实验步骤基本方案12.为检验细胞纯度,可加入终浓度为lOug/ml的抗CD3-FITC和PK136-PE(抗NK1.1)抗体,进行流式分析(第四章)。展
基本方案1小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠,洁净环境中饲养(最好置层流柜中饲养)73%(m/V)豚蛋白胨或者3%(WVr)Brewer硫基乙酸盐肉汤(Brewerthioglycollatemedium,分离炎性腹腔巨嗤细胞用)7
实验概要小鼠胰岛分离与纯化实验步骤一、准备工作:1、小鼠:小鼠应该毛色光滑,并根据实验需要选择合适的性别及年龄。2、准备试剂:Hanks液、P型酶(Roche)、FBS、1640培养基(含7mMglucose10%FBS)3、准备器具:眼科剪1把,眼科镊(直)2把,动脉止血夹(75px)
实验材料任意品系小鼠6~8周试剂、试剂盒冷的0.1molLKClPBS抗原完全和不完全弗氏佐剂仪器、耗材组织研磨机22-G注射针头带塞的3ml注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1.将含10~50μg目的蛋白抗原的蛋白质混合物上样于适当的SDS
根据本周《自然》在线发表的一篇论文Female-biasedembryonicdeathfrominflammationinducedbygenomicinstability,睾酮或能预防炎症的有害影响,提高雄性小鼠胚胎的存活率。给怀孕小鼠注射布洛芬能够复制睾酮的这种保护作用,不
自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞,国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、兔、猪、牛、绵羊、山羊、水貂、恒河猴、美洲长尾猴以及人类都分离获得了ES细胞,而且已经证明小鼠ES细胞可以分化为心肌细胞、造血细胞、卵黄囊细胞、骨髓细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、内皮细
体外分化方法第1步:ES培养基在LIF存在的条件下维持细胞培养第2步:EB培养基使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。1、分散纯化细胞(参见上面的细胞传代部分)2、纯化2小时后将细胞转入含有ES培养基的50mlFalcon管中,计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。3、用2ml
1、一般培养:保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代2、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol,
实验概要本研究利用线粒体功能高度被抑制的体外胚胎模型,直接研究线粒体功能损伤对着床前后胚胎以及胎盘发育的影响。实验步骤1.胚胎培养基用含4mg/mlBSA的MOPS-G1工作液收集受精卵。胚胎培养液分对照组培养液与试验组培养液(G1.2/G2.2,注:G1.2为对照组培养液;G2.2为试验组
实验概要分离小鼠室管膜下区主要试剂DPBS主要设备6cm细胞培养皿、医用镊、外科手术剪、不锈钢尖头医用镊、外科手术刀、体视显微镜实验材料小鼠:实验所选取的小鼠年龄大小由实验目的决定。如果需要胎鼠神经干细胞,一般选择E13.5d或E14.5d的胎鼠,其细胞增殖能力强,取材可取全脑;如果需要成体神
实验方法原理将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料孕鼠试剂、试剂盒PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离心管手术
实验步骤2.3小鼠胚胎饲养细胞(MEF)的制备最广泛地用于支持hES的伺养层细胞来自小鼠胚胎[丁]^〇1113〇1161&1,,1998;Reu-binoffetal.,2000],如小鼠胚胎饲养细胞(MEFs),尽管它们可能是最原始的间叶细胞的前体细胞
实验方法原理将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料孕鼠试剂、试剂盒PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞传代培养主要试剂0.05%Trypsin、细胞基础培养液、DPBS主要设备100mm培养皿、15mL离心管、倒置显微镜实验步骤(1)预先37℃温热细胞基础培养液及0.05%Trypsin。(2)用枪头吸弃培养皿中的培养液,并用DPBS冲洗一遍,然后加入2mL0.05
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养主要试剂75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、细胞基础培养液主要设备35mm培养皿、60mm培养皿、100mm培养皿、15mL离心管、50mL离心管、冻存管、眼科剪、眼科弯镊、离心机实验材料怀孕13.5天【将成年雌、雄小鼠放在同笼中饲养
实验概要胚胎学实验中需要应用到很多试剂,其中一部分需要实验人员来配制。本Protocol的目的是告知胚胎学实验中常规的试剂配制注意事项。实验步骤1.每次配液应该使用Sigma公司的商品水,配液前要检测水的PH值。2.配液时使用表格将每项药品的名称、用量对齐,纸制文件塑封,放在配液者可清晰
分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是
实验方法原理实验材料任意品系小鼠(6~8周)试剂、试剂盒PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材22-G注射针头带塞的3ml注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1.准备等体积PBS含25~100μg抗原和弗氏完全佐剂的乳化液(200~40
实验概要精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞,用于体外培养。资料表明,从成年啮齿类的睾丸分离粗线
实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS:NaCl8g/LKCl400mg/LKH2PO460mg/L无水Na2PO447.86mg/L无水葡萄糖1000mg/LNaHCO3350mg/L实验
【摘要】目的探讨小鼠精原细胞的分离纯化。方法用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。结果所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布