基因组编码是通过基因工程来理解和增强生物体基因组功能的有力工具。全基因组编码已被证明可以调节细菌中的非标准氨基酸、生物防护和病毒耐药性。
在原核生物中,通过用TAA取代TAG终止密码子和删除RF1因子,首次建立了基因编码。通过用同义密码子替换两个同义密码子,删除相应的转移RNA(tRNA)进行编码在大肠杆菌中实现了全基因组编码。随后,基因组编码也被扩展到酵母基因组,但在人类基因组中的应用迄今尚未见报道。
人类编码也是GP-write的试点项目,该项目的目的是将人类基因组计划的“阅读”目标进化为“书写”下一代基因组。
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研究思路
结论:
通过将终止密码子TAG转化为TAA,将内源性真核释放因子1(eRF1因子1(eRF1)来产生抗病毒细胞系;
首次将33个必需基因的TAG转化为TAA,并检查全基因组碱基编辑情况(观察必要基因外显子中的~40c-t脱靶事件,证明了在哺乳动物细胞中进行编码和高度多重编辑的可行性。
文中使用SBI品牌SuperpiggyBacTransposaseexpressionvector构建CBE稳转细胞株.
货号
名称
简介
PiggyBac转座系统
SuperpiggyBacTransposaseexpressionvector(replacesPB200A-1)
表达转座酶,需要和任意转载子载体搭配使用
ExcisiononlypiggyBacTransposaseexpressionvector
实现转座插入的去除
PB-CMV-MCS-EF1-PurocDNAcloningandexpressionvector
PiggyBac克隆表达载体
PB-CMV-MCS-EF1-GFPcDNAcloningandexpressionvector
PB-EF1-MCS-IRES-GFPcDNAcloningandexpressionvector
PB-MSCV-MCS-EF1-GreenPurocDNACloningandExpressionVector