特定探针之艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒
活性氧(ReactiveOxygenSpecies,ROS)是细胞代谢过程中产生的一系列含氧物质，包括超氧化物、过氧化氢、羟自由基以及具有高氧化活性的活性氧代谢产物，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。其中，细胞内活性氧的升高是细胞凋亡的标志之一。活性氧主要由中性粒细胞、巨噬细胞、单核细胞为代表的免疫细胞受到刺激后产生，其它体细胞在应激条件下线粒体电子传递异常也会产生活性氧。免疫细胞产生的活性氧能够抵御微生物的感染。在病理条件下，过度产生的活性氧也会导致机体损伤和引发各种疾病。活性氧(ROS)参与许多退行性神经系统病症，如阿兹海默症、帕金森症、萎缩性脊髓侧索硬化以及年老或外伤导致的脑功能紊乱等。此外活性氧是植物体内正常代谢的信号小分子，在植物的生长发育和抗逆反应中具有重要作用。
艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒也可以用于评估抗氧化剂对自由基的影响。该试剂盒的检测灵敏度极限为10pMDCF和H2O2分别为40nM。每个试剂盒提供足够的试剂，最多可进行96次分析，包括标准曲线和未知样品。
艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒组分：
1.底漆试剂（234701）：一管250μL溶液。
2.稳定溶液（10X）（234702）：一管1.5mL溶液。
3.催化剂（250X）（234703）：一管20μL溶液。
4.DCFDiOxyQ（234704）：一个50μL琥珀色甲醇溶液管。
5.DCF标准品（234202）：一个100μL琥珀色管，含有1mMDMSO溶液。
6.过氧化氢（234102）：一个100μL琥珀色管，装有8.821M溶液。
检测原理：
该试剂盒是一种用于测量游离ROS/RNS总量的体外测定试剂盒自由基活性。用催化剂将未知的ROS或RNS样品或标准加入到井中这有助于加速氧化反应。短暂孵育后，制备的DCFH探针添加到所有孔中，并允许氧化反应进行。测量样品对过氧化氢或DCF标准进行荧光测定。在96孔中进行测定可以在标准荧光板读取器上读取的荧光板格式。自由基通过与预定的DCF或氢进行比较来确定未知样品中的含量过氧化物标准曲线。
1.STA-330：OxiSelectTBARS测定试剂盒（MDA定量）
2.STA-340：OxiSelect超氧化物歧化酶活性测定
3.STA-341：OxiSelect过氧化氢酶活性测定试剂盒
4.STA-342：OxiSelect细胞内ROS测定试剂盒（绿色荧光）
1.BassDA，ParceJW，DechateletLR，SzejdaP，SeedsMC，ThomasM.流式细胞术研究
中性粒细胞氧化产物的形成：对膜刺激的分级反应。J免疫；
2.BrandtR，KestonAS。二乙酰二氯荧光素的合成；
3.KestonAS，BrandtR.超微量过氧化氢的荧光分析。
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高度灵敏狗C-反应蛋白（CRP）ELISA试剂盒研究方案
C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）是指在机体受到感染或组织损伤时血浆中一些急剧上升的蛋白质（急性蛋白）。CRP可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤、坏死、凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。
C-反应蛋白并不适用于单一疾病的诊断。它的临床价值主要在于组织损伤的筛检和监测，应用在判断病人是否发炎以及诊断发炎性疾病复发的可能性，藉以评估抗发炎药物治疗的成效。另外C-反应蛋白可用来协助类风湿性关节炎的诊断。
以狗高灵敏度CRP酶联免疫吸附试验为例分析：
预期用途：
狗高灵敏C-反应蛋白（CRP）ELISA试剂盒是一种高灵敏的双位点酶联免疫测定（ELISA）定量测定犬生物样品中的C-反应蛋白（CRP）。仅供研究使用。
引言
急性期蛋白是血浆蛋白，在感染、炎症或创伤后浓度增加。1930年，Tillet和Frances在人类中发现了第一个被识别的急性期蛋白。这个CRP是如此因为其能够影响肺炎链球菌的体细胞C-多糖的沉淀而命名。CRP是一种α-球蛋白，质量为110000至140000道尔顿，由五个相同的亚基组成，它们非共价组装成环状五聚体。它在肝脏中合成，在人体中通常以微量形式存在血清成分低于0.3mg/dL。急性组织损伤和下降后，血清水平迅速升高一旦刺激被去除，就会非常迅速。有人提出CRP的功能是帮助补充激活，影响吞噬细胞功能，并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的调查多年来已经表明，血浆或血清中CRP的定量可以在检测中提供有价值的信息，不仅在人类中，而且在伴侣动物和农场畜群中，疾病的诊断、预后和监测。
狗高灵敏C-反应蛋白（CRP）ELISA试剂盒原则：
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该测定中样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。之后通过洗涤去除未结合的蛋白质，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗-CRP抗体。该HRP缀合的抗体与先前结合的CRP形成复合物。在另一洗涤步骤之后
注意事项：
1.开始化验前仔细阅读说明书。
2.本试剂盒仅供研究使用。
3.在某些情况下由于高水平的干扰因素，可能会获得不寻常的结果。
4.防腐剂
阳性对照含有0.1%叠-氮-化钠。
5.不需要任何添加剂或防腐剂来保持试样的完整性。避免叠-氮-化物污染。
6.浓度高于0.1%的叠-氮和硫-柳-汞-抑-制-酶反应。
7.其他注意事项：
-不要互换不同批次的套件组件。
-不要使用过期的套件组件。
-保护试剂免受阳光直射。
-不要用嘴吸移。
-不要在使用试剂的地方食用、饮用、吸烟或涂抹化妆品。
-使用手套避免与试剂接触。
-停止溶液含有稀硫酸。可能会刺激眼睛和皮肤。之后用水冲洗
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三棕榈酰甘油化学性质：
中文名：三棕榈酸甘油酯
外文名：Glyceryltripalmitate
别名：软脂；三软脂酸甘油酯
化学式：C51H98O6
分子量：807.3202
熔点：66℃
沸点：759.83℃
水溶性：不溶于水
密度：0.916g/cm3
外观：白色无臭固体
闪点：286.06℃
应用：用于制肥皂，调制药用油膏等。
折射率：1.43807
三棕榈酸甘油酯是一种单纯的饱和甘油酯。它主要以固态形式存在于棕榈和椰子油中。它占棕榈油的1-11%，具有很高的熔点。
三棕榈酸甘油酯性质与稳定性：
1.要避免的物料：氧化物。
2.要分解的产品：一氧化碳和二氧化碳。
存在于许多动植物油脂中。可由棕榈油、椰子油等分离获得。
用于制肥皂，调制药用油膏等。
艾美捷1,2,3-三棕榈酰甘油基本参数：
CAS编号：555-44-2
同义词：十六酸甘油酯、甘油三棕榈酸酯、甘油三棕榈酸酯、TG（16:0/16:0/16:0）、十六烷酰甘油
纯度：≥85%
配方：结晶固体
溶解性：三丨氯丨甲丨烷：1mg/ml
存储：-20℃
稳定性：≥4年
1.Lísa，M.和Holapek，M.使用高效液相色谱-常压化学电离质谱法对食品工业、饮食和化妆品中重要的植物油中的三酰基甘油进行分析。J、色谱仪。A1198-1199115-130（2008）。
2.Moffitt，J.H.，Fielding，B.A.，Evershed，R.等人。β细胞中三棕榈素的不良物理化学性质导致体外形态学变化和脂肪毒性。糖尿病学48（9），1819-1829（2005）。
3.Han，X.，Abendschein，D.R.，Kelley，J.G.等人。糖尿病导致大鼠心肌中特定脂质分子种类的变化。《生物化学杂志》352（Pt.1），79-89（2000）。
4.Reddy，L.H.，Sharma，R.K.，Chuttani，K.等人。依托泊苷结合了具有不同表面电荷的三棕榈素纳米颗粒：制剂、表征、放射性标记和生物分布研究。AAPSJ.6（3），e23（2004）。
5.Johnson，W.，Jr.和Panel，C.I.R.E.关于三氢芥、三唑菌素、三唑霉素、三鲁菌素、三庚烷醇、三硬脂酸甘油、三十一烷醇、，三乙酰蓖麻油酸甘油酯和硬脂酸甘油酯二乙酸酯等等。国际毒理学杂志。20（增刊4），61-94（2001）。
用户指南丨艾美捷总5-mCRNA甲基化定量分析试剂盒
背景资料：
总5-mCRNA甲基化定量分析试剂盒的原理和步骤：
该试剂盒包含所有用于定量5-mCRNA甲基化的试剂。在测定中，RNA结合到经过特殊处理以具有高核酸亲和力的条带孔上。使用捕获和检测抗体检测RNA中的5mC，然后通过在微孔板分光光度计中读取荧光进行荧光定量。5-mCRNA的百分比与测得的荧光强度成正比。
总5-mCRNA甲基化定量分析试剂盒用户指南：
用途：MethylFlash5-mCRNA甲基化ELISA简易试剂盒（荧光法）适用于使用从任何物种分离的总RNA检测全球5-mCRNA甲基化水平，包括各种形式的哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒，包括但不限于培养的细胞、新鲜和冷冻组织、血浆/血清样本和体液样本等。
输入RNA：每次测定的RNA量可以为50至300ng。对于最理想的定量，输入的RNA量应为200纳克，因为RNA中的5-mC因组织而异，可能更少在某些物种中占总RNA的0.1%以上。
起始材料：起始材料可以包括各种组织或细胞样本，例如培养的细胞、新鲜和冷冻组织、血浆/血清样品、体液样品，等。
内部对照：本试剂盒中提供了阴性和阳性RNA对照。标准曲线可以进行（范围：0.05%至2%）。由于RNA中的全局5-mC可因组织而异，从正常和患病状态，建议运行重复样本，以确保信号生成的验证。该试剂盒将允许用户量化RNA中5-mC的绝对量确定两个不同RNA样品的相对5-mC状态。
注意事项：为避免交叉污染，请小心地将样品或溶液移到带状孔中。使用气溶胶屏障移液管吸头，并始终在液体转移之间更换移液管的吸头。穿在整个过程中戴手套。如果手套与样品接触，更换手套立即。
艾美捷MethylFlash总5-mCRNA甲基化定量分析试剂盒原则和程序：
图1：最佳标准曲线示例用5-mC标准对照产生。
蛋白激酶抑制剂丨艾美捷星形孢菌素Staurosporine
星形孢菌素Staurosporine（抗生素AM-2282或STS）是一种天然产物，最初于1977年从细菌Streptomycesstaurosporeus中分离出来。星形孢菌素具有从抗真菌到抗高血压的生物活性。对这些生物活性的兴趣导致了化学和生物学方面的大量研究工作以及抗癌治疗潜力的发现。
艾美捷星形孢菌素Staurosporine生物活性：
星形孢菌素的主要生物活性是通过预防ATP与激酶的结合来抑制蛋白激酶。这是通过星形孢菌素对激酶上的ATP结合位点的更强亲和力来实现的。Staurosporine是一种典型的ATP竞争性激酶抑制剂，因为它以高亲和力结合许多激酶，但选择性很小。激酶袋的结构分析表明，在与星形孢菌素相对位置保守的主链原子有助于星形孢菌素的杂乱。这种缺乏特异性已经排除了其临床应用，但使其成为一种有价值的研究工具。在研究中，星形孢菌素用于诱导细胞凋亡。它如何调解这种机制尚不清楚。已经发现，星形孢菌素诱导细胞凋亡的一种方法是通过激活胱天蛋白酶-3。在较低浓度下，根据细胞类型，星形孢菌素诱导特定的细胞周期效应，阻止细胞在细胞周期的G1期或G2期。
Camptothecin
PropidiumIodideStain
AnnexinV-FITCApoptosisAssayKit
Nigericin
RecombinantMouseIL-1alpha
RecombinantHumanIL-8
NIR-FLIVO690FreeDyeControlAssay
Antibody-SandwichELISADevelopmentKit
ELISAPlateSealingCovers
MonsterBlockELISABlockingBuffer
CathepsinB/D
星形孢菌素Staurosporine有关文献参考：
1OmuraS,IwaiY,HiranoA,NakagawaA,AwayaJ,TsuchiyaH,TakahashiY,MasumaR(1977)."AnewalkaloidAM-2282ofStreptomycesorigintaxonomy,fermentation,isolationandpreliminarycharacterization".J.Antibiot.30(4):275–282.
2FunatoN,TakayanagiH,KondaY,TodaY,HarigayaY,OmuraS(1994)."AbsoluteconfigurationofstaurosporinebyX-rayanalysis".TetrahedronLett.35(8):1251–1254.doi:10.1016/0040-4039(94)88036-0.
3RüeggUT,BurgessGM.(1989)Staurosporine,K-252andUCN-01:potentbutnonspecificinhibitorsofproteinkinases.TrendsinPharmacologicalScience10(6):218-220.
植物抗癌药物喜树碱丨艾美捷喜树碱功能研究
喜树碱是一种植物抗癌药物，化学式为C20H16N2O4，浅黄色针状结晶。从中国中南、西南分布的喜树中提取得到。1976年中国化学家高怡生等合成消旋喜树碱成功。喜树碱对肠胃道和头颈部癌等有较好的疗效，但对少数病人有尿血的副作用。10-羟基喜树碱的抗癌活性超过喜树碱，对肝癌和头颈部癌也有明显疗效，而且副作用较少。
喜树碱是从珙桐科落叶植物喜树的种子或根皮中提出的一种生物碱，能直接破坏DNA结构与DNA结合而使DNA易受内切酶的攻击，同时抑制DNA聚合酶而影响DNA的复制，主要对增殖细胞敏感，为细胞周期特异性药物，作用于S期，对G1、G2与M期细胞有轻微的杀伤力。对多种动物肿瘤有抑制作用，与常用抗肿瘤药无交叉耐药性，与甘草酸单胺盐合用，能降低毒性而不降低疗效。外用治疗银屑病的机制是能抑制分裂较快角质形成细胞的有丝分裂，使增生的棘细胞层变薄，角化不全消失，颗粒层恢复形成而达到治疗作用。
喜树碱物化性质：
中文名：喜树碱
外文名：Camptothecin
别名：(+)-喜树碱
化学式：C20H16N2O4
分子量：348.34
熔点：260°C(dec.)(lit.)
沸点：757.0±60.0°Cat760mmHg
水溶性：极难溶于水
外观：浅黄色针状结晶
闪点：411.6±32.9°C
应用：抗癌药
喜树碱理化性质：
淡黄色针状结晶。熔点264～267℃，[α]D20+31.3°(氯-仿∶甲醇=1∶2)。不溶于水，溶于氯仿、甲醇、乙醇中。其溶液在紫外光灯下显紫蓝色荧光，见光易变质，微有吸湿性，遇浓硫酸显黄绿色，用蒸馏水稀释产生黄绿色荧光，呈碱性。与碘化铋钾反应，生成橙红色复盐沉淀。由喜树根或果粉以有机溶剂提取而得。毒性较大，提取时应小心，有抗肿瘤活性。用以治疗肠癌、直肠癌、胃癌和白血病等症，10-羟基喜树碱毒性较小。
合成方法：
本品是由珙桐科旱莲属植物喜树的根、皮、果实提取制得的生物碱。也可合成生产。将喜树果粗粉用10倍量80%乙醇浸泡24小时，收集渗漉液，减压浓缩回收乙醇。浓缩液静置取清液，用氯仿提取，提取液蒸馏回收氯仿至干，再加甲醇溶液，冷却过滤，滤饼为喜树碱粗品，粗品用甲醇-氯仿混合溶剂重结晶，得喜树碱。对生药喜树果汁，总收率0.03-0.04%.
艾美捷喜树碱(Camptothecin)基本操作：
1、将喜树碱粉末溶解在组织培养级DMSO中，以获得2mg/mL喜树碱储备浓度。
2、制备50–100μL的DMSO增溶喜树碱等分试样，并将其冷冻保存在<-20°C。一瓶冷冻的喜树碱可在丢弃前再解冻2次。应标记已解冻1X的小瓶，以表明这一点，以便它们在丢弃前只经过一次解冻。
3、喜树碱浓度范围为2–4μg/mL的刺突细胞培养物，产生6–12μM的细胞培养物喜树碱浓度。该喜树碱浓度范围适用于诱导Jurkat或HL60细胞悬浮液，其浓度范围通常为1x105–1x106细胞/mL。在此浓度范围内，培养4小时（37°C）后成功诱导凋亡。
FAM-FLICACaspase-1(YVAD)AssayKit
Pyroptosis/Caspase-1Assay,Green
FLICA660Caspase-1AssayKit
FAMFLICACaspase-1(WEHD)AssayKit
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艾美捷AdvancedTargetingSystems丨抗-CD105-SAP说明
靶向SAP缀合物是一种功能强大的特异性损伤剂，用于分子技术外科手术核糖体失活蛋白saporin（来自植物皂荚）是结合到靶向剂（任何在细胞表面识别并内化的物质）。目标将缀合物给予细胞（体外或体内）。靶向剂在细胞表面。缀合物被内化，saporin脱离靶向剂，并使导致蛋白质抑制并最终导致细胞死亡的核糖体。没有细胞表面的细胞标记不受影响。
CD105也被称为Endoglin，它调节细胞对TGF-的反应，参与血管发展和重塑。它是一种I型整合膜同二聚体蛋白，其亚基为90kD血管内皮细胞、骨髓基质细胞和造血干/祖细胞。CD105是基质成纤维细胞弱表达。它也在活化的单核细胞和组织巨噬细胞上表达。在经历血管生成的组织中，CD105在活化内皮上的表达增加，例如在或者在伤口愈合或皮肤炎症的情况下。CD105是TGF-β受体的组成部分β1和β3，但不结合转化为TGF-β2。
AdvancedTargetingSystems艾美捷抗-CD105-SAP特异性和制备：
这种靶向毒素识别表达人CD105（Endoglin）的细胞。Anti-CD105-SAP是一种结合小鼠单克隆抗体与人CD105的缀合物和二级缀合物StreptavidinZAP（IT-27）含有核糖体失活蛋白saporin。
抗-CD105-SAP消除了表达人CD105（Endoglin）的细胞。所有其他单元格保持不变。材料可能有很多不同；工作稀释度必须由最终用户确定。如果是一个新的批次，您必须在开始完整的实验方案之前评估适当的工作稀释度。使用前轻轻旋转材料；5-10秒的缩微胶片就足够了。将材料储存在-20°C下未稀释的等分试样。材料应按方便的体积和数量进行等分，以避免反复冷冻和解冻可能会损害蛋白质含量。在这些条件下，材料具有非常稳定的保质期。解冻应在室温或冰上进行。解冻的溶液应在使用前保持在冰上。
请勿将还原剂（如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇或抗坏血酸）用于此材料。它将使毒素失活。这种物质是一种极强的细胞毒素。应由经验丰富的人员进行搬运。手套和处理本产品时需要佩戴安全眼镜。处置时必须小心；高压灭菌或暴露至0.2M氢氧化钠将使材料失活。所有与此材料接触的实验室用品应同样处理。
AdvancedTargetingSystems/ATSbio艾美捷抗-CD105-SAP文献参考：
1.LundK,OlsenCE,WongJJW,OlsenPA,SolbergNT,HgsetA,KraussS,SelboPK.(2017)5-Fu
ResistantEmt-LikePancreaticCancerCellsAreHypersensitivetoPhotochemicalInternalizationofthe
NovelEndoglin-TargetingImmunotoxinCd105-Saporin.JExpClinCancerRes36(1):187.
安全性：
必须采用良好的实验室技术来安全处理本品。需要遵守以下惯例：
1.穿戴适当的实验室服装，包括实验室外套、手套和安全眼镜。
2.不要用嘴吸吮、吸入、摄入或让产品接触开放性伤口。洗彻底清洁身体与产品接触的任何部位。
3.与任何注射一起操作时，应格外小心，避免意外自动注射装置
4.本品仅供合格人员研究使用。不适用于人类或作为诊断试剂。
AdvancedTargetingSystems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素，神经生物学研究方面的抗体/蛋白，靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
艾美捷AdvancedTargetingSystems丨CCK-SAP说明书
AdvancedTargetingSystems/ATSbio艾美捷CCK-SAP使用和储存：
CCK-SAP专门消除识别CCKRecector的细胞。所有其他单元格保持不变。不适合逆行运输。材料可能有很多不同；工作稀释度必须为由最终用户确定。如果这是一个新的批次，您必须在开始完整的实验方案。
使用前轻轻旋转材料；5-10秒的缩微胶片就足够了。存储在-20°C条件下，将未稀释等分试样中的材料保存1-2个月。为了长期储存，将材料储存在–80°C。应将材料等分至合适的体积和数量，以避免重复冻结和解冻会损害蛋白质含量。在这些条件下，该材料具有非常稳定的保质期。解冻应在室温或冰上进行。解冻的溶液在使用前应保持在冰上。请勿将还原剂（如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇或抗坏血酸）用于此材料。它将使毒素失活。
这种物质是一种极强的细胞毒素。应由经验丰富的人员进行搬运。手套和处理本品时需要佩戴安全眼镜。处置时必须小心；高压灭菌或暴露至0.2M氢氧化钠将使材料失活。所有与此材料接触的实验室用品应同样处理。
图：用胆囊收缩素A转染的KNRK细胞受体（CCKAR）以2500个细胞/90μl/孔，并孵育过夜。CCK-SAP、空白SAP和Saporin添加到10μl体积，培养板72小时。使用以下溶液制备板：XTT/PMS并在450nm下读取。细胞毒性为通过比较处理后的井读数进行分析井与对照井的井，表示为百分率存活细胞数通过细胞测量发育日期比色分子在细胞内的代谢开发试剂。进行了数据分析使用Prism软件（GraphPad，圣地亚哥）。
AdvancedTargetingSystems/ATSbio艾美捷CCK-SAP文献参考：
1.ZhangW,GardellS,ZhangD,XieJY,AgnesRS,BadghisiH,HrubyVJ,RanceN,OssipovMH,
VanderahTW,PorrecaF,LaiJ(2008)Neuropathicpainismaintainedbybrainstemneuronsco-expressingopioidandcholecystokininreceptors.Brain[EpubDec2].
2.PoreccaF,HrubyV,LaiJ(2003)TargetingTests:CCK-SAPinbindingstudies.TargetingTrends4(3):5.
AdvancedTargetingSystems/ATSbio艾美捷CCK-SAP安全性参考：
艾美捷AdvancedTargetingSystems丨蛙皮素SAP说明书
蛙皮素是一种存在于蛙皮中的14个氨基酸的肽。在瘙痒途径中检测到与人类相当的胃泌素释放肽（GRP），并在饮食行为中发挥作用。GRP调节胃肠和中枢神经系统的多种功能，包括胃肠激素的释放、平滑肌细胞收缩和上皮细胞增殖。BombesinSAP特异性靶向GRP受体阳性细胞。所有其他单元格保持不变。消除表达GPR受体的细胞有助于研究蛙皮素在瘙痒和进食行为中的作用。
AdvancedTargetingSystems艾美捷蛙皮素SAP是蛙皮素和核糖体失活蛋白saporin的化学偶联物。它特异性靶向GRP受体阳性细胞。
AdvancedTargetingSystems艾美捷蛙皮素SAP特异性和制备：
这种靶向毒素（分子量31.8kDa）靶向GRP受体阳性细胞。BombesinSAP是一家蛙皮素和核糖体失活蛋白saporin（Cat.#PR-01）的化学缀合物。
BombesinSAP特异性靶向GRP受体阳性细胞。在布料工作稀释度必须由最终用户确定。如果这是一个新批次，您必须评估在开始完整的实验方案之前进行适当的工作稀释。使用前轻轻旋转材料；5-10秒的缩微胶片就足够了。将材料储存在未稀释的等分试样在-20°C下保存1-2个月。为了长期储存，将材料储存在–80°C。布料应等分至方便的体积和数量，以避免重复冷冻和解冻损害蛋白质含量。在这些条件下，该材料具有非常稳定的保质期。解冻应该是在室温或冰上进行。解冻的溶液在使用前应保持在冰上。
图：T47D细胞，一种人上皮细胞系以2500个细胞/孔/90ul铺板孵育过夜。第二天，Saporin（PR-01）和BombesinSAP（IT-40）以10μl的体积添加剂量范围为1uM-100fM和100nM-10fM，分别地平板在37°C下孵育72小时。将XTT/PMS混合物以50μl的体积添加到每个孔中在450nm下读取板，并用Prism进行数据分析软件（GraphPad，圣地亚哥）。
文献参考：
ThemolecularbasisforIL-31productionandIL-31-mediateditchtransmission:frombiologytodrugdevelopment
KunimuraK,FukuiY(2021)ThemolecularbasisforIL-31productionandIL-31-mediateditchtransmission:frombiologytodrugdevelopment.IntImmunol33(12):731-736.doi:10.1093/intimm/dxab065
Objective:ToinvestigatethemolecularmechanismsofhowIL-31isproducedinhelperTcellsuponstimulationandtransmitstheitchsensationtothebrain.
Summary:ThisreviewhighlightsrecentfindingsthatshowthefunctionalsignificanceofendothelialPASdomain1(EPAS1)andneurokininB(NKB)intheIL-31-induceditchsensation.
Usage:NeuronsexpressingtheNppbreceptorwerespecificallyablatedbyintrathecalinjectionofNppb-SAP.TreatmentwithBombesin-SAPreducedIL-31-inducedscratching.
See:SakataDetal.SelectiveroleofneurokininBinIL-31–induceditchresponseinmice.JAllergyClinImmunol144(4):1130-1133,2019.
RelatedProducts:Bombesin-SAP(Cat.#IT-40),Nppb-SAP(Cat.#IT-69)
Aneuropeptidecodeforitch
ChenZF(2021)Aneuropeptidecodeforitch.NatRevNeurosci22(12):758-776.doi:10.1038/s41583-021-00526-9RelatedProducts:Bombesin-SAP(Cat.#IT-40)
艾美捷AdvancedTargetingSystems丨抗-6-His-SAP研究
标签靶向毒素是一种强大而特异的损伤剂，用于分子技术外科手术核糖体失活蛋白saporin（来自植物皂荚）是结合到靶向剂，该靶向剂识别表达6His标记的蛋白质的YOUR细胞。一旦缀合物被内化，saporin脱离靶向剂，并使核糖体失活导致蛋白质抑制，最终导致细胞死亡。没有细胞表面标记的细胞影响多组氨酸标签的使用已成为蛋白质纯化的一种流行方法，常用于筛选过程作为您感兴趣的蛋白质或肽的标签。这种多组氨酸表位标签通常是由位于N端、C端或内部的六个连续组氨酸氨基酸残基组成。
6-His-Tag由于其与附着于琼脂糖凝胶的镍或钴金属离子结合的亲和力而被广泛使用，
其然后可用于纯化天然或变性状态的蛋白质。
多组氨酸标签的使用已成为蛋白质纯化的一种流行方法，通常在筛选过程中用作您感兴趣的蛋白质或肽的标签。这种多组氨酸表位标签通常由位于N端、C端或内部的六个连续组氨酸氨基酸残基组成。6-His-Tag由于其与附着在琼脂糖凝胶上的镍或钴金属离子结合的亲和力而被广泛使用，随后可用于纯化天然或变性状态的蛋白质。
AdvancedTargetingSystems艾美捷抗-6-His-SAP是小鼠抗6His单克隆抗体和核糖体失活蛋白saporin的化学偶联物。它特别消除了细胞外表达6His标记蛋白的细胞和识别YOUR6His标签重组蛋白的细胞。
AdvancedTargetingSystems艾美捷抗-6-His-SAP特异性和制备：
这种标记靶向毒素识别细胞中过度表达的YOUR6His标记重组蛋白或6His标签蛋白。抗-6-His-SAP是小鼠抗6His单克隆抗体的化学偶联物核糖体失活蛋白，saporin。
抗6HisSAP特异性地消除具有6His标记蛋白和细胞胞外表达的细胞识别YOUR6His标记的重组蛋白。材料可能有很多不同；工作稀释度必须由最终用户确定。如果这是一个新的批次，您必须评估在开始完整的实验方案之前进行工作稀释。使用前轻轻旋转材料；5-10秒的缩微胶片就足够了。将材料储存在未稀释的等分试样在-20°C下保存1-2个月。为了长期储存，将材料储存在–80°C。布料应等分至方便的体积和数量，以避免重复冷冻和解冻损害蛋白质含量。在这些条件下，该材料具有非常稳定的保质期。解冻应该是在室温或冰上进行。解冻的溶液在使用前应保持在冰上。
注：当用于细胞毒性试验时，未结合的一级抗体将与一级抗体竞争与抗-6His-ZAP结合，并可通过竞争性抑制初级抗体-次级缀合物复合物来降低细胞毒性。
图：KNRK细胞以2500个细胞/90μl/孔接种在37°C下孵育过夜。第二天，Saporin和rIB4-在细胞培养基中进行SAP稀释，并加入10μl每个井。rIB4-6His在细胞培养基中稀释最终浓度为100ng/10μlAnti-6HisZAP，向每个孔中加入10μl。盘子在37°C下孵育72小时。为了发展，培养基是从平板上取下，用10%固定细胞TCA在4°C下持续1小时。用自来水并风干。50μl0.4%向每个孔中加入磺胺若丹明B/1%乙酸并在室温下孵育板30分钟。这个用1%乙酸洗涤板3次以风干。用100μl10mM溶解染料每孔无缓冲tris基底，轻轻摇动5分钟。在564nm下读取板，并进行数据分析使用Prism软件（GraphPad，圣地亚哥）
AdvancedTargetingSystemsZAP试剂盒和二级标记方案：
ZAP抗体内化试剂盒文献
生物素-Z（链霉亲和素ZAP）文献
ZAP抗体内化试剂盒和生物素-Z（StreptavidinZAP）视频教程