产品名称：血清高密度脂蛋白（HDLC）生化检测试剂盒
规格：100管/96样50管/48样
货号:EY-01S1199
测试方法:微量法可见分光光度法
分类：脂肪酸代谢系列
商品详情：
测定意义
高密度脂蛋白为血清蛋白之一，主要由肝脏合成，运载周围组织中的，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子，俗称“血管清道夫"，对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。
测定原理
用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白，利用酯酶催化酯水解生成游离和游离脂肪酸，从而把酯转化为FC；进一步利用氧化酶催化FC氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基和酚，生成红色醌类化合物；在500nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品
离心机，恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
粗酶液提取：
1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。
3、血清等液体：直接测定。
ADH测定操作：
1.分光光度计预热30min，调节波长到340nm，蒸馏水调零。
2.试剂三在25℃水浴中保温30min。
3.在1mL石英比色皿中依次加入100μL样本上清液、800μL试剂三和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A测定管=A1-A2。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、将试剂二在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min以上。
3、操作表：
试剂名称（μL）
测定孔
样本
20
试剂二
760
试剂三
10
试剂四
将上述试剂按顺序加入1mL石英比色皿中，混匀后立即在340nm波长下记录初始吸光度A1和反应1min后的吸光度A2，计算ΔA=A1-A2。
注意：若A1-A2大于0.5，需将样本用提取液稀释，使A1-A2小于0.5，可提高检测灵敏度。计算公式中乘以相应稀释倍数。
NAD-MDH活力单位的计算：
1、血清（浆）NAD-MDH活力的计算
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟消耗1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH（nmol/min/mL）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=6430×ΔA
2、组织、细菌或细胞中NAD-MDH活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟消耗1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH（nmol/min/mgprot）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr)÷T=6430×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟消耗1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH（nmol/min/g鲜重）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷（W×V样÷V样总）÷T=6430×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟消耗1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH（nmol/min/104cell）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷（2000×V样÷V样总）÷T=3.215×ΔA
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