食品中微生物的检测技术

在日常生活中,部分商家会将不合格的产品投入市场,而表象上这些产品与合格产品并无两样,但这些不合格的产品会影响人们的生活和身体健康,例如人们平时所吃的大米有些含有黄曲霉这种病菌,黄曲霉对蛋白质合成氨基酸有抑制作用,干扰细胞的代谢从而对人们的身体健康造成影响。不同的人由于身体素质不同对于致病菌有不同的抵抗作用,身体较弱的人对病菌几乎没有抵抗作用。不同的病菌也需要不同的检测技术,例如肉毒杆菌、沙门氏菌、黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌和大肠杆菌等。这就要求完善市场监管,给食品安全作出保障,对不合格的食品及时出具报告并予以警告。

目前我国常用的食品样本的采集方式有以下几种。

将小刀放在酒精喷灯下,进行消毒杀菌后,用小刀将样品表面薄薄地刮下一层,将刮下的样品表面装入干燥处理后的灭菌容器中送检。

将棉拭子消毒灭菌,沾湿灭菌生理盐水抹擦表面一定面积后,放入灭菌生理盐水管。

将大肠杆菌做消毒处理。再用生理盐水浸润,使其处于湿润状态并贴于样品表面。一份样品包含两片纸片。粘附1min后取出置于无菌袋中。

取5份为一组样品,将纸片润湿后,用毛细吸管吸取纸片,将纸片样品用约5cm的玻璃棒进行润湿,样品每份取出两张进行润湿,洗脱后装入含有灭菌处理后的50mL浓度为0.9%的生理盐水试管中。

根据样品的面积和堆积的形状采用分区设点,或根据样品的高度采用分层采样、分区设点,每一块的面积不得超过50cm2,各区块中心加上四角共设5点;两个及以上的区块在分界线上的两个点为共有点。将样品分为上、中、下三层,取每一层的5个点的等量样本进行充分混合,再将样品进行检验。

对于人们日益增长的食品安全需求,传统的食品检测技术耗时费力,且精确度不高。而微生物检测技术应运而生,传统的食品检测方法有原子吸收光谱法、气相色谱法和质谱法等,这些检测技术有免疫酶技术、基因探针技术、聚合酶链式反应技术和生物芯片技术等精密度能够满足食品检测要求的新型微生物技术。将新型微生物检测技术与前沿的化学分析法结合,既能提高检测的效率与精确度,还能简化操作过程,可以及时出具检测报告。

光辐射可被特定的气态原子吸收能量,是将原子的外层电子从基态到激发态的过程而建立的。不同原子所含有的能量和能级不同,可以选择性地通过共振作用吸收特定波长的辐射光。原子激波长与共振作用所吸收的波长一致。当光源发射的特定波长的光通过原子蒸气时,原子由基态跃升至激发态时所需能量频率也与入射辐射的频率一致,这就使得原子中的外层电子将选择性地吸收其同种元素所发射的特征谱线,使入射光减弱。特征谱线因吸收而减弱的程度称吸光度A,在线性范围内与被测元素的含量成正比。该原子吸收光谱仪主要有单光束型光谱仪和双光束型光谱仪,造价低,易于广泛使用。但该光谱仪也有一定缺陷,其缺点在于精确度和灵敏度有一定的局限性。

基因探针技术即DNA探针技术,基因探针杂交技术可分为相杂交以及意杂交两种技术。利用DNA在高温变性以及低温复性以及碱基互补配的高度精确性。可以准确测出DNA的序列,其应用广泛,且准确率高,在食品安全微生物检测中,可以提高检测效率。例如:常见的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌等。基因探针技术与传统的微生物检测技术相比,其操作简便,应用广泛,效率高,准确率高,灵敏度高,检测过程中的特异性也比较高,实际操作性强,但技术部分欠缺,有待完善。

生物芯片技术是利用分子间特异性作用的原理光导原位合成或者微量点样,可得出已知序列的核酸片段或蛋白质片段集成于基片表面的微缩技术。对表面的核酸和蛋白质分析,得出对核酸类、蛋白质类、多肽类的组成成分。该种技术目前较为成熟,可高效地分析组分,具有准确、方便、快捷且节省资费的优点,更多地表露出基因表达变换的关系。目前,根据芯片上的材质不同,可将常用的生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、多糖芯片和神经元芯片等与相匹配的食物做安全检测。芯片的主要材料包括硅、玻璃、膜(纤维素)等以上材料制成基片。基片上反应发射的信号可被荧光标记的目标分子反应,根据反应的强度不同进行分析。我国生物芯片技术刚刚起步,有待发展。清华大学、东南大学、北京军事医学科学院等大学已开始生物芯片研究并取得一定成果,部分生物芯片已经问世。与传统的微生物检测技术相比,生物芯片技术可以完成标记、杂交等一系列反应,不再分步进行。节省了工序和资金,且少了多余步骤的干扰,提高了检测结果的准确性。

随着市场的食品流通速度加快,食品安全需求同步提高的要求刻不容缓。而在实际市场中食品安全却往往得不到保障。食品微生物检测技术进入革新状态,应提高检测效率、灵敏度和精确度,进一步保障食品安全,加强市场监督管理。目前食品生产仍然使用流水线生产制造,保证流水车间的无菌环境,以及食品流向市场之前的安全检测结果通常会因为提高流水线的产量、效率以及降低成本而不被重视,按照标准检测的力度会降低甚至懈怠忽略产品安全的最低标准。企业检验设备的优良、检验的熟练度会影响到检测结果的效率以及品质。尤其是零散食品,由于没有特定的包装和定量,检测标准应当更加严格。提高食物微生物检测的效率,可以使食物更加快速地来到市场,增加新鲜度。如果检验效率过慢会影响食品投入市场的速度,最终导致食品接近保质期而造成浪费。因此,提高食物微生物检测的效率非常有必要。

随着科技的不断发展和人们对高质量生活水平的需求增长,许多新兴的产业和物种不断产生,在满足条件的同时一个隐形的杀手——生物安全问题日益凸显。因此,微生物实验室的风险评估和风险控制具有相当重要的意义。为确保参与微生物实验人员身体健康,环境不受污染,能够正常开展微生物实验,确保出具的数据准确、有效,需要对微生物实验室所有实验活动进行风险识别和分析评估,并提出相应的控制措施。实验室应建立并维持风险评估和风险控制程序,以持续进行危险识别、风险评估和实施必要的控制措施。

A公司各环节微生物都没得到很好的控制,结果成品均出现菌落总数超标,B、C、D公司出现部分成品超标,各环节控制也不是很好。根据E公司的数据分析,虽然该企业的原料紫菜菌落总数数值较高,但是通过良好的生产过程控制,仍可生产出合格成品,所以虽然原料紫菜菌落总数较高,但不是决定最终产品不合格的主要因素。

随着社会科技水平的提升,尤其是检测仪器不断改进,证明了一些有害物质对人体危害性较大,还需要进一步降低。例如汞、铬、铅、砷在人体内具有蓄积作用,这就要求它们的指标尽可能小,然而随着食品加工环节增多,重金属进入食品途径增多,这就要求食品重金属指标需要再度降低,否则容易造成蓄积性中毒。目前我国食品标准虽然在不断更新,但仍满足不了人们对食品安全的迫切需求。

EAEC是造成人体中重度腹泻的重要病原菌之一,开展食品中EAEC检测工作对维护人类健康意义重大。本研究研制的具有自主知识产权和全基因组数据的EAEC菌体标准物质和gDNA标准物质均匀性和稳定性良好,为EAEC的检验工作提供了有效参考,保证检测结果的准确性,有利于保证食品质量与安全。该标准物质可用于实验室质量控制及实验室间比对,保证我国食品安全质量检测数据的可靠、可与国际互认。

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