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免疫PCR是一种十分强大的免疫检测方法，它结合了ELISA的特异性和PCR的信号放大功能。由于ELISA需要使用抗体，因此适用于各类蛋白，但其灵敏度不够高，无法检测低丰度分析物。虽然实时PCR可以让信号呈指数放大，但却不能直接用于抗原检测。免疫PCR需要使用与寡核苷酸偶联的抗体，这种偶联物可以充当免疫反应和DNA扩增之间的桥梁。
图1.夹心免疫PCR检测示意图。将捕获抗体固定在微量滴定板表面，用于结合目标分析物。随后，捕获抗体与寡核苷酸偶联的二抗结合。通过实时PCR扩增并检测DNA。
与ELISA相比，免疫PCR有诸多优势：
图2.偶联过程示意图。
上图（图3）绘制了PCR循环次数与含PCR探针的SYBRGreen在特定抗原浓度下产生的荧光强度的关系。下图（图3）显示了抗原用量与循环次数之间的关系数据，便于计算标准曲线。结果表明，检测使用的捕获抗体和检测抗体分别比等效的ELISA少1000倍和100倍，但灵敏度却提高了1000倍。
THE END