摘要朊病毒病是一类由朊病毒引起的致死性神经退行性疾病，对人类社会的危害日益明显。本文就朊病毒病的致病机制、检测及治疗的研究进展做一综述。
卢韦华琳
卢韦华琳（四川大学基础医学与法医学院四川成都60041）
【摘要】朊病毒病是一类由朊病毒引起的致死性神经退行性疾病，对人类社会的危害日益明显。本文就朊病毒病的致病机制、检测及治疗的研究进展做一综述。
【关键词】朊病毒朊蛋白致病机制检测治疗综述
朊病毒病是一种慢性、致死性、神经退行性传染病。对动物而言可分为牛海绵状脑病和羊痒病等；对于人类可分为库鲁病、克雅氏病、变异型克雅氏病等[1]。该疾病主要由于人和动物感染朊病毒引起。朊病毒并非普遍意义的病毒，而是一种可自我复制的小分子蛋白，其特点包括：无核酸、无免疫源性、对外界环境的抵抗力强、传染性强、可在多物种间传播等，可造成人和动物的神经元、脑组织、胶质细胞造成一系列损伤。本文着重介绍朊病毒病的致病机制、检测及治疗的研究进展。
1、致病机制
朊病毒朊病毒有2种同分异构体，即正常细胞型朊病毒（PrPc）和致病型朊病毒（PrPSc）。功能上，PrPc具有超氧化物歧化酶(SOD)活性，可调节免疫，与信号转导和突触传递有关[2]。PrPsc可杀死神经细胞，破坏机体的GABA系统且影响细胞内钙调节等[3]。结构上，PrPc是4个α螺旋(H1～H4)的球形蛋白，含43％的α螺旋，很少或几乎不含β折叠；而PrPSc有2个螺旋(Hl和H2)形成4个β折叠链，含有43％的β折叠和30％的α螺旋[4]
转化PrPc转化为致病PrPSc现有两种学说：①一种认为PrPc和PrPsc可互相转化，正常情况下处于平衡，当外来PrPsc进入体内会形成多聚体，破坏这种平衡，从而PrPc大量消耗；②一种认为PrPsc有模版作用，可促使PrPc构象改变，PrPsc得以繁殖形成多聚体。实验证明，常温下，分子伴侣αB-Crystallin可帮助PrPc的折叠、复性。PrPc的N端具有4个铜离子结合位点，与铜离子的结合可以影响PrPc的结构，从而使PrPc的功能发生变化；PrPc与铜离子的结合受pH和铜离子浓度影响,这些都表明铜影响PrPc向PrPsc的转化，可稳定PrPc的a螺旋构象[5]。
复制Prusiner等认为朊病毒的增殖是一个指数增长的过程，且在细胞内膜上进行；PrPsc先与PrPc结合生成一个PrPsc-PrPc复合物，随后转变为2个分子的PrPsc。如此类推，以2n倍生成PrPsc。影响PrPsc复制的一个因素是宿主朊蛋白的组织分布，复制过程中朊病毒有“朊病毒组织嗜性”，即PrPsc在不同组织中的复制程度有差异性，而近年来研究证实37kDa／67kDaLRP／LR作为朊病毒的重要受体，在复制过程中起着重要的作用，组织中该受体越多朊病毒含量也就越多[6]。
2、检测方法
免疫学方法免疫印迹技术可在病理学检查结果阴性的情况下可检出PrPsc，已成为朊病毒研究中最常用的检测方法之一。免疫组化利用特异性抗体在组织切片上直接显现朊病毒的沉积，因此可实现精确的解剖学定位，为临床诊断提供客观证据，临床应用价值较高。酶联免疫吸附方法具有简便、灵敏、快速和可定量等特点，适合大批量标本的筛查工作[7]。
其他错误折叠蛋白循环扩增方法(PMCA)是应用超声波使PrPsc凝集物破碎成小PrPsc单位，以这些小单位为模板，PrPc为底物，通过复制过程，使PrPsc获得大量的扩增，研究表明，PMCA可提高检测敏感性6600倍[2]。金属离子检测，研究表明朊病毒与生物体内的金属离子变化有一定的关系[5]，在慢性朊病毒动物的神经细胞内，由于VGCC下调方式改变导致细胞溶质内钙离子降低；感染后细胞内的锰含量明显升高，而铜离子的含量则会下降，这些都表明离子浓度的变化与朊病毒病有关系。
3、治疗
化学药物治疗抗PrPsc聚集药品：①硫酸乙酰肝素：感染朊病毒的小鼠使用该药后，其细胞中的PrPsc聚集减少[8]。但研究表明在无细胞体系中该药会促进朊病毒产生②卟啉及其配合物：研究表明卟啉及其配合物可降低细胞中PrPsc的水平，同时在无细胞体系中有抗PrPsc聚集效果，其中以四吡啶基卟吩效果最好③阿司咪唑：对羊和鼠细胞模型有较好的抑制抗PrPsc聚集效果，但很难穿过血脑屏障；清除PrPsc药品：①环糊精：研究证实β-环糊精在感染的小鼠细胞中具有清除PrPsc的能力，尤其是硫化后的3β-环糊精其抗朊病毒能力可提高31倍[9]②菲啶衍生物：具有很强的抗酵母朊病毒和清除细胞内PrPsc的能力；其他：盐酸胍可治愈酵母朊病毒，当羟基脲抑制细胞分裂时盐酸胍对于酵母朊病毒的治愈会下降[10]。
LRP／LR抗体治疗
疫苗
正常情况下，在早期的阳性选择时针对PrPc抗体的T细胞被清除，机体对PrPc呈免疫耐受状态，而PrPsc与PrPc又具有相似的抗原表位，因此即使机体被感染后仍无法激发针对PrPsc的免疫应答[13]。虽然如此，某些针对PrPsc的特异性抗体仍可以存在于完整的免疫系统中，但就目前报道，仍没有较高滴度的疫苗。Souan等将可表达PrPsc的肿瘤移植至不同肽段免疫后的小鼠，诱导出较弱的T细胞免疫应答能使Prp的含量降低60％，诱导出较强的T、B细胞免疫应答可将Prp的含量降低70％-80％[14]。Goni等用表达小鼠PrP的沙门氏菌减毒活疫苗黏膜免疫野生型鼠后可诱导特异性的PrP抗体，且同时产生高滴度IgA抗体和IgG抗体的实验小鼠可100％免于发病，存活的实验动物均未出现任何症状且大脑和脾脏中也未检测到PrPsc[15]。
参考文献
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