1、2011.11.032011.11.0320102010版药品版药品GMPGMP定义定义无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂和原料药，包括无菌制剂和无菌原料药。无菌药品按生产工艺可分为两类：采用最终灭菌工艺的为最终灭菌产品；部分或全部工序采用无菌生产工艺的为非最终灭菌产品。无菌药品特性无菌药品特性无菌无热原或细菌内毒素无不溶性微粒高纯度无菌药品：一般指没有活体微生物存在的药品无菌药品生产管理原则无菌药品生产管理原则2010版GMP附录1中：无菌药品的生产须满足其质量和预定用途的要求，应当最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染。生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度是达到上述目标
2、的关键因素，无菌药品的生产必须严格按照精心设计并经验证的方法及规程进行，产品的无菌或其它质量特性绝不能只依赖于任何形式的最终处理或成品检验（包括无菌检查）。无菌药品剂型分类：无菌药品剂型分类：无无菌菌药药品品无菌注射剂其他制剂液态膏剂、眼用制剂眼用制剂、鼻用制剂、用于烧伤和严重创伤的气雾剂、喷雾剂、搽剂、洗剂与涂膜剂固态可最终灭菌不可最终灭菌无菌原料药灌装、加塞、装箱灌装、加塞、装箱、冻干、冻干过滤过滤压盖、目检、检验压盖、目检、检验包装包装压塞、出箱压塞、出箱配料配料注射用水辅料清洗、灭菌、干燥清洗、灭菌、干燥清洗容器（安瓿、清洗容器（安瓿、玻璃瓶、胶塞等）玻璃瓶、胶塞等）原料铝盖清洗
3、灭菌干燥标签、外包装材料以冻干制剂为例：以冻干制剂为例：生产工艺流程生产工艺流程各个操作均在相应各个操作均在相应的洁净级别中完成的洁净级别中完成滤器清洗、灭菌、检漏分析无菌药品生产分析无菌药品生产质量影响因素质量影响因素冻干产品冻干产品无菌保证无菌保证除菌除菌过滤过滤前微前微生物生物污染污染控制控制人人员员物物料料灭菌前微灭菌前微生物监测生物监测过滤系过滤系统统过滤、灌装、冻过滤、灌装、冻干、内包装工艺干、内包装工艺设设备备过程过程控制控制验证验证状态状态保持保持内包材内包材、物品、物品灭菌过灭菌过程和灭程和灭菌后混菌后混淆、污淆、污染染控制控制方法方法二次二次污染污染无菌检查无菌检查取样
4、取样培养基培养基异常状异常状况处理况处理监测频率监测频率可接受标准可接受标准趋势分析趋势分析监测参数监测参数监测位置监测位置校验校验预防性维护预防性维护再验证再验证变更控制变更控制菌菌种种OOS料液贮料液贮存期限存期限人员、环人员、环境控制境控制内包材清洗灭菌效果包装密封性无菌生产影响因素主要包括：无菌生产影响因素主要包括：清洁、清洗等管理清洁、清洗等管理消毒剂管理消毒剂管理设备、设施管理设备、设施管理（包括工艺用水、气等）物料、物品、器具管理物料、物品、器具管理人员管理人员管理SOPSOP与工艺管理与工艺管理无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制SOPSOP与工艺：与工艺：内容应详细描
5、述，可操作性强（特别是无菌操作、清洗清洁、生产工艺描述）生产过程中最大限度控制微生物和内毒素的引入（原料、料液微生物负载的控制，各种直接接触药品的包材、器具清洗效果的评估等）应由控制异物引入的措施（记录材质、更衣后外表面检查、更衣间检查）生产操作应在相应的洁净级别完成工艺验证（包括培养基模拟灌装、灭菌工艺控制）生产时限（应经过验证确认）产品密封性检查（微生物挑战试验、仪器检测真空度）防尘措施（分装、压盖的扑尘设备的利用）清洁卫生管理（清洁方式、清洁溶剂等）无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制SOPSOP与工艺：与工艺：产品浓度与装量产品浓度与装量包装材料（容器、胶
7、生物、无菌操作、特殊防护知识、卫生等）体检（传染病、灯检人员视力等）进入洁净区人员数量的控制（经验证）进入洁净区人员资质的确认（关键人员必须参加模拟灌装）规范的无菌操作严格的更衣程序人员着装微生物检测（包括手套）外来人员控制（官方或客户审计人员、严禁设备厂家检修人员和参观人员进入）人人员员洁净区洁净区数量数量卫生卫生监测监测培训培训无菌操作无菌操作无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制进入洁净区人员更衣确认：进入洁净区人员更衣确认：取样点如下：1.头部2.眼罩3.胸部4.肘部5.腰部6.双手十指7.膝部1356247频率：1.初次进入者必须经过3次确认合
8、格才可以进入无菌区2.试验不合格者，需重复培训后再试验3.每天对无菌服、手套进行抽检无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制规范的无菌操作包括，但不限于：规范的无菌操作包括，但不限于：当一个表面被消毒剂消毒了，不要擦它，让它自然凉干更衣前后应有有效的防交叉污染的措施不允许没有经过手部消毒，就从B级进入A级的任何操作）不允许有疾病或外伤的人员进入无菌区不允许过多的活动不允许过多的讲话不允许摸脸、无菌服、周围设备及其它人员不允许斜靠在墙上、柜子或设备上不允许开着门不允许消毒剂滴到敞口的产品上不允许从地上捡东西不允许人员身体一部分穿过/遮盖敞口的产品和其它无菌的物品等当离
9、开无菌室的时候，不允许将废弃物（如袋子等）放在产品上无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制物料（包括内包材）：物料（包括内包材）：p物料质量的控制：供应商审计（包括外包装的要求）、包装完好性检查（包括密封性）、取样、检验与贮存等p进入洁净区物料的控制：消毒或灭菌p洁净区物料：数量的控制、物料的转移（密封、层流）、物料的存放位置、效期规定等p清洗灭菌（清洗灭菌效果、处理参数、灭菌装载方式等）p剩余物料的处理（胶塞等）清洗效果：化学（氯化钠）、微粒（聚苯乙烯粒子）、清洗效果：化学（氯化钠）、微粒（聚苯乙烯粒子）、内毒素内毒素无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制物品、器具（
10、包括环境监测平皿）：物品、器具（包括环境监测平皿）：p进入无菌室的传递（气闸、灭菌设备）熏蒸、灭菌（装载方式经过验证，SOP规定照片、示意图、文字说明相结合）p存放（效期、密闭或层流保护）p转移（密封或层流、呼吸袋的使用）p使用（完好性检查、状态的确认）个大胶塞个小胶塞个铝盖个胶圈112233总图总图局部图局部图示意图无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制设备设备（包括灭菌设备、冻干机、分装机等）：（包括灭菌设备、冻干机、分装机等）：验证状态在线或离线清洗灭菌情况真空泄漏率检测及频率日常指示探头的布点位置设备外观质量设备传送带跨级别（压盖
11、A/B级）设备自动密闭控制系统（手套箱的使用等）辅助设备（呼吸器）：灭菌、检漏无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制过过滤系统：滤系统：滤芯供应商选择滤芯材质选择（与注册资料一致）滤芯相容性试验（包括吸附试验）滤芯微生物挑战试验滤芯完整性检测滤器系统的在线或离线清洗灭菌、安装（防止二次污染）过滤器安防的位置要求滤芯使用次数的确认（最后一级建议一次使用，除非经过验证）滤芯的保存方式滤芯的更换记录（QA确认）完整性试验失败注意事项：浸润不良和排气不良，导致介质中出现“干区”压力超调，造成大部分通道干燥，使气体呈块状流动平衡补偿不足，造成扩散流量不适时的提前，结果值高，常
12、不为接受定期校准压力表支撑部分及垫圈损坏介质损坏(滤膜在灭菌或使用过程中损坏)无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制洁净厂房：洁净厂房：厂房布局的合理性（例人员进出分开，尽可能涉及观察窗监控设施，称量区域防尘要求、特殊药品布局要求以及排风尾气的处理措施等）厂房密封性（特别是与灭菌设备相连处）及SOP规定厂房表面的完好性（包括门）人物进出口的管理（物料气闸、传递窗等互锁延时装置、门禁）温湿度适合产品生产地漏的设置和清洁消毒洁净厂房材质要求（熏蒸消毒的影响）洁净室灯具安装要求无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制环境洁净度：环境洁净度：一定的换气次数和风速动态
14、消毒或灭菌（制水预处理系统、呼吸器等）无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制洁净服：洁净服：l清洗、灭菌SOP规定l贮存（效期、保存方式等）l材质要求（防静电、不脱落纤维等）l清洗灭菌次数（经过专业部门的验证确认，建议不超过100次，最好不超过60次）l清洗效果的确认（微粒、内毒素）l清洗用水的要求（微粒控制检测）l清洗剂的使用要求（固定清洗剂的类型，例白猫）l洁净服检查（异物、完好性等）无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制消毒剂的管理：n消毒剂灭菌、保存方式（除菌过滤系统、密闭、层流）n消毒剂消毒效果的验证n消毒剂的相容性n使用消毒剂（轮换、使用后残留
15、处理）n消毒剂配制的SOPsn消毒剂使用频率n消毒剂检测频率n消毒程序的培训（包括人员手部消毒）n消毒剂供应商的评估n消毒剂的种类n把环境分离菌列入周期性的挑战性试验的范畴不锈钢储罐喷头硅胶管平板呼吸器无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制醇类醇类过氧化过氧化物类物类季铵盐类季铵盐类酚类酚类消毒剂消毒剂常用消毒剂的种类常用消毒剂的种类无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制n醇类：75%乙醇，70%异丙醇n过氧化物类：0.3%双氧水，3%双氧水，过氧乙酸溶液，杀孢子剂n季铵盐类：0.2%新洁尔灭溶液，3%-5%新洁尔灭溶液n酚类：3%甲酚皂溶液无菌生产影响因
16、素控制无菌生产影响因素控制洁净区清洁及清洁用具：洁净区清洁及清洁用具：u清洗、灭菌SOP规定（灭菌装载方式）u贮存（效期、保存方式等）u材质要求（不锈钢、无尘布）u完好性检查（锈斑、脱落物）u清洁方式（顺方向、擦拭面积、清洁剂用量控制等）u清洁剂的使用（无菌水+消毒剂，必要时使用一定浓度的酸或碱，避免使用家用清洁剂，特别是设备内表面）u清洁频率、位置（特别是联动线传送带、甲醛熏蒸后、生产过程后），生产过程中如必须清洁，应采取相应的预防措施无菌生产影响因素控制无菌生产影响因素控制清洗：清洗：u清洗验证（清洗的程度根据是否有同品种连续的批次进行生产或是生产不同的产品,确定最
19、系统；企业内部自查偏差、变更管理系统；企业内部自查纠正措施和预防措施纠正措施和预防措施(CAPA)(CAPA)系统；质量控制系统系统；质量控制系统培训培训培养基模拟灌装培养基模拟灌装以冻干原料药为例以冻干原料药为例培养基模拟灌装试验是评价一个无菌工艺操作能力的最有用方法之一。通过模拟灌装试验，可以证明：采用无菌工艺生产无菌药品的能力无菌工艺人员的资格符合现行的GMP要求无菌工艺模拟无菌工艺模拟整个工艺验证一部分,,挑战无菌工艺生产无菌药品的能力对无菌操作进行评价它是工艺的模拟，始自灭菌至容器密封,,以促进微生物生长培养基替代产品对可能影响最终产品无菌的无菌工艺
20、中的变更评估..鉴别无菌工艺中可能影响微生物污染的薄弱环节评估无菌操作人员的技能符合cGMPcGMP的要求证明无菌工艺支持系统的适用性无菌工艺模拟并非无菌工艺模拟并非只单独验证无菌工艺测定无菌保证水平确认洁净区的操作人员的资质确保工艺控制对支持系统及工艺进行确认对差的无菌操作技术或做法进行确认培训人员适应灌装操作的环境无菌工艺模拟应考虑的关键无菌工艺模拟应考虑的关键模拟不应提高或干扰生产工艺；不应人为提高或降低污染的风险，除非设计中有此内容不要用无菌工艺模拟来”验证“一个”不良“的工艺无菌工艺必须正常运行后，才能对它验证无菌工艺模拟不是一种培训方法只有经培训
24、步骤，应予考虑人员的干预的频率，应与实际生产工艺相一致可根据生产记录或生产日记来决定干预的频率在无菌工艺模拟中包括的干预应与生产相似系在无菌灌装中发生的活动，即设备调试、重量调节、容器及胶圈的供给、容器的补充和环境取样等干预的频率或位置应与灌装操作一致在批记录中，可能不会将这类必不可少的活动作为干预来专门记录。纠正性干预纠正性干预干预是为了应对所发生的事件纠正性干预应包括应对事件的各种措施如容器破损、倒翻、堵塞；更换灌装针(或灌装枪）、调节装量//取样等。但它不要用它去确认“不良”的操作罕见或不常见的干预可能要以较高的频率列入方案加以模拟（例停风等）设备的无菌组装（
26、等乳糖乳糖l流动性粉末，化学性质稳定，可以使用流动性粉末，化学性质稳定，可以使用Co60Co60照射灭菌照射灭菌l溶解性溶解性易容于易容于TSBTSB培养基培养基l抑菌性研究抑菌性研究一定浓度下不抑菌一定浓度下不抑菌用什么类型的培养基用什么类型的培养基大豆胰蛋白胨肉汤培养基（TSB，美国药典规定)在特殊情况下，应考虑厌氧培养基，如硫乙醇酸盐液体培养基必须能支持USPUSP指示菌或//和环境微生物的生长(促生长实验）污染必须有可见的或可检出的的证据（阳性对照）模拟应与灌装工艺相一致（或包含实际工艺）惰性气体惰性气体l缺氧时可能抑制微生物生长l充氮保护对微生物
29、料称量料液配制三级除菌过滤纯化水四级除菌过滤模拟冻干取样、培养剩余料液除菌过滤滤芯放入培养基密闭培养固固体体模模拟拟部部分分工工艺艺流流程程图图整粒混粉装桶/取样称量压盖包装贮存、培养Co60照射的无菌乳糖分装、出箱包材清洗灭菌图例说明：A级C级模拟灌装结束后数量的记录模拟灌装结束后数量的记录记录所有的模拟分装数量记录废瓶数量记录所有培养数量记录所有完成检查的数量记录阳性结果数量培养前的检查培养前的检查生产的所有瓶子或桶都要检查检查人员应经过培训，且有书面规程采用正常生产的检查方法检查检查中，剔除有完整性缺陷的瓶子或桶，不得剔除与密封性无关缺陷的灌装样品（如外观缺陷）
30、除常规生产中用于研究且需分开包装的样品外不得丢弃或排除任何已灌装的瓶子或桶对于在培养过程中损坏的样品剔除后，必须说明理由和偏差调查对整个灌装过程中报废容器数量要在模拟灌装记录中详细说明（物料平衡）所有干扰的样品均应标记培养培养灌装压盖后的符合要求的成品应先倒置30秒，使胶塞/胶圈完全浸润后送质控部门正置培养，并做好交接记录。对样品进行两个温度段的无菌培养，先20-25培养7天，再30-35培养7天。培养14天后，无菌的制品，应做一定数量的滞留试验（3-5天培养）。滞留试验所用的微生物为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、环境分离菌。密封性挑战试验：将灌装培养基样品，倒置在挑战菌液中（浓度不低于106CFU/ml）不少于12小时，再30-35培养14天，再进行增菌和分离培养培养后的检查培养后的检查u让受过培训，能够识别培养基阳性的人员