该实验在大鼠慢性应激模型中应用极为广泛,大鼠慢性不可预知性应激模型的建立者Katz和大鼠慢性温和应激模型的建立者Willner分别于1982年和1987年采用糖水实验检测抑郁模型动物是否出现快感缺失症状。此外,该实验为抗抑郁药起效速率研究的主要行为学检测方法之一。
实验材料
糖水偏好测试仪采用了动物舒适且熟悉的居住饲养笼(homecage),如下图示,饲养笼是透明聚碳酸酯材料,一侧装备了不锈钢动物食槽,另一侧安装配置了2个不锈钢瓶嘴的饮水瓶,可轻松取下来换水和清洗,饮水瓶容量为50ml-100ml可选,标配50ml。同时,饮水瓶上标有刻度,方便实验员统计液体消耗量。靠近饮水瓶侧下方铺有不锈钢底板,动物舔水时底板与不锈钢瓶嘴通过微弱的电流形成闭合回路,可动态全程检测动物的舔水次数。
糖水偏好实验系统,XR-268型,上海欣软
糖水偏好测试仪根据用户的需求,还可以设置饮水瓶口自动门开关,增强饮水偏好选择难度。同时,可选配外部接口模块,实时与光遗传、光纤记录等第三方设备同步记录打标。
实验方法
大、小鼠糖水偏爱实验的操作方法上略有不同,对其分别进行总结如下:
(1)大鼠糖水偏爱实验:
训练期:动物应单笼饲养,进行48h的蔗糖饮水训练。前24h给予两瓶1%~2%蔗糖水,后24h,一瓶给予1%~2%蔗糖水,另一瓶给予饮用纯水(中途交换两个水瓶位置)。大鼠禁食禁水14~23h后,进行糖水偏爱指数的测定:测定1h内大鼠对两瓶水的饮用量(g)。
(2)小鼠糖水偏爱实验:
操作流程同大鼠。但在48h饮水训练时,应全程给予1%~2%蔗糖水和饮用水(中途交换两个水瓶位置)。训练期结束后,禁水(不禁食)9~16h,测定8~15h内(中间宜交换两瓶位置1次)小鼠对两瓶水的饮用量(g)。
评价指标
应采用蔗糖偏嗜度(sucrosepreference)作为评价指标,蔗糖偏嗜度(%)=蔗糖水饮用量/(蔗糖水饮用量+饮用水饮用量)×100%。
抑郁行为判断标准:蔗糖偏嗜度低于0.4或者与对照组相比有显著性减低(P<0.05)。
注意事项
1、应定期交替放置两个瓶子的位置,以消除侧面或位置偏爱的可能性。
4、参靠实验前2周内动物的饮水量数据,控制好糖水的配比浓度、液体量以及实验时长。
5、在小鼠和大鼠的品系之间,在蔗糖偏爱方面也存在一些差异,比如Wistar大鼠不是特别敏感。
6、啮齿动物在蔗糖偏爱方面的可能还有性别差异,比如WistarKyoto雄性大鼠的蔗糖偏爱率低于雌性。
8、大鼠或小鼠必须处于单笼条件下(即单独的笼子中)才能进行蔗糖偏爱测试。
9、实验测试的整个周期里,选择蔗糖的品牌尽量保持一致,避免其他因素对结果造成影响。
10、评估糖水偏好测试(SPT)的实验指标优先考虑蔗糖偏嗜度(sucrosepreference),也就是蔗糖偏好比,而不是每只饮水瓶的摄入量
小tips:
①在建立抑郁模型前后均做一次该实验,效果更为明显;
②在训练过程中12h后调换蔗糖水瓶和纯水水瓶的位置,避免水瓶位置对实验的干扰
③更加重要的是在正常实验前一定要检查好水瓶是否明显漏水,以及一定要旋紧压紧瓶盖,实验周期84h。