类病毒

20世纪70年代初期,美国学者Diener及其同事在研究马铃薯纺锤块茎病病原时,观察到病原无病毒颗粒和抗原性、对酚等有机溶剂不敏感、耐热(70℃~75℃)、对高速离心稳定(说明其低分子量)、对RNA酶敏感等特点。所有这些特点表明病原并不是病毒,而是一种游离的小分子RNA。从而提出了一个新的概念—类病毒(Viroid)。在这个概念提出之前,人们一直认为,由蛋白质和核酸两种生物多聚体构成的体系,是原始的生命体系,从未怀疑病毒是复杂生命体系的最低极限。

类病毒是一类能感染某些植物致病的单链闭合环状的RNA分子。类病毒基因组小,分子量为1×105。目前已测序的类病毒变异株有100多个,其RNA分子呈棒状结构,由一些碱基配对的双链区和不配对的单链环状区相间排列而成。它们一个共同特点就是在二级结构分子中央处有一段保守区。类病毒通常246~399个核苷酸。如马铃薯纺锤块茎类病毒(Potatospindletuberviroid,PSTVd,Vd是用来与病毒加以区别)是由359个核苷酸单位组成的一个共价闭合环状RNA分子,长约50A~70nm(见图3·16)。

所有的类病毒RNA没有mRNA活性,不编码任何多肽,它的复制是借助寄主的RNA聚合酶II的催化,在细胞核中进行的RNA到RNA的直接转录。

图3.16类病毒的结构图

类病毒能独立引起感染,在自然界中存在着毒力不同的类病毒的株系。PSTVd的弱毒株系只减产10%左右,而强毒株可减产70%~80%。

所有的类病毒均能通过机械损伤的途径来传播,经耕作工具接触的机械传播是在自然界中传播这种病害的主要途径。有的类病毒,如PSTVd还可经种子和花粉直接传播。类病毒病与病毒病在症状上没有明显的区别,病毒病大多数典型症状也可以由类病毒引起。类病毒感染后有较长的潜伏期,并呈持续性感染。

不同的类病毒具有不同的宿主范围。如对PSTVd敏感的寄主植物就数以百计,除茄科外,还有紫草科、桔梗科、石竹科、菊科等。柑桔裂皮类病毒(Citrusexocortisviroid,CEVd)的寄主范围比PSTVd要窄些,但也可侵染蜜柑科,菊科,茄科,葫芦科等50种植物。

类病毒的发现,是20世纪下半叶生物学上的重要事件,开阔了病毒学的视野。它为进一步研究植物中可能存在的类病毒病开辟了一个新的方向。

二、朊病毒

美国学者S.B.Prusiner因发现了羊瘙痒病致病因子—朊病毒(1982年),而获得了1997年的诺贝尔生理和医学奖。朊病毒(Virino)亦称蛋白侵染因子(Prion,Proteinaceousinfectiousagents),是一种比病毒小、仅含有疏水的具有侵染性的蛋白质分子。

纯化的感染因子称为朊病毒蛋白(Prionprotein,PrP)。致病性朊病毒用PrPSC表示,它具有抗蛋白酶K水解的能力,可特异地出现在被感染的脑组织中,呈淀粉样形式存在。

许多致命的哺乳动物中枢神经系统机能退化症均与朊病毒有关,如人的库鲁病(kuru,一种震颤病)、克雅氏症(Creutzfeldt-JakobDisease,CJD,一种早老年痴呆病)、致死性家族失眠症(FatalFamiliarInsomnia,FFI)和动物的羊瘙痒病(Scrapie)、牛海绵状脑病(BovineSpongiformEncephalopathy,BSE或称疯牛病madcowdisease)、猫海绵状脑病(FelineSpongifoemEncephalopathy,FSE)等。

正常的人和动物细胞DNA中有编码PrP的基因,其表达产物用PrPc表示,相对分子量为33~35kDa。正常细胞表达的PrPc与羊瘙痒病的PrPsc为同分异构体,PrPC与PrPSC有相同的氨基酸序列,PrPC有43%的α螺旋和3%的β折叠,而PrPSC约有34%的α螺旋和43%的β折叠。多个折叠使PrPSC溶解度降低、对蛋白酶的抗性增加。

既然PrPSC是一种蛋白质而且不含任何核酸,那么它在人或动物体内又是如何进行复制,如何进行传播的呢Prusiner等提出了杂二聚机制假说,既PrPSC单分子为感染物,从PrPC单体分子慢慢改变构象,形成PrPSC单体分子,中间经过PrPC-PrPSC杂二聚物,然后再转变为PrPSC-PrPC。在这个过程中,有未知蛋白(proteinX)可能起着调整PrPC转化或维持PrPSC形态的作用。这个二聚物解离又释放新的PrPSC,因此不断“复制”下去(图3.17)。

图3.17PrPC与PrPSC的分子结构模式图PrPC:正常型蛋白PrPSC:致病型蛋白

图3.18朊蛋白的构型转换

朊病毒的发现在生物学界引起震惊,因为它与目前公认的“中心法则”即生物遗传信息流的方向是“DNARNA→蛋白质”的传统观念相抵触。Pursiner等人阐明羊瘙痒病的发病机制是由于朊病毒分子构象的改变而致病。这一发现开辟了病因学的一个新领域,可能对其他传染性海绵状脑病的发病原理和病因性质,提供一条新的思路,对生物科学的发展具有重大意义。

三、拟病毒和卫星RNA

20世纪80年代以来,在澳大利亚陆续从绒毛烟、苜蓿、茛菪和地下三叶草上发现了四种新的植物病毒。这些病毒的蛋白质衣壳内都含有两种RNA分子,一种分子量为1.5×106Da的线状RNA1,另一种为分子量约为105Da的类似于类病毒的环状RNA2,这种RNA2分子被称为拟病毒(Virusoid)。拟病毒有两种分子结构,一是环状RNA2,二是线状RNA3。RNA2和RNA3是由同一种RNA分子所呈现的两种不同构型,其中RNA3可能是RNA2的前体,即RNA2是通过RNA3环化而形成的。拟病毒在核苷酸组成、大小和二级结构上均与类病毒相似,而在生物学性质上却与卫星RNA(satelliteRNA)相同,如:①单独没有侵染性,必需依赖于辅助病毒才能进行侵染和复制,其复制需要辅助病毒编码的RNA依赖性RNA聚合酶。②其RNA不具有编码能力,需要利用辅助病毒的外壳蛋白,并与辅助病毒基因组RNA一起包裹在同一病毒粒子内。③卫星RNA和拟病毒均可干扰辅助病毒的复制。④卫星RNA和拟病毒同辅助病毒基因组RNA比较,它们之间没有序列同源性。根据卫星RNA和拟病毒的这些共同特性,现在也有许多学者将它们统称为卫星RNA或卫星病毒。

THE END
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8.近年来科学家们在朊病毒研究领域取得的新进展!生物研究专区人类朊病毒病包括克雅氏病(CJD)和格斯特曼氏综合征(GSS),近日,一项刊登在国际杂志PLoS Biology上的研究报告中,来自英国伦敦大学学院等机构的科学家们报道了他们对人类朊病毒小鼠模型的研究成果,文章中,他们发现,与病毒相关的可传播的朊病毒蛋白装配的自发形成或许仅会在携带人类朊病毒蛋白的小鼠体内进行。 https://www.bioon.com/3g/id/6757504/
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10.克雅氏病CJD美国会诊案例不幸的是,目前没有治疗选择。没有药物或其他治疗方法被证明对人类的朊病毒病有效。美国Ionis Pharmaceuticals 合作的反义疗法看起来非常有前途,但目前正在进行动物试验,尚未进入人体试验。 后记:随着现代技术发展,这种远程连线世界顶级医生共同联合诊治疑难杂症的实现,已经不是梦,这次视频连线的美国教授来自美国神经内科排名...https://www.medebound.com/index.php/guide/687
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