羊膜腔穿刺术是一种经腹B超引导下利用穿刺针从宫腔内抽取羊水，从而获得胎儿脱落细胞、渗出液、尿液或分泌物样本的技术。该操作一般在孕周达16周才开始进行，通过抽取的羊水样本进行各种染色体、生化、分子和微生物的研究。
临床上，进行羊膜腔穿刺术最常见的原因是染色体异常、单基因异常、胎儿感染和羊膜腔内炎症的产前诊断以及评估胎儿肺成熟度和血液或血小板的类型。羊膜腔穿刺术应在羊膜与绒毛膜融合后的妊娠中期进行，与羊膜腔穿刺术有关的流产约为0.5%；羊水溢出的风险约为0.3%，以及其他罕见的并发症，如胎盘出血、羊膜腔感染、腹壁血肿和胎儿病变。
操作步骤
超声评估
为了更好地进入羊膜腔，操作者应利用超声对羊膜腔进行定位并检测胎儿活力。术前超声对孕妇腹部进行横向扫描，确定胎盘的位置、最大羊水池垂直羊水深度(MVP)或羊水池、胎儿位置和胎儿的运动情况（图1）。探头应垂直于母体腹壁，在探头下方创建一个虚假图像。操作者在对肥胖患者进行羊膜腔穿刺前必须利用超声计算出穿刺针朝向腹壁至羊膜腔的距离，然后根据这个距离选择一个合适长度的穿刺针（20，22g）。操作者必须注意太长的针在操作过程中容易弯曲，一般12-、15-和20-cm的针通常比较合适。
MVP应通过腹部横向视图进行定位，避免宫底和侧壁附近的周围池。胎儿的运动模式通常是反复的，应被仔细观察。超声屏幕上的图像应包括孕妇的腹部皮肤，图像应该通过减少深度实现放大，而不是通过改变焦距。因此，操作者可以规划出穿刺针插入的区域针以及从孕妇皮肤到羊膜腔的轨迹。在穿刺过程中，穿刺针应尽量避免经过胎盘。穿刺针经过胎盘在同种异体免疫或由人类免疫缺陷病毒（艾滋病毒），乙型肝炎病毒（乙肝）或丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒）的母婴感染中是禁忌。
准备
操作者（和助手）必须用消毒剂擦洗双手并戴上无菌手套。孕妇腹部区域必须清洗干净，并用消毒液（如洗必泰或酒精聚维酮）进行消毒。超声探头必须用无菌塑料薄膜覆盖，为提高声波传输，可在薄膜内部涂上凝胶剂。理想情况下，操作者应使用单独包装的无菌凝胶，以减少多次使用的凝胶瓶被污染的风险。
插入穿刺针
目前，整个操作过程应在连续可视化的超声引导下进行。超声探头垂直置于患者腹部皮肤，以获得孕妇腹部的横切面，注意防止探头在腹部不经意间的滑动，如上所述（图1）。超声探头可与母体的正中矢状面成45°，穿刺针在正中矢状面的另一侧（图2），且在同一横切面上。
穿刺针插入有四个阶段：刺入腹壁、子宫、羊膜腔以及穿刺针的前移。
1.刺入腹壁
穿刺针必须于母体正中矢状面成45°进入，探头在正中矢状面对侧，探头与穿刺针成90（图2）。操作者应将穿刺针向探头方向插入，使穿刺针在超声波束的中间。穿刺针向前约3厘米，指向最大羊水池垂直羊水深度的中央。操作者开始时需要用有限的压力推穿刺针通过腹壁各层（图3A）。当穿刺针处于皮肤和子宫壁之间时，应避免刺破肠管。由于缺乏横向超声束，穿刺针的轨迹不能被完全可视化（图3c），因此有可能刺破肠管。意外刺破肠管可导致绒毛膜羊膜炎、产妇败血症，极少甚至发生母体的死亡。
2.刺入子宫
因为子宫脏层腹膜的覆盖，穿刺针穿过子宫的那一刻孕妇可能是痛苦的。由于母体的运动或腹部肌肉组织的收缩，穿刺针的方向可能已被改变，穿刺针在刺入子宫前必须再次被确认方向。
3.刺入羊膜腔
在进入羊膜腔之前，整个穿刺针必须被精确定位和可视化。因为穿刺针与探头之间的角度是垂直的，为提高可视化，探头必须要稍微远离穿刺针。穿刺针的部分显示或许会导致刺破后壁胎盘或子宫后壁。当穿刺针进入宫腔时，操作者必须要果断、快速地刺入羊膜腔，避免形成「帐篷样」的羊膜，否则容易导致刺入部位的错位或不能抽到羊水（图4）。通常，在这种情况下，穿刺针尖可观察到两个回声信号代替一个。如果形成「帐篷样」的羊膜，一个小的逆冲运动或穿刺针的扭曲可协助穿刺针突破羊膜层，顺利进入羊膜腔。
4.穿刺针的前移
抽取羊水
一旦针在宫腔中被正确定位，操作者应移去针芯，将注射器或穿刺针适配器连接到真空采血管上（图5A）。如为适配器，真空管被推进支架，适配器连接管子上的橡胶盖（图5b）。这种真空装置可自动抽取羊水，无需额外的操作（图5c）。然后，移去全管，连接一个新的管子，用相同的方法抽取羊水（图5d）。在操作过程中，操作者需获得约20毫升羊水。在理想情况下，样本应没有母体血细胞污染。传统上，为避免这一点，开始2ml的羊水应被丢弃或用于测量甲胎蛋白的水平；然而，这一操作已被中断，现在定量荧光聚合酶链反应（QF-PCR）可在此样本上进行检测。
如果尝试两次羊膜腔穿刺术后所获得的羊水太少或质量不满意，患者可在一周后再次尝试。如仅获得1毫升羊水，可进行定量荧光聚合酶链反应（QF-PCR）/荧光原位杂交（FISH）。
操作后的建议
1.可给予RhD阴性女性抗D免疫球蛋白（300μl）。
如穿刺针刺入胎盘或穿刺点有出血，产妇咽拭子和羊水的QF-PCR可能在确定母体细胞污染时有用。
如出现出血或羊水泄漏、剧烈的腹痛和发热（体温≥38C），患者应尽快至急诊室就诊。
3.1周后超声随访，确认胎儿的活力和评价穿刺区。
4.羊膜腔穿刺术必须由有经验的操作人员进行或监督，以减少并发症的风险。
5.该操作一般在孕周达16周才开始在超声引导下完成。
6.20–22G针必须在连续超声引导下才能被使用。
7.抗生素不需要被常规给予。
8.染色体核型/阵列CGH分析必须至少获得10-20mL的羊水。
9.操作之前，临床医生必须向患者告知每项研究的信息和风险，并让患者签写面同意书。孕妇或丈夫应根据所有可用信息进行选择。