操作规范化。只有这样才能保证血液检测结果准确。
[1]张仲远，迟红梅.血液细胞检验中的注意事项及质量控制[J].实用医技杂志.2008（24）：52.
关键词:医学检验;标准化;实例分析
中图分类号:R197.6
1医学检验标准化的重要性
医学检验是运用现代物理化学方法、手段进行医学诊断的一门学科,主要研究如何通过实验室技术、医疗仪器设备为临床诊断、治疗提供依据。在高等院校通过系统学习这门学科,使学生了解如何鉴定人的血型、确定一个人是否贫血、肝功能是否正常、怎样拍人体胸部及四肢的X线片,怎样进行CT扫描等等。标准化(standardization)是指某一个领域需要达到的统一的标准要求,是为在一定的范围内获得最佳秩序,对实际的或潜在的问题制定共同的和重复使用的规则的活动。如信息工作标准化,其目的是使文献工作走向标准化、系列化和通用化,达到信息交流和资源共享。国际标准化组织(ISO)的主要任务是制订国际标准、协调世界范围内的标准化工作。标准化的问题由来已久,中国自秦代开始,历代王朝都有法定度量衡标准以及法定违反标准的法则。中国现代标准化工作的任务是制定标准、组织实施标准和对标准的实施进行监督。为了发展社会主义商品经济,促进技术进步,改进产品质量,对工业产品、规格、质量、等级或者安全卫生等需要有统一的技术要求,使标准化工作适应社会主义现代化和发展对外经济的需要。
2医学检验标准化操作的实例分析
3结语
[1]吕珏.浅谈医学检验分析前质量保证[J].临床检验杂志,2007,(6).
[2]张志德.医学检验质量控制的方法[J].实用医药杂志,2007,(5).
[3]王志平.如何确保医学检验质量的可靠性[J].中国民康医学,2008,(2).
关键词：实验教学动物传染病课程改革
随着21世纪科技突飞猛进的发展及人们对兽医工作者服务质量及要求的提高，培养具有较强实践能力和创新素质的兽医人才已是当前农业大学刻不容缓的工作。动物传染病是兽医专业一门重要的专业必修课，实验教学作为该门课程的重要组成部分，其重要性不言而喻。就动物传染病实验课程的改革，我有以下几点想法。
一、密切联系实际，更新教学内容。
1.联合实际，不断更新实验内容。
在21世纪的今天，随着养殖业不断地规模化、集约化发展，虽然为社会创造了巨大的经济利益，但是同时也为动物传染病的发生和流行创造了条件。动物传染病的发生和流行有了新的特点：新发病的种类越来越多，且危害严重。我国近几年出现了不少严重危害畜禽业的传染病，如禽流感、高致病性猪蓝耳病等，这些传染病不仅严重危害了养殖业，造成了严重的经济损失，而且给食品安全带来了威胁。而我们的实验课程仍然沿用以前的教材，对于这些严重威胁国计民生的重要传染病的实验没有开设，这就需要我们对动物传染病的实验教材进行改革更新。针对当前形势，为了培养更优秀的人才，这些应当充实到实验教学内容当中去［1］。
2.联系行业企业，根据需要适时更新教学内容。
二、加强实验室硬件和软件的建设，使实验室建设更趋合理化。
1.加快实验室硬件建设，促进教学改革。
实验室环境与设备条件是实验教学的硬件部分，也是实验教学的基本保障［2］。近年来，我院对实验教学比较重视，对实验室建设所投入的经费很多，动物传染病实验室新添了荧光显微镜、全自动酶标仪、倒置生物显微镜等教学仪器设备，在很大程度上满足了实验教学的需要，也进一步促进了实验教学改革。实验室环境稍微有点欠缺，由于是借用的化学实验室，环境达不到标准，如面积不够，实验室内没有传染病实验室所需的紫外灯，等等。相信这种情况随着学院新校区的建设将会得到解决。
2.在加强硬件建设的同时，不能忽略软件的建设。
软件的建设其实就是实验室管理人员的合理配置和合理运用。由于实验室人员的工作量大，工作繁琐，实验课一直是理论课的附属课程，很多老师都不愿做这项工作，造成实验教师的流动性很大。这对实验室管理尤其是实验教学是一项很大的弊端。应该建立一系列措施改善这一现象，比如对实验系列老师的学科发展要有长远的考虑，对实验教师的职称评定有一定的优惠政策，尤其是应该把实验课独立出来，成为一门单独的课程。我们学院较重视教师的培养，实验教师都具有本科以上学历，但是值得重视的是实验教师在不断提高学历层次的同时，还应注意不断学习使自己的知识结构更趋合理化。
三、改进教学模式，增强学生主观能动性。
1.改变传统的教学模式，发挥学生在实验中的主体作用。
2.开放实验室，进一步提高学生学习积极性。
［1］郑玉姝，赵朴等.动物传染病新形势引发的教学内容改革与思考［B］.黑龙江畜牧兽医，2010.05.0156-02：156-157.
［2］王建英，张义军等.面向21世纪谈我校实验室体制的改革与建设［J］.山西医科大学学报（基础医学教育），2002，4，（2）：151-152.
［3］王胜军，仝佳，苏兆亮等.临床免疫学和免疫检验的实验课程改革［B］.检验医学与临床，2007.10：1004-1005.
1.1一般资料本组960名白城市无偿献血者。年龄20～52周岁。
1.2试剂HBV试剂由厦门新创公司提供。
1.3检测方法HBV快速胶体金法操作步骤:将试纸条取出粘贴于不干胶记录纸相应位置水平放置并作好标记,用加样器或毛细细管吸取60微升新鲜全血缓慢加于试纸条箭头下方的垫片上,为防止弱阳性标本漏检,加样后10分钟观察并记录实验结果。
1.4复检方法采用ELISA法。
对960名献血者进行筛选分析,其中阳性63人,阳性率为6.56%。ELISA法检测HBV阳性为70份,阳性率为7.29%。胶体金法与ELISA法所检测结果比较,胶体金法阳性率低0.73%,假阴性为7.29%。
HbsAg为乙型肝炎表面抗原。HbsAg不仅存在于血液中,而且还存在于许多体液和分泌物中,如唾液、尿液、乳汁、等。一般在乙肝患者转氨酶(ALT)升高前2～8周的血清中出现。患者进入恢复期后,HbsAg的滴度可逐步降低;当患者血中出现抗HBs时,HbsAg可消失。由此可见,HbsAg是乙型肝炎早期诊断的指标之一。临床发现,一部分患者HbsAg在血清中可持续存在,原因可能是编码HbsAg的病毒基因与患者的肝细胞DNA进行了整合。在这种情况下,即使HBV已从人体内消除,肝细胞仍能不断地复制HbsAg。
胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。它主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
1971年Faulk和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法和快速免疫金渗滤法,用于检测HBsAg、HCG和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点[2]。
【参考文献】
【关键词】临床免疫检测；现代医学；设备管理；质量控制
1引言
2临床免疫检验的质量控制
3提高临床免疫检验质量的方法
3.1标本采集与设备管理的优化
3.2提高技术人员的素质
4小结
因此，对于整个临床免疫检验的过程而言，对免疫检验做好全面的质量管理是确保整个临床免疫检验结果准确性的重要保证。由于在对免疫检验标本进行采集到对标本进行检验的这个过程需经历很繁琐且比较复杂的一系列环节，因此，就要求临床医师必须要熟悉患者的生理、病理情况，同时，也要求护理人员及检验人员对临床免疫检验的各种影响因素要有全面系统的了解和认识，每一个环节的操作须做到规范化，完全按照标准进行，以确保免疫检验的可靠性和准确性，并提高临床治疗效果。
[1]马洪滨，王晗，刘立明，等.质量控制在临床免疫检验中的作用[J].医疗卫生装备，2012，33（4）.
[2]董书民.临床免疫检验的质量控制效果分析[J].中国卫生产业，2011（8）.
【摘要】为了切实提高物理实验教学质量，培养学生实验能力，针对当前实际教学中出现的问题，对实验内容，教学方法和考核方式进行改革。
【关键词】医学物理实验；存在问题；教学改革
在医学院校中，医学物理学是一门公共基础课，一般开设在大学第一学期，是高中生升入医学院校后进行专业学习的首要科目。它可以将学生从高中的物理知识逐步引入到专业医学中来，特别是医学物理实验作为实践课程，是学生系统的实验技能和方法训练的开端，对培养医学生实验技能和创新能力具有举足轻重的作用［1］。而在现今医学院校中，医学物理实验是薄弱环节，存在着一些问题，因此有必要对其进行教学改革。
1医学院校物理实验教学存在的突出问题
1.1实验安排陈旧，创新之处不足
在医学物理实验安排上，验证性实验多，设计性实验少；单一性实验多，综合性实验少；传统的实验内容多，反映医学物理学最新进展的实验内容少。实验内容陈旧、甚至个别内容与中学内容重复，内容多偏物理性与医学应用联系较少，不利于医学生个性发挥、创新能力的培养。
1.2过分强调实验结果，忽视物理思想和过程
由于过分强调实验技能的训练，学生机械地进行仪器使用调整、实验步骤、数据的记录处理，得出符合理论的结果，对实验现象和结果进行的思考、分析、研究少。学生感到医学物理实验的收获不大，过一段再进行实验时，就没有了印象，教学效果不佳。
1.3学生对实验教学重要性认识不足，缺乏实验兴趣
学生从思想上没有认识到物理实验对综合能力培养的重要性，认为纯物理性的实验与医学联系甚少，对医学的学习、发展缺少帮助。学生对实验中要求掌握的实验思维方法、技巧及实验作用等都没有清晰的认识，表现为学生实验技能较差，不愿意做实验，有相当一部分学生存在严重畏难厌学情绪，缺乏对物理实验的兴趣，学习状况不佳。
1.4实验课教师讲的过多，灌的过多，学生学习效果不佳
转贴于2医学物理实验教学改革的探讨
2.1实验内容的调整与革新
2.2教学方法的革新
2.3建立“半开放式”、“选修实验”教学方式
2.4考核方式的改革
以往对于物理实验的考核是通过笔试理论成绩和平时实验成绩，平时实验成绩只是实验报告成绩。这样会造成学生重实验报告，轻实验操作，重理论，轻动手的弊病，不利于素质的培养。为督促学生认真做实验，真正考核学生实验能力，可将物理实验课成绩分为三部分：一是笔试理论成绩，考查学生对实验原理、实验方法以及实验注意事项的掌握；二是平时实验的成绩，这包括每次实验课学生出勤情况，具体操作情况以及实验报告情况，每次实验结束以后教师当堂给出成绩；三是期末操作能力的成绩，应采取对学生随机抽查的形式，同时对实验项目也进行随机选择，对学生平时的实验效果进行实际的检验。这三部分各占一定比例。这样的考核方式，既可以使学生重视平时的实验过程，调动起学生的积极性和主动性，又可以真正地提高学生实验操作及分析、解决问题的能力。
1喀蔚波，医学物理学教育的现状与思考.中国医学物理学杂志，2002，19(4):198～199.
1材料与方法
1.1实验动物及分组
相同遗传背景的雄性SD大鼠（购自浙江省动物实验中心）72只，体质量300～350g，随机（随机数字法）分为4组：Sham组（枕大池注生理盐水）、SAH组（枕大池注血）、SAH+SP600125组（SAH模型建立前枕大池注射SP600125）和SAH+DMSO组（SAH模型建立前枕大池注射DMSO）。
1.2枕大池注血法制作自发性SAH模型
大鼠左右耳根连线中点枕外隆凸往下约0.5cm可及一凹陷，5号半头皮针在此处以45°扎入0.5cm左右，断尾取自体血0.3ml以0.1ml/min缓慢注入枕大池。保持大鼠俯卧位、头低30°，持续30min，让血液靠重力作用下进入基底池。对于Sham组大鼠，则往枕大池内注入0.3ml生理盐水，其余步骤均相同。造模完成后将大鼠放回笼中饲养，保证每天的饲料和饮水充足，观察大鼠的精神、行为和饮食等情况并进行记录[4]。
1.3JNK抑制剂SP600125
将JNK抑制剂SP600125（美国Sigma公司）溶解在1ml100%DMSO（美国Sigma公司）中，SAH+SP600125组在注血前15min以0.3mg/kg缓缓注入枕大池，而SAH+DMSO组则注入相同剂量DMSO[5-6]。
1.4脑组织含水量及BBB通透性测定
各组大鼠分别在SAH24h后迅速断头取脑，滤纸吸去表面血液和水分，分别用分析天平称湿质量（分度值0.1mg），然后置入试管内，在105℃恒温干燥箱内烘烤至恒重（两次质量差≤0.2mg）后取出称干质量，脑组织含水量=[（湿质量-干质量）/湿质量]×100%[7]。以0.5、1、2、4、6、8、10μg/ml为伊文氏蓝标准浓度，绘制伊文氏蓝标准曲线。处死前1h经右侧股静脉注射2%伊文氏蓝（5ml/kg，美国Sigma公司），麻醉后常规灌注。迅速取脑，滤纸吸去表面血液和水分后称重，加入5倍体积的二甲基甲酰胺（广州金华大化学试剂有限公司），60℃水浴中孵育24h，1500r/min离心10min，取上清液，用紫外分光光度计在伊文氏蓝最大吸收光谱620nm处测吸光度，从标准曲线上查得伊文氏蓝含量，结果以μg/g脑组织表示[8]。
1.5免疫组织化学染色
SP法行Claudin5及JNK免疫组织化学染色，常规脱蜡至水；3%H2O2去离子水室温孵育20min；微波炉加热法抗原修复；滴加正常山羊血清工作液封闭，室温孵育10～15min；滴加兔抗Claudin5及JNK抗体（1∶300），4℃过夜；滴加生物素化二抗工作液（IgG/Bio），37℃孵育20min；滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液（SA/HRP），37℃孵育20min；DAB显色，显微镜下控制染色程度；苏木素溶液复染、1%盐酸乙醇溶液分化、1%氨水返蓝；梯度乙醇逐级脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。其中，Claudin5及JNK抗体购自SantaCruz公司。
1.6Westernblot检测
将冰冻的脑组织用蛋白提取试剂盒提取总蛋白，定量试剂盒（BCA法）测定蛋白浓度。依次加入5×上样缓冲液煮沸、上样、电泳、转膜、封闭，滴加兔抗Claudin5及JNK（1∶750）4℃摇晃12h，PBST洗膜15min×3次，滴加生物素标记的二抗（1∶2000），4℃摇晃3h，PBST洗膜10min×3次后行ECL发光5min，应用胶片曝光，结果扫入凝胶成像系统进行吸光度分析。用目的条带与βactin条带的吸光度比值表示样本表达强度。其中，Claudin5及JNK抗体购自SantaCruz公司。
1.7统计学方法
2.1脑组织含水量测定
干湿质量法测定脑组织含水量，与Sham组（76.93±1.30）%相比，SAH（79.61±1.32）%和SAH+DMSO组（79.30±1.09）%在SAH24h后脑组织含水量显著增加（P
2.2BBB通透性测定
伊文氏蓝法评估BBB通透性，SAH组在SAH诱导后24h可见各脑区伊文氏蓝明显外渗，为（9.92±0.88）μg/g脑组织，相对于Sham组（3.47±0.32）μg/g脑组织，差异具有统计学意义（P
2.3免疫组织化学染色
免疫组织化学染色后可见JNK与Claudin5均为胞浆表达。Sham组众多脑血管内皮细胞和室管膜上皮细胞胞浆棕褐色着色，为Claudin5阳性蛋白表达，而几乎找不见JNK阳性蛋白表达。SAH诱导JNK表达，在SAH和SAH+DMSO组大脑半球可见很多胞浆深褐色着色，为JNK阳性表达神经元，却很难发现Claudin5蛋白阳性表达。SP600125的干预则逆转上述过程。
2.4JNK及Claudin5的表达
SAH24h后JNK表达的吸光度值高达（0.58±0.05），较Sham组（0.12±0.02）显著升高（P
Claudin蛋白家族至少有24个成员，促使TJ的形成。Claudin有两个细胞外环与毗邻血管内皮细胞上的Claudin相连，维持TJ的紧密性[12]。Claudin3、5和12已被确定存在于BBB血管内皮细胞上[13]。Claudin1也被证实存在于脑组织中，但是在体外与体内评估以及物种评价中存在差异性，目前仍有争议[14]。有证据表明Claudin5特异性地涉及BBB小分子旁细胞通透性的活性调节。目前发现，上调Claudin5表达的药物能增加跨血管内皮细胞电阻，并减少BBB通透性[15]。此外，缺乏Claudin5基因的大鼠显示出BBB完整性的缺损，能增加相对分子质量小于800的大分子的脑摄取。
本研究发现SAH24h各脑区伊文氏蓝明显外渗，脑水肿明显，而与此同时，Claudin5的表达亦显著降低。这些现象说明SAH抑制Claudin5表达，使其丧失调节活性，从而导致TJ复合体装配紊乱，促使旁细胞通透性增加[16]。与此同时，JNK的表达则显著升高，说明SAH引起脑组织广泛的应激反应，从而激活数个细胞内信号转导通路，经过一系列连锁反应使JNK磷酸化而激活[17-18]，从而抑制了Claudin5的转录和翻译，Claudin5合成和降解之间的动态平衡被打破，从而破坏TJ复合体的完整性，导致BBB通透性增加，促使脑水肿的发生和发展。
JNK抑制剂SP600125是一种强效的ATP竞争性抑制剂，具有可逆性、选择性以及细胞渗透性。本研究发现，SAH和SAH+DMSO组在SAH诱导后24h各脑区伊文氏蓝明显外渗，脑水肿明显，并出现脑组织结构破坏及神经元损伤。而SP600125则能逆转上述过程，抑制JNK磷酸化，解除其对Claudin5表达的负性调节作用，恢复TJ的正常装配过程，维持BBB结构和功能的完整性。因而SP600125能有效缓解SAH后脑水肿的发生和发展，为SAHEBI的诊断和治疗提供新的靶点。
综上所述，SAH激活JNK信号转导通路，并通过负性调节Claudin5的表达，破坏BBB结构和功能的完整性，促使脑水肿的发生和发展，出现脑组织结构破坏及神经元损伤，导致EBI，而JNK抑制剂SP600125则能在一定程度上逆转上述过程。
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