自2000年以来，老龄化已成为中国的主要公共卫生问题，预计到2050年老龄人口将占总人口的35%[1]。通过改善饮食来探索延缓衰老的方法，从而提高老龄化人口的寿命和生活质量逐渐成为研究热点。
PB3002-N电子天平，梅特勒托利多公司；DWSMultiskanGO多功能酶标仪，赛默飞公司；PannormicMIDI数字切片扫描仪，3DHISTCH公司；SCIENTZ-48高通量组织研磨器，宁波新芝生物科技股份有限公司；抓力仪，济南益延科技有限公司；QuantumGXMicro-CT，珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司。
环保型GD固定液，赛维尔生物科技有限公司；血清P物质(substanceP，SP)、胃泌素(gastrin，GAS)、胃动素(motilin，MTL)、血管活性肠肽(vasoactiveintestinalpeptide，VIP)、生长抑素(somatostatin，SS)ELISA试剂盒，南京森贝伽生物科技有限公司；乳清蛋白、大豆蛋白，上海创赛有限公司；饲料配方见表1，由江苏省协同医药生物工程有限责任公司提供。
表1不同饲料中主要营养元素和供能比单位：%
Table1Mainnutrientelementsandenergysupplyratioindifferentfeeds
注：-表示无
动物实验方案及实验操作均由江南大学动物伦理委员会批准(JN.No20200430c0500220[17])。本实验将18只C57BL/6J小鼠[雌性，17月龄，体重30g左右，SPF级，斯贝福(北京)生物技术有限公司]饲养在江南大学动物实验中心的屏障内(无特定病原体，20～26℃，40%～70%湿度，12h明暗循环)。
适应1周后，将小鼠随机分为3组(n=6)，饲喂供能比相同的混合蛋白或单一蛋白饲料24周，饲料按美国AIN-93M标准添加其他营养元素，所有饲料的热量和脂肪水平相同，详细分组见表2。
表2实验分组情况Table2Experimentalgroups
处死小鼠前，参考FERIDOONI等[10]的方法略作修改，对每只衰老小鼠的脆弱程度进行评分，共包括对27个变量的评估(表3)。根据这些变量计算虚弱指数(frailtyindex，FI)分数：对于每个参数，0分代表无缺陷，0.5分代表轻度缺陷，1分代表严重缺陷。
表3C57BL/6J小鼠衰老的临床体征Table3ClinicalsignsinagingC57BL/6Jmice
注：将27个参数中每个参数的得分相加，再除以测量的参数总数，得出每只动物的FI分数在0～1
处死小鼠前，参考SELDEEN等[11]的方法进行小鼠抓力测试，使用抓力仪重复5次实验并记录最大值。
取小鼠右小腿腓肠肌、比目鱼肌和胫骨前肌称重。取其中的胫骨前肌固定在环保型GD固定液中，石蜡包埋，5μm厚切片，苏木精伊红(hematoxylineosin，HE)染色。使用病理切片扫描仪观察染色切片，随机采集图像。
同时取小鼠右大腿股骨固定在4%多聚甲醛溶液中，骨显微成像(micro-CT)前取出，用生理盐水冲洗3遍,同时测量骨密度。
小肠推进率实验采用LEE等[14]的方法，稍作修改。给每只小鼠灌胃墨汁0.2mL，20min后处死小鼠。解剖取出小肠，测量墨汁推进的长度和整个小肠的长度，计算小肠推进率。
血清中的SP，GAS，MTL，VIP，SS利用ELISA试剂盒进行测定。
本文中数据统计学分析采用LSD和Duncan′s多变量检验对各组平均值的差异进行了分析。
为监测小鼠衰老过程中的基本健康状况，每周采集体重和摄食量的数据。随着年龄增大，每组小鼠体重都有不同程度的降低，其中大豆蛋白组降低幅度较小(图1-a)。从每周食物摄入情况来看，混合蛋白组小鼠摄食量相对高，乳清蛋白组次之，大豆蛋白组最小(图1-b)。小鼠的衰老程度通过脆弱指数进行表征，得分越高代表虚弱程度越高，机体衰老情况越严重。3组中大豆蛋白组得分最低，混合蛋白组最高(图1-c)，因此，大豆蛋白组小鼠的衰老程度最低。
蛋白质含量的高低会影响肠道蠕动速度，高蛋白饮食减慢了肠道运输功能[25]，但不同种类蛋白质或氨基酸对肠道运输功能的影响未知。本研究中的饲料蛋白质含量正常，不同组别之间的蛋白质仅氨基酸组成有差异，且大豆蛋白和乳清蛋白均易于吸收，因此，这可能是3组蛋白饮食对小鼠肠道转运功能影响无显著性差异的原因。
表4血清中胃肠调节肽的变化单位：ng/L
Table4Alterationsofregulatorypeptidesofthegutinserum
注：实验结果以“均值±标准偏差”表示；同一列中注不同字母的组别表示具有显著性差异(P<0.05)，标注相同字母及未标注字母的组别之间不具备显著性差异(P>0.05)