本发明涉及生物制品和预防兽医领域，具体涉及了猫细小病毒fpvcs-2016株及应用、疫苗组合物及其制备方法。
背景技术：
技术实现思路
1、本发明提供一种国内流行的了猫细小病毒fpvcs-2016株，该毒株对猫致病性强、致死率高，可引起典型的消化道症状(腹泻、呕吐等)；该毒株经灭活后具有良好的免疫原性，作为灭活疫苗可较好的刺激机体产生针对国内流行毒株cs-2016株的高水平中和抗体，对fpv的攻击能够提供较高的免疫保护率，并利用其毒价高，来探求实现产业化生产的可能性。
2、本发明解决上述技术问题本发明提供了：
3、一种了猫细小病毒fpvcs-2016株，保藏号为cctccno:v202277。
4、进一步地，一种疫苗株，为猫杯状病毒毒株和所述的猫细小病毒毒株的组合，其中，所述猫杯状病毒毒株的命名为猫杯状病毒fcvlz-2016株，于2022年9月2日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctccno：v202276。
5、一种疫苗组合物，所述疫苗组合物含有疫苗上可接受的载体和所述的猫杯状病毒毒株、猫细小病毒毒株或其衍生病毒。
6、进一步地，所述疫苗组合物的原料包括所述病毒毒株的灭活病毒和佐剂。
7、所述疫苗组合物的制备方法，包括以下步骤：
8、步骤一、将所述的猫细小病毒fpvcs-2016株和猫杯状病毒fcvlz-2016株分别进行繁殖和培养，得到病毒原液；
9、步骤二、将步骤一所得病毒原液或其稀释液加入β-丙内酯用于灭活；
10、步骤三、灭活后的病毒液使用无菌pbs稀释，即得。
11、进一步地，步骤二中取病毒液原液或稀释液按0.1％的体积加入β-丙内酯，混合均匀后于4℃灭活24h，再37℃水解2h。
12、进一步地，步骤三中灭活后的猫细小病毒fpvcs-2016株和猫杯状病毒fcvlz-2016株病毒液分别使用无菌pbs稀释至107.02tcid50/ml、109.02tcid50/ml，并分装后于4℃保存；将所制备的两种病毒的抗原液和无菌pbs按照1:1:1的体积配比混合，使得终体积为1ml，fpvcs-2016株抗原终浓度为106.5tcid50/ml、fcvlz-2016株抗原终浓度为108.5tcid50/ml。
13、所述猫细小病毒fpvcs-2016株的以下任一应用：
14、(1)用于制备疫苗；
16、与现有技术相比，本发明的有益效果是：
18、2、本发明提供的猫泛白细胞减少症毒株cs-2016株经灭活后进行安全性试验结果显示：当灭活病毒含量107.0tcid50/ml时，单剂量接种、单剂量重复接种及超剂量接种后的试验猫均表现为采食、饮水正常，体温于正常范围内波动(37.5℃-39.5℃)，注射部位未见不良反应，5/5健活。表明安全性良好；
19、3、本发明提供的猫细小病毒fpvcs-2016株经灭活后进行有效性试验结果显示：105.5tcid50/ml免疫猫细小病毒灭活疫苗试验猫14天后攻毒的3/5体温、精神、饮食、粪便未见异常，2/5试验猫出现轻微腹泻、呕吐、白细胞下降等临床症状，其中1/5死亡；106.0tcid50/ml免疫猫细小病毒灭活疫苗试验猫14天后攻毒的4/5体温、精神、饮食、粪便未见异常，1/5试验猫出现轻微腹泻、呕吐、白细胞下降等临床症状；106.5tcid50/ml和107.0tcid50/ml免疫猫细小病毒灭活疫苗试验猫14天后攻毒体温、精神、饮食、粪便均未见异常，5/5存活；注射pbs缓冲液的非免疫攻毒对照组攻毒后5/5表现为腹泻或呕吐，5/5死亡，试验猫死亡前体温降低、白细胞数降低至不正常范围或检测不到(正常范围：2.87-17.02×109个/l)；空白对照组未见任何异常。表明当抗原含量不低于106.0tcid50/ml时，可对试验猫起到较好的保护作用，其激活的抗体水平亦不低于1:100。说明cs-2016株病毒免疫原性良好。
20、4、本发明所述的猫杯状病毒lz-2016株，具有较高的病毒滴度，该毒株对健康易感猫的致病性强，可引起典型的口腔溃疡和结膜炎等症状；该毒株的灭活制品免疫猫可产生良好的免疫应答，具有良好的免疫原性，作为灭活疫苗可较好的刺激机体产生针对fcv的高水平中和抗体，对fcv攻击能够提供较高的免疫保护率，具备开发疫苗的基本潜质。将该病毒株制备成疫苗可用于猫杯状病毒防治，为我国猫杯状病毒的防控提供重要的疫苗毒株源，以实现猫杯状病毒的有效防控。
21、5、本发明的疫苗组合物可一次接种有效免疫两种病毒的感染。
1.一种猫细小病毒fpvcs-2016株，其特征在于：保藏号为cctccno:v202277。
2.一种疫苗株，所述疫苗株为猫杯状病毒毒株和权利要求1所述的猫细小病毒毒株的组合，其中，所述猫杯状病毒毒株的命名为猫杯状病毒fcvlz-2016株，于2022年9月2日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctccno：v202276。
3.一种疫苗组合物，所述疫苗组合物含有疫苗上可接受的载体和权利要求1或2所述病毒毒株或其衍生病毒。
4.如权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物的原料包括所述病毒毒株的灭活病毒和佐剂。
5.如权利要求4所述疫苗组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤二中取病毒液原液或稀释液按0.1％的体积加入β-丙内酯，混合均匀后于4℃灭活24h，再37℃水解2h。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤三中灭活后的猫细小病毒fpvcs-2016株和猫杯状病毒fcvlz-2016株病毒液分别使用无菌pbs稀释至107.02tcid50/ml、109.02tcid50/ml，并分装后于4℃保存；将所制备的两种病毒的抗原液和无菌pbs按照1:1:1的体积配比混合，使得终体积为1ml，fpvcs-2016株抗原终浓度为106.5tcid50/ml、fcvlz-2016株抗原终浓度为108.5tcid50/ml。
8.根据权利要求1所述猫细小病毒cs-2016株的以下任一应用，其特征在于：