与其它疱疹病毒相比,MDV最显著的特性是细胞结合性,即在细胞培养上不产生游离于细胞培养液中有感染性的病毒粒子(特别是MDV1)。在感染后不同时期的病鸡体内,除羽毛囊上皮细胞外,其它任何脏器或体液中都分离不到游离病毒,病毒严格存在于活细胞内。只有感染MDV的羽毛囊上皮细胞能产生游离病毒,在上皮细胞死亡后仍然存有感染性的病毒粒子。
随着医学疱疹病毒及其它病毒分子生物学的研究进展,在过去40年中对MDV的分子生物学研究也日趋深入。
由于用重组粘粒构建MDV感染性克隆是用带有MDV基因组不同片段的多个重组粘粒转染CEF而得到的克隆化重组病毒,不仅构建技术的重复性较差,而且多个重组粘粒在转染细胞形成感染性MDV全基因组时在细胞培养上可能有多个细胞内形成不同的感染性病毒粒子。此外,在多个重组粘粒相互重组形成全基因组的过程中所形成的不同感染性病毒基因组分支不一定完全相同,这会影响此后进一步研究的稳定性。因此,随着BAC克隆技术的推广,粘粒逐渐被取代。
随着现代分子生物学技术的发展和应用,MDV感染性克隆技术在基因组结构与功能、病毒与宿主之间的相互作用以及基因工程疫苗等方面的研究更趋成熟,它使MDV庞大的基因组能够稳定地保存、增殖和突变,并且操作简便而安全。
蛋白质组学(Proteomics)以基因组编码的全部蛋白质为研究对象,从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,从而深入认识有机体的各种生理和病理过程。近年来细菌或酵母双杂交系统、二维凝胶电泳(Two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE)、差异凝胶电泳(Differentialin-gelelectrophoresis,DIGE)、同位素标记相对和绝对定量(Isobarictagsforrelativeandabsolutequantitation,iTRAQ)、蛋白质芯片(Proteinchip)技术等诸多蛋白质组学技术研究手段纷纷应用于MD的研究,使得我们能够通过MDV蛋白质组学水平阐明细胞游离病毒形成机制、病毒致病及致肿瘤的机理,为MD的控制以及新型疫苗的研发提供新的思路。
MD是第一个能用疫苗有效预防控制的病毒性肿瘤病,实际上,在过去近50年中,全球养鸡业从应用疫苗预防MD的生产实践中获得了极大的经济效益。3个血清型的MDV都可用做MD疫苗,但以与致病性MDV同属MDV1的CVI988/RISPENS株的效果最好。虽然突破CVI988/Rispens免疫保护作用的现场投诉也时而发生,但最近20多年来,CVI988仍一直是被全球养鸡业公认预防MD最好的疫苗。CVI988是20世纪70年代初从健康鸡分离到的一株弱毒MDV1,经在CEF细胞上连续传代进一步致弱后用作疫苗。为了研发比CVI988保护力更好的疫苗,美国农业部禽病和肿瘤学研究所前所长、美国科学院院士Witter曾从20世纪80年代开始就尝试MDV1的不同毒株在CEF细胞上连续传代致弱的病毒对MD的保护性免疫作用,在近20年的研究中,没有发现任何一株病毒能提供比CVI988/Rispens更好的保护性免疫,他认为除了用基因工程方法研发新的MD疫苗外,用常规病毒学的方法已不可能得到比CVI988/Rispens更好的疫苗了。因此,从20世纪末开始,科学家们开始尝试用基因工程的方法研发新的MD疫苗,包括将MDV不同野毒株敲除不同潜在的致病基因后用作疫苗。
近些年来,多个实验室利用感染性克隆技术构建了敲除某个特定基因的重组病毒,这不仅可用于识别和研究参与MDV复制、免疫抑制、致瘤和致病的基因及其功能,也可以通过鸡体试验分别判定这些基因缺失病毒做为疫苗候选株的潜在可能性。
科学研究的动力源自科学家对某些自然现象的兴趣。出于现实,科学家的研究目标和列题也必须从社会的需求出发,对于作为应用学科的预防兽医学更是如此,也就是说研究结果必须对社会有用。大多数研究成果应该能不同程度地用于或服务于生产,如果是基础研究,要考虑到其后续研究的潜在可能性或对今后深入研究的推动作用。通观MDV研究的50多年历史,早期的研究成果多数对疫病的诊断和防控以及深入认识MDV和MD的性质也是有用的。至于近20年MDV的分子生物学研究,其结果多数只是将现代分子生物学的不同阶段发展起来的新技术、新概念在MDV上再重复应用一遍而已,多数只是添了一点所谓科学数据,发表的论文被“引用”,但不是被“应用”。在当前科学研究的对象和领域越来越多,而我们的研究资源和人力精力又总是有限,在考虑对MDV开展进一步研究时要慎重地选择今后的研究目标和方向。
还有一个小的仅属于经典病毒学的研究目标是,明确中国鸡群有没有能够突破CVI988/Rispens疫苗的保护性免疫的vv+MDV流行株。虽然早在20世纪90年代,欧美就已报道了vv+MDV的多个野毒株,但中国一直没有真正证实有vv+MDV的流行。虽然这只是一个经典病毒学问题,但必须要用足够数量的动物实验来证明,而不是仅仅根据用过疫苗的鸡群仍发生肿瘤并分离到MDV就能轻易下结论的。