动物行为学分析方法范文

导语：如何才能写好一篇动物行为学分析方法，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

作者简介：陈婷(1990-)，女，湖北人，硕士，研究方向：术后认知功能障碍的动物模型行为学研究。作者简介：张宗泽

光遗传学被《Naturemethods》评为2010年度生物技术［1］。光遗传学技术是将光学和遗传学技术相结合，利用病毒载体，将微生物视蛋白基因引入到载体动物的脑组织，采用不同波长和频率的光进行照射，通过刺激光敏感蛋白开启或关闭特定细胞类群或特定神经元的活动进而调控其功能，从而控制动物行为［2］。本文就光遗传学技术的基本方法及应用，以及其在神经-精神疾病动物模型中如何调控神经回路作一综述。

一、光遗传学技术

近来，研究者一直致力于不同行为的神经回路研究，探讨其投射连接，观察通过调控某一类神经元活动后的相应行为学表现。而电刺激和药理学的方法可能导致实验结果不准确，光遗传学技术具有目的性强、低损伤性、高时空分辨率和遗传特异性等特点，近年来在神经科学领域的生物学机制的研究中得到了广泛应用。光遗传学技术可包括下述几部分，对此作简单介绍。

1光敏感蛋白

生物体内存在着一类可以感受不同波长光的刺激，并对该光学刺激产生一系列效应的膜蛋白，即视蛋白。

目前，Ⅰ型视蛋白包括：细菌视紫红质(Bacteriorhodopsin，BR)，盐视紫红质(Halorhodopsin，HR)，通道视紫红质(Channelrhodopsin，ChR)。ChR在莱茵衣藻(Chlammydomonasreinhardti)中发现，为蓝光激活的阳离子通道蛋白，作用为阳离子内流，使细胞膜去极化。2005年，ChR2首次应用于光控制神经元活动的实验中。Ⅱ型视蛋白OptoXR，为视紫红质G蛋白偶联受体的嵌合体。是一种光敏感与G蛋白偶联的膜受体，G蛋白又称鸟苷酸结合蛋白，与G蛋白偶联的膜受体有很多种，如M胆碱能受体、多巴胺能受体等，可参与细胞内信号转导，还可调控如谷氨酸等神经递质的信号传递功能［3］。

2光敏感蛋白的表达

3光刺激和信号记录

二、光遗传学技术在神经科学研究中的应用

通过光遗传学技术可将光敏感通道蛋白表达在特定的细胞，用于突触可塑性、神经系统的疾病治疗、动物行为学、神经回路研究等多方面。

1突触可塑性的研究

树突棘是大脑神经元接受和传递信息的重要结构，是形成突触的关键部位，在突触可塑性中发挥重要作用。90%以上的兴奋性突触存在于树突棘头部中，应用光遗传学技术可以同时检测多个树突棘的信号，突破了停留在单个突触水平的研究。Takahashi等［5］通过对啮齿类动物海马区锥体细胞的上百个树突棘进行研究，发现临近的树突棘在自发活动中会趋于同步化，使得输入信号整合，成为动作电位输出。

也有研究应用光照激活星型胶质细胞上表达的ChR2能促发谷氨酸递质释放，可激活神经元的AMPA受体［6］，而AMPA受体与突触可塑性有关。这些研究表明通过选择性调节特异性神经元或神经细胞数量，光遗传学技术在突触可塑性研究中有较大应用前景。

2神经系统疾病的治疗研究

光遗传学技术除了检测大脑中癫痫发作的起始点外，还用于研究严重癫痫持续状态的持续或中止［7］。Sukhotinsky等［8］利用光遗传学技术揭示了海马兴奋型神经元在氯化锂-匹罗卡品诱导大鼠急性癫痫中的作用。

Alilain等［9］利用光遗传学技术将ChR2表达于膈肌运动细胞群，光照刺激下，颈部脊髓损伤的动物可以恢复呼吸运动。光遗传学技术也为帕金森症的神经机制提供了新的见解和思路。

3动物行为学和神经回路研究

三、光遗传学技术在动物行为学中的应用研究

光遗传学技术在动物行为学应用中有良好前景，尤其适用于探索特定类型神经元活动范式与动物行为改变之间因果关系的研究。光遗传学技术在动物交际行为、恐惧记忆行为、奖赏记忆行为、焦虑样行为等行为学的神经回路进行深入研究，不仅可以记录活体动物的脑整体活动，也可记录拟研究神经回路活动的细胞、分子的活动表现，是研究动物行为学的神经回路的一个重要事件，推动了神经回路研究的进步。

1焦虑-社交障碍症候群动物行为学

根据临床资料，焦虑症和社交功能障碍之间有着显著的联系，这种联系可能为理解焦虑症和社交障碍的共同神经通路提供线索。抗焦虑药物可减少当动物被放置在易焦虑环境中的社交受损［13］。不同的自闭症小鼠模型均表现出明显的社交功能障碍以及增强的焦虑样行为［14］。这些研究均表明，焦虑症和社交功能是紧密联系的，并且可能存在一个共同的病理神经机制。

2焦虑样行为的动物行为学

3基底外侧杏仁核-腹侧海马(BLA-vHPC)神经回路的阐明

疾病动物模型如恐惧记忆的神经回路研究，得益于鼠听觉恐惧反射的杏仁核模型，即杏仁核恐惧条件反射。Petreanu等［17］利用光遗传学技术将ChR2表达在大鼠丘脑核和运动皮层兴奋性神经元上，通过光刺激，在活体脑进行电位记录，实现了兴奋性神经元与体感觉皮层锥体细胞间突触的精确定位。这一方法，为研究完整神经回路中发生突触联系的神经元提供了较为广阔的途径。

[关键词]交感神经；动物模型

目前临床上由颈交感神经激惹引起的疾病患者，其症状较为复杂、主观性强，又不具有特异性，因此诊断比较困难，易漏诊、误诊。而就交感神经长期激惹对周围神经功能改变情况的研究很少，为此，我们设计了应用结扎大鼠颈交感神经的方法制作交感神经激惹模型，观察其神经行为学改变，希望能做出稳定可靠的动物模型，也为下一步的干预实验奠定基础。

1材料与方法

1.1实验动物健康成年SD大鼠24只,体重250g，随机分为两组：激惹组(n=12)成年SD大鼠麻醉条件下行右侧颈交感神经颈中节部分结扎；对照组(n=12)成年SD大鼠麻醉条件下暴露右侧颈交感神经颈中节后缝合。最终全部大鼠成活。

1.2手术方法实验组：10%水合氯醛腹腔注射麻醉，用量0.3ml/100g大鼠体重，备皮，络合碘消毒颈胸部皮肤，仰卧位固定。按沙轲等的方法，手术显微镜下取颈部前正中切口，显露大鼠右侧颈中交感神经节。结扎右侧的颈中节，缝合颈部伤口。对照组仅显露大鼠右侧颈中交感神经节，缝合颈部伤口。

全部手术操作过程不超过10分钟，出血量多者弃之不用，手术及麻醉复苏过程中保持局部环境温度35-37℃。

1.3模型评价

1.3.1Bederson神经功能评分0分：无神经功能缺损；1分：前肢出现任何屈曲成分(即提尾悬空实验阳性)，不伴其他不正常；2分：侧推抵抗力下降(即侧向推力试验阳性)，伴前肢屈曲，无转圈行为；3分：同2级行为，伴自发性旋转(自由活动时向瘫痪侧划圈)。

1.3.2前肢放置试验大鼠每侧受测10次，前肢触及桌面角边缘次数为该侧得分。注意：抓握大鼠要轻柔，前肢自由悬垂，试验前轻轻上下活动大鼠，尽量让其放松，如大鼠挣扎，肌肉紧张或肢体放在试验者手上不计在内。

1.4统计学分析对实验结果采用SPSS13.0软件进行统计分析，采用Mann-WhitneyU秩和检验，以P＜0.05为有差异。

2结果

2.1Bederson神经功能评分经过检测，术后6周实验组有9只大鼠Bederson神经功能评分为1分，另外3只为0分，而对照组12只大鼠均为0分，经过统计学分析两组数据比较有显著差异，P＜0.01，见表1。

表1术后6周两组大鼠Bederson神经功能评分比较(n=24)

2.2前肢放置试验经过检测，术后6周前肢放置试验实验组左侧评分均为10分，实验组右侧评分情况为5只7分、4只8分，3只9分，对照组左右侧评分均为10分，两组左侧前肢放置试验评分比较无明显差异，P>0.05，两组内双侧对比也没有差异，P＞0.05，而两组右侧对比有明显差异，z＝-4.48，P＜0.01。

颈肩痛病人大多是慢性疾病，病程相对较长。本实验选择在大鼠术后6周做模型的评价，相当于在人类身上有大约2年的病程。此时即保证了伤口的愈合，同时由于交感神经激惹产生的一系列症状和体征也能够充分的体现出来。

行为是机体功能的重要表现，对机体行为进行评估是神经科学研究领域的重要组成部分之一。行为学指标用于对实验动物的运动功能、神经功能和精神状态的评估，具有全面反映实验动物整体状态的作用。因此，本实验选取国内外较为公认的，相对客观的神经行为学检测方法，包括Bederson神经功能评分、前肢放置试验、作为模型的评价标准，以了解实验鼠损伤后在姿势改变、感觉的灵敏度及动作协调性等方面的改变。以期给出一个相对客观、可以量化的评价方法。在正式测试前的训练非常重要，良好的训练将提高实验数据的可重复性和可靠性。从结果可以看出，实验组大鼠相比对照组术后出现了姿势改变、感觉迟钝、协调性差的改变，我们认为是由于颈交感神经的持续兴奋，导致其支配的周围神经功能降低、血管供血不足引起。

本实验应用结扎右侧颈交感神经的方法制作大鼠颈交感神经激惹模型是研究颈交感神经激惹较为理想、可靠稳定的动物模型。

【关键词】密闭舱室；冲击伤；行为改变；学习记忆

Abstract:ObjectiveToexplorethechangesofrats'learning，memoryfunctionbehaviorunderblastingwaveinconfinedspace.MethodsAllratsweretrainedtoMorriswatermazeandshuttlebox.Testingandobservingthemodelafterblastinginconfinedspace.Results(1)Grossexaminationrevealedthatbrainandlungswereinjuredunderblastingwave.Therewasnodyskinesiainboththehermeticgroupandpatencygroup.(2)Everyindexofopenfieldtest，watermazeandshuttleboxinthehermeticgroupandpatencygroupwaschangedsignificantlyascomparedwiththecontrolgroup(P

Keywords:confinedspace;blastinjury;behaviorchange;learningandmemory

材料与方法

1实验动物及分组

雄性SpragueDawley大鼠144只(第三军医大学实验动物中心提供)，体重(180±20）g，随机分为密闭组、开放组和对照组，每组各48只；每组又分为6个时相点，每个时相点各8只。12小时光亮/黑暗条件、环境温度22～25℃，分隔喂养。

2方法

2.1自制旷场行为观察箱(100cm×100cm×40cm的无顶铁盒，箱底分为25个黑白相间的等分小方格)，将大鼠放入中央小方格内，观测5分钟内大鼠的活动情况。计分标准：以穿格次数为水平活动得分，大鼠1/2以上身体从所在方格进入相邻方格计1分；直立次数（大鼠后肢性站立计1分）为垂直活动得分。

3冲击伤模型制备

密闭组：采用自制按人鼠比例等比缩小的模拟装甲运兵车，通过当量为400mg的纸质点爆源（避免投射物损伤）引爆致伤。将清醒大鼠置于铁笼内（以免发生投掷损伤），使其头部朝向冲击波，布放于模拟装甲运兵车模型内距离爆点11.5cm处，以保证伤情的一致性，爆炸后即刻开启舱门通风（排除吸入性损伤）。开放组：将大鼠置于开阔地，其余致伤条件与密闭组保持一致。

4统计学分析

数据以均数±标准差表示，选用软件SPSS13.0进行方差分析。

结果

1舱室内和开阔地爆炸冲击波物理参数对比（表1，图1）

表1冲击波物理参数（略）

图1爆炸压力波形模拟图（略）

2伤后一般情况及大体观

伤后一般情况：密闭组和开放组大鼠均无体表损伤及运动障碍，四肢活动自如，能自主进食、水，反应迟钝。大体观：伤后1小时密闭组和开放组大鼠均可见脑皮层血管充血，脑组织肿胀，脑表面基本正常，无大面积挫伤或局灶性挫裂伤灶；肺水肿，肺出血。密闭组与开放组之间伤后一般情况和大体观无明显差异。

3旷场实验

旷场行为实验水平得分和垂直得分，反映动物的兴奋性、对环境的探究行为和适应程度［4］。密闭组和开放组在伤后1小时的水平运动及垂直运动与对照组均显著增加（P

4学习记忆能力

Morris水迷宫及穿梭箱实验是评价动物学习记忆能力较为客观而准确的方法。

4.1Morris水迷宫在伤后1小时密闭组、开放组大鼠逃避潜伏期较对照组均出现显著延长（P

4.2穿梭箱测试在伤后1小时两组平均反应时均出现显著增加（P

表2大鼠旷场行为水平运动的比较（略）

与对照组比较：P＜0.05，P＜0.01；与开放组比较：P＜0.05，P＜0.01

表3大鼠旷场行为垂直运动的比较（略）

与对照组比较：P＜0.05，P＜0.01;与开放组比较：P＜0.05，P＜0.01

表4大鼠的Morris水迷宫训练潜伏期比较（略）

表5大鼠穿梭箱测试（平均反应时）参数比较（略）

讨论

Clemedson［6］早在1956年就指出，爆炸冲击波可造成伤员意识障碍、眩晕、近事遗忘等。蒋建新等［7］研究发现，采用生物激波管致伤后，大鼠的学习记忆能力在短期内受到损害，表现为明显的学习记忆能力低下。本研究通过模拟密闭舱室内外爆炸冲击波致伤，得到了与以往研究相一致的结论；另外，以往冲击伤后行为学研究，都是建立在单一理想的冲击波暴露之上；而本模型通过模拟战场，更加接近战伤实际。

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[关键词]苦参总黄酮；D-半乳糖；抗氧化；MAO-B；TNF-α

[Keywords]flavonoidsfromSophoraflavescens；D-galactose；anti-oxidation；monoamineoxidase-B；tumornecrosisfactor-α

doi：10.4268/cjcmm20152123

衰老是一切生物发展的自然规律，是体内外许多因素共同作用的结果。进入21世纪后，随着各国陆续进入老龄化社会，衰老和抗衰老领域的研究受到各界的重视。苦参别名苦骨、川参、草槐、地槐等，其活性成分主要是生物碱和黄酮类化合物，苦参总黄酮（flavonoidsfromSophoraflavescens）多数为二氢黄酮和二氢黄酮醇类，少数为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类等，有研究显示苦参总黄酮具有抗肿瘤、抗心肌纤维化、抑菌、增强免疫功能、抗心律失常等多种作用[1-4]，但对衰老的研究尚未见报道。D-半乳糖所致亚急性衰老动物模型在国内外广泛应用[5-6]，本研究采用D-半乳糖诱导衰老模型，同时给予小鼠苦参总黄酮灌胃30d，观察苦参总黄酮对衰老小鼠的影响，并探讨其作用机制。

1材料

1.1动物昆明种小鼠，清洁级，雌雄各半，体重（25±5）g，购买于吉林大学基础医学部实验动物中心，动物合格证号SCXK（吉）2008-0005。

1.2药物苦参总黄酮（质量分数80%，西安草翠芯生物科技有限公司）；D-半乳糖（质量分数99%，上海源叶生物科技有限公司）；脑复康（东北制药集团沈阳第一制药公司）。

1.3仪器722可见分光光度计（上海欣茂仪器有限公司）；酶标仪（美国Bio-radModel680型）；DP71光学显微镜（日本OLYMPUS）。

1.4试剂SOD试剂盒、MDA试剂盒、LDH试剂盒、ATP酶试剂盒、考马斯亮蓝试剂盒（南京建成生物工程公司）；MAO-B酶免试剂盒、TNF-α酶免试剂盒（上海浩本生物科技有限公司）。

2.1实验分组和给药昆明种小鼠，60只，雌雄各半，随机分为6组：对照组，模型组，苦参总黄酮低、中、高剂量组，脑复康组。除对照组外，其余各组均D-半乳糖颈背部皮下注射（160mgkg-1d-1，连续30d），对照均同时皮下注射等量生理盐水。造模同时，苦参总黄酮低、中、高剂量组分别灌胃苦参总黄酮[3，7]150，300，600mgkg-1d-1；阳性对照组灌胃脑复康500mgkg-1d-1，对照组和模型组灌胃等量溶剂，连续30d。每3d称体重1次。给药结束后进行行为学试验，观察学习记忆能力的改变。

2.3标本的收集行为学试验结束后，称体重后10%水合氯醛腹腔注射麻醉（3mLkg-1）后固定，开腹，经腹主动脉取血，静止30min以上离心，取血清备用。将小鼠快速断头处死，将全脑取出，用4℃生理盐水冲洗，做组织匀浆。每组随机挑取小鼠2只，麻醉后固定，开胸腔，左心室灌注生理盐水，剪破右心耳，直到右心耳流出清亮无色液体为止，后灌注4%多聚甲醛约500mL。固定完毕后，迅速断头取脑，常规进行HE染色。

2.4指标检测取10%脑组织匀浆液按试剂盒方法测定MDA含量，酶免法测定TNF-α含量；取1%脑组织匀浆液，按试剂盒方法测定SOD，Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性，酶免法测定MAO-B活性；取血清按试剂盒方法用酶标仪检测LDH的活性；考马斯亮蓝法测定组织蛋白含量。

2.5脑海马组织HE染色将脑组织于4%多聚甲醛固定24h，常规石蜡包埋，切片，用于HE染色，光镜下观察海马结构，并拍照。

2.6统计学分析实验所有数据以±s表示，组间比较采用方差分析及q检验进行。

3结果

【关键词】慢性应激抑郁症缬草体质量行为学

Keywords：chronicstress；depression；Valerian；weight；behavior

1．1材料

1．1．1动物

SD成年雄鼠80只，体质量180～200g，由广东省实验动物中心（粤监证字2006A015）提供。

1．1．2药物

阳性药物氟西汀购自美国礼来公司，缬草由HolistalInternationalLTD提供，氟西汀和缬草溶液用5g／L羧甲基纤维素钠配置而成。

1．2实验方法

1．2．1动物分组及模型建立

1．2．2给药

模型建立后，7组大鼠分别灌服不同的药物。①正常对照组和阴性对照模型组大鼠灌服5g／L羧甲基纤维素钠；②阳性对照模型组大鼠灌服氟西汀溶液（2．2mg／kg）；③低剂量缬草模型组大鼠灌服低剂量缬草溶液（100mg／kg）；④中剂量缬草模型组大鼠灌服中剂量缬草溶液（200mg／kg）；⑤高剂量缬草模型组大鼠灌服高剂量缬草溶液（400mg／kg）；以上药物的剂量均是4mL／d，分早晚两次灌服，每次2mL，灌药周期为3周。⑥未用药模型组不灌服任何药物，正常饲养。

1．2．3体质量和行为学检测

本实验周期为8周，每周对各只大鼠进行一次体质量、自来水摄取量、10g／L糖水摄取量的测量。具体方法是在禁食禁水20h后，同时给予大鼠自来水和10g／L糖水（需预先称自来水瓶和糖水瓶的重量），1h后，拿去自来水瓶和糖水瓶并称其重量，前后两次称量的差值分别为大鼠的自来水摄取量和10g／L糖水摄取量。体质量称量在检测自来水摄取量和10g／L糖水摄取量后进行。

1．2．4统计学分析

采用SPSS12．0统计软件，组间各数据比较均用单因素方差分析，结果用x±s表示。

2．1制备模型期间7组大鼠体质量和行为学结果

2．2灌服药物期间大鼠体质量和行为学结果

3讨论

目前，大部分国外学者采取液体消耗实验中的糖水消耗量来判断抑郁模型是否成功。糖水摄取量的变化可以反映动物对“奖励”的反应。患有抑郁症的大鼠，其“情绪低落”，对奖励淡漠，其糖水摄取量是明显减少的。本研究也发现，在造模的第3周和第4周，制备模型组大鼠的糖水摄取量是明显减少的。这表明给予慢性应激能够使大鼠发生抑郁。

本文还观察到，一定剂量的缬草可以使抑郁大鼠的糖水摄取量恢复性增加到正常大鼠的水平，从而逆转了消失的症状。缬草是如何促使抑郁大鼠恢复正常的行为活动？其机制目前还不清楚。有研究发现，出现抑郁行为的动物和人，其大脑海马神经元是减少的［10-12］。一些研究表明，缬草可以明显降低因脑缺血引起的海马神经元死亡数量，提示缬草有保护脑细胞的作用［13，14］。我们另一项实验也显示［15］，应用缬草可促使抑郁大鼠海马神经元恢复性增加，并且达到正常大鼠水平。表明缬草可以保护抑郁大鼠海马受损伤神经元，不让它们死亡，从而稳定了海马结构。因此，本文认为，一定剂量的缬草促使抑郁大鼠恢复正常的行为活动可能与抑郁大鼠海马神经元恢复性增加有关，这一推测还有待于研究证实。本研究不清楚不同剂量的缬草有不同作用的原因，推测与缬草含有多种活性成分有关。据认为，天然植物药中某一种成分在一定的剂量范围内可能对某一器官、组织具有保护作用，但是另一剂量可能会产生相反的效果［16］。

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[关键词]慢性低O2高CO2；银杏叶提取物；行为学；Morris水迷宫

[Abstract]ObjectiveToobservechangesofspatiallearning-memoryinratswithchronichypoxichypercapniaandtheeffectofgingkgobilobaextra.MethodsAfterestablishedtheratmodelofchronichypoxichypercapnia，seventy-tworatswererandomlydividedintofourgroups：normalcontrol（NC），hypoxic-hypercapnia4-week（4HH），hypoxic-hypercapnia4-week+gingkgobilobaextra（EGb）highdose（100mg/kg）group[4HH+EGb（H）]andhypoxic-hypercapnia4-week+EGblowdose（50mg/kg）group[4HH+EGb（L）].PraxiologyinratswasasessedbytheMorriswatermazeandstepdowntest.ResultsThespatiallearning-memoryinratsexposedtochronichypoxic-hypercapnia4-week（4HHgroup）weredisplayedsignificantimpairmentintheirperformance，thelongermeanescapelatenciesandswimpathdistances，themoreerrortimes.4HH+EGb（H）and4HH+EGb（L）groupsshortenedthereactiontimeofleaning，prolongedthelatenttimeofmemory，reducedtimesofmistakes.ConclusionsEGbcanenhancethecapacityoflearning-memoryintheratsexposedchronichypoxichypercapnia.

[Keywords]Chronichypoxichypercapnia；Gingkgobilobaextra；Praxiology；Morriswatermaze

1.1主要材料

常压慢性低O2高CO2实验模拟舱（潍坊华信氧业有限公司）、M192519便携式O2和CO2气体测定仪（上海牧晨电子技术有限公司）、大鼠跳台仪、Morris水迷宫（上海赞德医疗有限公司）、Medlab生物信号采集处理系统（南京美易科技有限公司）。

1.2动物分组及模型制备

1.3行为学检测

1.3.2跳台试验实验装置主要由回避反应箱（30cm×30cm×30cm）及一圆形跳台组成。其中箱底为铜栅，可通刺激电流（0.5～0.6mA）。圆形跳台可随机置于铜栅上，大鼠可在跳台上停留以回避电击。在实验前为消除大鼠探究反应，需先将其放置于箱内，适应3min。在训练实验期间，多数动物受电击后，可能再次或多次跳至铜栅上，而后又重新跳回平台。每次训练5min，记录大鼠训练时跳下台受电击次数，即第一次错误（EN1），作为训练成绩。24h后以此作为记忆保持实验，记录每只动物3min内跳下平台的错误次数，即第二次错误次数（EN2），并且第一次跳下平台的潜伏期（ST）。

1.4统计学处理

应用SPSS18.0统计学软件，计量资料以均数±标准差（x±s）形成表示，经正态性检验后，多组样本均数比较采用单因素方差分析（F检验），均数两两比较采用LSD-t检验。P

2.1各大鼠mPAP、mCAP的变化

与NC组比较，4HH组及不同剂量EGb干预组mPAP有显著性差异（P均0.05），见表1。

2.2各组大鼠Morris水迷宫成绩

与NC对照组比较，4HH组平均逃避潜伏期延长和游泳总距离增加。EGb干预组（高剂量、低剂量）平均逃避潜伏期和游泳总距离均缩短，与4HH组比较，有显著性差异（P

2.3各组大鼠跳台试验结果

与NC组比较，4HH组潜伏期明显缩短，EN1及EN2错误次数明显增加（P

近年来许多研究相继报道了COPD引起的认知损害，而且该类损害并非只是巧合或抑郁引起[9]。尸检和动物学实验对存在这类认知障碍的患者或动物的海马区研究中发现了不同程度的损伤[10]。相对于国外单纯低O2性肺动脉高压动物模型，慢性低氧高二氧化碳模型很好地模拟了COPD的病理改变[11]。本研究结果也表明，各模型组大鼠与正常对照组相比，mPAP明显升高，而mCAP无显著性差异，说明慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压模型已复制成功，且动物的体循环压无明显变化，提示模型组动物脑血流未受明显影响。

在现代学习记忆研究中，Morris水迷宫往往被认为是非自我为中心的、空间参照的学习记忆研究可靠的理想的经典测试工具[12]，但是由于动物在水中的本能逃生反应，且在游泳中消耗能量较大，从而影响学习记忆的检测。故此，本研究为了试验结果更稳定可靠，同时结合跳台作业实验。后者优点在于可较准确地反映动物空间的辨别性学习记忆能力，简便易行，根据试验设备的不同，一次可同时试验多只动物，可实现组间平行操作。在该实验中同时采用了跳台潜伏期、错误次数等指标，排除了药物非特异性干扰，从而使实验结果更具说服性。从实验结果看，两个测试工具实验的结果相平行。模型组大鼠学习与记忆能力均下降，而EGb干预（高、低剂量组）后大鼠的学习记忆能力，有不同程度的提高，表现为平均逃避潜伏期和游泳总距离缩短、EN1及EN2错误次数减少。同时我们在两个剂量组间，未发现EGb在（50～100）mg/kg剂量区间，呈现干预作用有统计学意义。提示后续的该药物量效研究上剂量区间可能需进一步扩大。

综上所述，说明实验动物在该造模环境下的一些生理反应是稳定的或变化甚微，也提示其不是导致模型组学习记忆能力下降主要因素。

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【关键词】三七总皂甙;参麦注射液;脑出血;tnfα;hsp70

对于脑出血治疗的报道多偏于现代医药方面的研究，如甘露醇、甘油等一些脱水药的降颅内压作用是明显和肯定的，但也存在一些不容忽视的副作用。WWW.133229.cOM脑出血属于中医学脑卒中范畴，而年老正衰易发瘀血、气血虚弱，应用活血和补气中药治疗缺血性和出血性脑卒中有很好的疗效〔1〕。三七和参麦无论在脑出血的初期还是恢复期，都是临床上使用较多的中药，但同时对二药的疗效、脑水肿、肿瘤坏死因子α(tnfα)、热休克蛋白(hsp70)表达的影响等比较尚未见报道。本研究旨在通过比较观察两者对脑出血大鼠的治疗作用，寻找出治疗脑出血比较有效的中药;为拓展中医药在防治脑出血领域提供理论和实验依据。

1.1动物分组与处置

1.2脑出血模型的制备及给药

10%水合氯醛(0.5ml/100g)腹腔麻醉，将大鼠固定于立体定位仪上，切开头部正中皮肤，暴露颅骨，参考rosenberg的大鼠脑出血模型，按大鼠立体定位图谱定位左侧尾状核,用微量注射器取0.6μl胶原酶肝素溶液，假手术组除不注胶原酶肝素溶液。造模3h后，分别给予生理盐水，复方甘油、三七总皂甙及参麦注射液2ml腹腔注射，假手术组不给药，每日给药1次。

1.3结果测定

1.3.1模型筛选及神经行为学评分

大鼠清醒后2h进行神经功能缺损评定，评分参考zealonga5分制评分法：0：无神经损伤症状;1分：不能完全伸展对侧前爪;2分：向对侧转圈;3分：向对侧倾斜;4分：不能自发行走，意识丧失。按神经行为学评分选取在1～3分内者作为研究对象，死亡及不符合条件的大鼠予以剔除，并随机补充。

1.3.2脑组织含水量测定

1.3.3苏木素伊红(he)染色

取各组大鼠左后块脑组织常规石蜡包埋，切片，he染色，置光镜下观察。

1.3.4免疫组化检测

将每组大鼠右前块、右后块脑组织分别用于检测tnfα和hsp70表达，免疫组化法按试剂盒说明进行操作。光镜下tnfα和hsp70阳性细胞的胞浆或胞核内会出现棕黄色的颗粒,每组织块选5张切片，400视野下，计数8个(0.25×0.25)mm2范围内阳性细胞数。

1.4统计学分析

采用spss13.0统计软件，数据以x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析。

2.1神经行为学比较

2.2脑含水量比较

与假手术组比较，其余各组大鼠脑含水量均增加，以48h最重，后呈下降趋势。甘油组各时相均较模型组含水量少，与模型组比较差异显著(p<0.05);三七及参麦组于造模后4、7d含水量少，与模型组比较差异显著(p<0.05)。见表2。

2.3形态学比较

三七组与参麦组神经细胞变性坏死、细胞周围水肿及脑组织结构疏松程度较甘油组轻，死亡细胞数目较甘油组明显减少，但三七组与参麦组两者程度差不多。

2.4tnfα阳性细胞比较

假手术组tnfα阳性细胞数无明显变化，其余各组明显增加，出血后48h升高的幅度大于出血后4、7d;三七、参麦组以4、7d较模型组及甘油组表达降低明显(p<0.05);在7d时，三七组较参麦组表达明显减少(p<0.05)。见表3。

2.5hsp70阳性细胞比较

假手术组hsp70阳性细胞数无明显变化，其余各组明显增加，其中以4d表达为最高，48h、7d表达均较4d少。三七、参麦组以4d、7d较模型组及甘油组表达增多明显(p<0.05);而7d时，三七组hsp70阳性细胞表达又明显多于参麦组(p<0.05)。见表4。表1大鼠神经行为学评分表2大鼠脑组织含水量测定表3大鼠脑组织tnfα阳性细胞数表达比较表4大鼠脑组织hsp70阳性细胞数表达比较

脑出血属于中医学脑卒中范畴，急性期致病因素以内风、痰浊、瘀血、邪热为主，病邪为害的最终环节为脑络闭阻，致血液运行不畅，形成淤血，瘀血的再生，推动病情的发展,而年老正衰是发病的主要因素，以肝肾阴虚、气血虚弱为发病之本。出血性脑卒中导致的血肿及周围水肿、血液循环障碍，相当于中医的病理瘀血，使得气血津液运行不畅，脑失濡养。治疗上应祛瘀，解除血肿压迫，清除病理代谢产物，补气，以增行血，消散瘀结，滋养脏腑。

三七总皂甙具有止血活血双重作用。研究发现，三七能够促进血肿吸收〔2〕，抑制钙超载〔3〕、清除氧自由基、花生四烯酸及炎症因子〔4〕等有害物质，并能修复损伤的血管、改善微循环，增强免疫力等。参麦注射液由人参、麦冬组成，功效为益气养阴固脱。研究发现它能够促进血肿吸收〔5〕，清除氧自由基〔6〕、抑制钙超载及原癌基因〔7〕等有害物质，并能改善血循环，促进脑内蛋白质、神经递质的合成，增强机体免疫力等。两者皆同时具有中医的“祛邪”与“扶正”功能,但是三七偏于祛邪，参麦注射液偏于扶正，两者作用虽有相同之处，但各有侧重。

脑出血致周围血肿组织形成缺血半暗带，在缺血缺氧状态下，众多的炎症因子被启动，释放出tnfα。tnfα是一种糖蛋白，正常水平可抵抗细菌、病毒等的感染，大量产生和释放会破坏机体的免疫平衡，释放白细胞介素(il6)和蛋白水解酶引起氧自由基的生成;促发炎症反应，加重脑水肿〔8〕。脑出血所致的周围缺血半暗带也是hsp70产生的一种应激刺激。hsp70是一族应激蛋白，正常细胞内含量低，在应激状态下升高较为明显，其表达可作为细胞受损可靠的指标，本质是一种自身保护的抗损伤反应。其神经保护机制可能为：介导蛋白质正确装配，维持细胞正常代谢〔9〕;抑制氧自由基;减轻钙超载;阻止细胞启动自杀程序;减少细胞凋亡;抑制内源性一氧化氮合酶(nos)，减轻血管源性水肿〔10〕。

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【摘要】

目的探讨不同剂量羟丁酸钠对罗哌卡因中毒小鼠惊厥和死亡率的影响。方法小鼠分4组，每组10只，分别预先腹腔注射3种剂量的羟丁酸钠或等容积的生理盐水，5min后腹腔注射致惊厥量罗哌卡因，观察小鼠惊厥潜伏期、持续期、惊厥发生率和死亡率。结果与生理盐水组相比，羟丁酸钠组小鼠惊厥发生率降低，惊厥的潜伏期延长，持续期缩短，死亡率降低。结论羟丁酸钠能降低罗哌卡因毒性并可呈剂量依赖性地拮抗小鼠罗哌卡因中毒引起的惊厥。

【关键词】惊厥；羟丁酸钠；罗哌卡因；小鼠

Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofdifferentdosesofsodiumoxybateontheconvulsionsandmortalityrateofmicewithropivacainepoisoning.Methods40micewererandomizedinto4groups(n=10each)andreceivedintraperitonealinjectionsofsodiumoxybateofthreedifferentdosesorthesamevolumeofnormalsaline，respectively.5minuteslater，allthemicereceivedanintraperitonealinjectionofropivacaineinatoxicdoseandtheconvulsionlatency，duration，seizureincidenceandmortalityofthe40micewereobservedandrecorded.ResultsComparedwiththenormalsalinegroup，thesodiumoxybategroupshadalowerconvulsionrate，longerlatencyoftheconvulsion，shorterdurationandreducedmortality.ConclusionSodiumoxybatecoulddecreaseropivacainetoxicitywithadose-dependentresponse.

Keywords:convulsion；sodiumoxybate;ropivacaine;mice

本实验通过对健康小鼠腹腔注射不同浓度羟丁酸钠和致惊厥量罗哌卡因，观察罗哌卡因致小鼠惊厥的行为学（致惊厥潜伏期、持续期、惊厥数、死亡情况等），并探讨羟丁酸钠对罗哌卡因致惊厥作用和毒性的影响。

1材料和方法

1.1药品

羟丁酸钠由上海旭东海普药业有限公司生产，规格为10ml：2.5g，批号为060302。甲磺酸罗哌卡因注射液由江苏恩华药业集团有限公司生产，规格为10ml：89.4mg，批号为20070301。羟丁酸钠用无菌生理盐水稀释成所需浓度，罗哌卡因使用原液。

1.2实验动物

健康昆明种小鼠，雌雄不拘，体重20～25g，由徐州医学院实验动物中心提供。

1.3方法

按分层随机区组设计将40只小鼠分成4组，每组10只。各组小鼠分别腹腔注射生理盐水(NS组)或50mg·kg-1(Q50组)、100mg·kg-1(Q100组)、200mg·kg-1(Q200组)的羟丁酸钠，注射容积均为0.1ml·10g-1，5min后腹腔注射致惊厥量罗哌卡因0.1ml·10g-1(1s内注射完）。观察小鼠惊厥的潜伏期、持续期、惊厥发生率、死亡率。

计量资料均以±s表示，计数资料以百分比表示，用SPSS16.0软件进行统计学分析。多组间比较采用完全随机设计方差分析，两组间比较采用方差分析中均数的两两比较，多组率的比较采用似然比χ2检验，两组率的比较采用Fisher确切概率法。P

Q50、Q100、Q200组均可降低罗哌卡因中毒小鼠的惊厥率和死亡率，并呈剂量依赖性。Q50组能缩短惊厥持续期(P0.05)；Q100组能延长惊厥潜伏期(P

本实验结果表明羟丁酸钠可剂量依赖性地拮抗罗哌卡因的致惊厥作用，降低死亡率，提示羟丁酸钠对罗哌卡因中毒有保护作用。

局麻药选择性抑制大脑抑制性通路，故出现兴奋和惊厥，若血中局麻药浓度高至使兴奋和抑制通路同时受到抑制，则全部中枢神经系统处于抑制状态［6］。抗惊厥是防治局麻药中毒的重要措施之一，可减轻惊厥引起的呼吸困难、缺氧、能量过度消耗和心脏衰竭。因此，很多抗惊厥药具有防治局麻药中毒的作用［7］。

常用巴比妥类或苯二氮艹卓类对抗罗哌卡因惊厥，但此二类药物均对呼吸、循环功能有一定抑制作用，常与罗哌卡因惊厥的后抑制作用相重叠而加重对呼吸、循环的抑制。羟丁酸钠对呼吸、循环功能无明显抑制作用，且能改善微循环。

实验中还观察到注射小剂量羟丁酸钠不发生惊厥的小鼠比较活跃，活动自如，而注射大剂量羟丁酸钠的小鼠虽然都没有发生惊厥，但都进入睡眠状态。羟丁酸钠是静脉麻醉药，其抗惊厥作用可能与抑制中枢兴奋性神经元有关，至于其确切的作用机制尚有待于进一步研究。

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【摘要】目的对大鼠血管性痴呆双侧颈总动脉永久性结扎模型（permanentbilateralcommoncarotidarteryocclusion，2VO）进行改良，提高模型动物存活率。方法采取改良造模方法（间隔3天分2次结扎双侧颈总动脉）和传统的2VO方法（同时结扎双侧颈总动脉）建立血管性痴呆模型，观察并比较2种方法大鼠的成活率和学习记忆能力差异。结果术后60d，改良模型组动物存活率（80.0%）明显高于传统模型组（45.0%）（P0.05），而均显著低于假手术对照组（P

【关键词】动物模型；血管性痴呆；Morris水迷宫;大鼠

ABSTRACT：ObjectiveToestablishabetterpermanentbilateralcommoncarotidarteryocclusionmethodwhichisusedtoestablishthevasculardementiamodelandincreasesurvivalrateofthemodelanimals.MethodsThebilateralcommoncarotidarterieswereoccludedintwotimesoperationat3daysintervalforimprovedmethodor，blockedsimultaneouslyatonesurgeryfortraditionalone.Thedifferencesbetweenthetwomethodsaboutthesurvivalratesoftherats，andthelearningandmemoryabilitywerecompared.Results60daysafterthelastoperation，thesurvivalrateoftheimprovedmodelgroupanimals(80%)wasmuchhigherthanthatofthetraditionalgroupanimals(45%)(P0.05)，andwasdecreasedascomparedtothecontrolgroup(P

KEYWORDS：Animalmodel；Vasculardementia；Morriswatermaze；Rat

双侧颈总动脉永久性结扎模型是血管性痴呆研究中常用的模型之一[1]。传统方法因双侧颈总动脉同时永久性结扎，对动物打击过大，动物死亡率高，导致实验成本升高，标本获取困难，实验周期延长。我们拟对传统方法进行改良，降低动物死亡率，同时观察其行为学指标的变化。

1.1动物及仪器

健康雄性Wistar大鼠45只，体质量220±20g，购于湖北省实验动物研究中心（合格证号为0001450）。MT200Morris水迷宫视频分析系统，成都泰盟科技有限公司。

1.2实验方法

大鼠随机分为3组：假手术对照组（10只）、改良模型组（15只）及传统模型组（20只）。具体实验方法如下。

改良模型组：大鼠术前12h禁食，自由饮水。以10%水合氯醛（350mg/kg，ip）麻醉后，将大鼠仰卧位固定于鼠台，颈部皮肤剪毛备皮，碘伏酒精常规消毒。切口位于颈正中线左侧旁开0.5cm处，长约1cm。钝性分离皮下组织后，于切口正下方的斜方肌与气管夹角处可见颈总动脉搏动。分离出颈总动脉后，以4号丝线双重结扎。术中动作轻柔，避免钳夹和过分牵拉迷走神经，注意无菌原则。行间断缝合。术后3d，每天以碘伏消毒伤口及周围皮肤。3d后于颈正中线右侧旁开0.5cm处切开，进行相同手术。

传统模型组：大鼠麻醉、固定，取颈正中切口，切口长约1.5cm。钝性分离皮下组织，于一侧肌肉间隙中分别分离出颈总动脉，以4号丝线双重结扎。完成一侧后，进行另外一侧。其余同改良方法。

假手术对照组：双侧颈总动脉不结扎，余同传统模型组。

1.3指标测定

计量资料以均数±标准差（±s）表示。使用spss12.0forwindows软件。对计量资料进行t检验，取α=0.05作为检验水平；对大鼠成活率进行χ2检验，也取α=0.05作为检验水平。

术后60d，改良模型组死亡3只，存活12只，存活率80.0%；传统模型组死亡11只，存活9只，存活率45.0%（表1）。与对照组比较，两个模型组大鼠逃避潜伏期明显延长，在120s内穿越平台的次数明显减少（P0.05）（表2）。表1两种血管性痴呆模型大鼠成活率的比较表2两种血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力的改变与对照组比较，*P

2VO模型是血管性痴呆研究中常用的模型之一。有文献报道报道，传统2VO法动物存活率仅为12.5%[3]，我们实验中传统方法的动物存活率也只有45.0%。在实验中，传统模型组大鼠在结扎了双侧颈总动脉后，出现哮鸣音样呼吸，抽搐，动物恢复缓慢，甚至持续昏迷直至死亡。而行改良模型组的大鼠则没有出现这些症状。传统方法存活率较低的原因分析有以下两个：①由于采取正中切口，分离两侧颈总动脉时难免会对迷走神经有所牵拉甚至损伤；②一次性结扎两侧颈总动脉，椎动脉不能迅速代偿以提供脑部所需营养，导致脑部缺血改变严重。改良模型组动物存活率高达80.0%，优越性显而易见，其优点：①采取颈正中线旁切口，利于分离颈总动脉，减少了对迷走神经的牵拉和损伤；②分次结扎，有利于脑部血流重新分配，脑部血供重新建立，机体逐渐代偿适应。③更接近临床上常见的脑部慢性缺血的病理过程。实际观察也发现，改良模型组大鼠术后苏醒较快，苏醒后对其进食和活动的影响也较小。

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【关键词】昂丹司琼；cFos；疼痛

5羟色胺3(5HT3)受体阻滞剂昂丹司琼自问世以来一直作为一种有效的中枢镇吐剂应用于临床，在疼痛方面的研究近来才刚起步，有报道其在疼痛的治疗中起到了一定的作用。本实验以大鼠慢性切口痛模型来验证昂丹司琼是否具有抗伤害作用。

1.1实验材料

1.1.1实验动物

选择健康雄性SD大鼠共32只（由大坪医院野战外科研究所动物房提供），体重200～300g。

1.1.2实验试剂

昂丹司琼纯制剂（山东齐鲁制药有限公司）。

1.2.1动物分组及方法

大鼠随机分为盐水对照组，利多卡因20mg/mL组，昂丹司琼32mg/mL组和假手术组（单纯乙醚麻醉组），每组8只。

1.2.3疼痛模型的制备

将大鼠左后爪消毒，按照Brennan［1］法从足底近端0.5cm处向趾部作长约1cm的切口，用眼科镊挑起足底肌肉并纵向切割，钝性分离，保持肌肉的起止及附着完整。按压止血用50细线缝合皮肤。手术过程约为5min。

1.2.4神经冲动阻滞（三点阻滞法）

生理盐水对照组、利多卡因组、昂丹司琼组参照文献［2］选择三点注射的方法，包括了局部神经阻滞及局部的浸润麻醉。乙醚麻醉下，大鼠踝关节后部的中点和侧面分别注射相应药液0.1mL，阻滞其腓肠神经和胫神经。随后在要做切口的足跖部皮下局部浸润相应药液0.3mL。15min后，行切口痛模型的制作。假手术组给予单纯乙醚麻醉不行神经冲动阻滞。

1.2.5累积痛评分

参照Brennan法［1］待大鼠清醒后观察后爪着地及负重情况，后爪被压迫发白表示负重。后爪翘起不着地，计2分；后爪着地但不负重，计1分；后爪着地并且负重，计0分。每5min观察1次，每次1min，以1min内最常采取的姿势为标准，共观察1h（共记分0～24分）。以术侧足评分减去对侧足评分即为所得累积疼痛评分。

1.2.6Fos免疫组织化学方法

各组大鼠均于创伤后120min，在戊巴比妥钠深麻醉下开胸，自左心室插管至升主动脉。先以150mL生理盐水快速冲去血液，再以含4%多聚甲醛的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS，pH7.4）400mL进行组织灌注固定，持续0.5～1h。取出脊髓，以腰膨大为标志，截取L35节段，移入含30%葡萄糖的4%多聚甲醛中固定至沉底。冰冻冠状连续切片，片厚35μm。切片以PBS液漂洗10min/次，共3次，再以0.3%TritonX100漂洗30min。ABC免疫组化染色。

1.3统计学分析

计量资料以均数±标准差（±s）表示，使用SPSS11.0统计软件，组间采用单因素方差分析。P

2.1累积痛评分

与生理盐水对照组相比，其余三组的累积痛评分均明显降低（P0.05）。假手术组累积痛评分趋近于0，说明单纯的乙醚麻醉不会对大鼠的自发痛行为造成明显的影响，见表1。表1累积痛评分比较

生理盐水组假手术组利多卡因组昂丹司琼组累积痛评分（略）注：*与盐水组相比，P

2.2FLI记数

在显微镜下(×100)观察大鼠患侧脊髓内出现Fos活性特征(胞核有黄色颗粒)的细胞，根据Rexed分层法记数脊髓背角各板层中Fos阳性细胞(FLI)的数目。脊髓背角Ⅰ、Ⅱ层FLI计数各组分别为：生理盐水组58±4（图1，图2）；昂丹司琼组29±4（图3，图4）；利多卡因组24±5（图5，图6）；假手术组5±2（图7，图8）。与生理盐水组相比，其余三组的FLI计数均明显降低（P0.05）。假手术组脊髓背角cFos几乎没有表达，说明单纯的乙醚麻醉不会对大鼠的脊髓背角cFos的表达造成明显的影响，见表2。表2各组术侧背角FLI阳性神经元数目比较（略）

cFos是众多即刻早期基因之一，多种因素刺激均可诱导cFos活化，迅速一过性表达Fos，并进一步诱导靶基因表达，介导其他缓慢的效应。因此，大鼠腰段脊髓背角Fos蛋白是评价药物阻滞麻醉效果的理想指标。

本实验采用了三点阻滞法来阻断切口痛模型的疼痛信号传入。PogatzkiEM等［6］于2002年首次报道了三点阻滞法在大鼠切口痛模型的应用，即为了完全阻滞大鼠足跖部切口神经冲动的传入，采用了局部神经阻滞及局部的浸润麻醉。在切口痛模型制作前15min，于大鼠踝关节后部的中点和侧面分别注射0.5%的布比卡因0.1mL，阻滞其腓肠神经和胫神经。随后在要做切口的足跖部皮下局部浸润布比卡因0.3mL。注射后的4h内，观察到大鼠的痛行为学反应明显减轻，同时脊髓背角WDR神经元的单位放电频率的增幅也较单纯切口痛模型组明显减少，而盐水对照组则没有此现象，说明了这种阻滞方法的有效性。XiaohuiS等［7］也已证实了，在制作切口痛模型前通过三点阻滞法给予局部麻醉剂布比卡因和利多卡因，均能明显的减少1h后大鼠脊髓后角浅层Fos的表达。

钠通道阻滞剂如局部麻醉药应用后能抑制外周神经的动作电位的产生及幅度，从而降低向中枢神经系统传入的冲动，起到止痛的目的。昂丹司琼因被证实有钠通道的阻滞作用，因此，本文通过局部给药的方式，并与局部麻醉药对照，观察昂丹司琼局部应用是否能通过其对钠通道的阻滞作用，降低动作电位的发生频率和幅度，从而达到降低切口痛模型伤害性刺激传入的强度，达到镇痛的目的。本实验的结果证实，在痛行为学的评定数据比较中，利多卡因与昂丹司琼均能明显的降低大鼠切口痛模型后的自发痛程度，且昂丹司琼组与利多卡因组相比没有显著的差异。同样，利多卡因与昂丹司琼均能明显的降低大鼠切口痛模型后的脊髓背角cFos的表达，并且昂丹司琼组与利多卡因组相比也没有显著的差异。这说明提前局部注射昂丹司琼能象局麻药利多卡因一样降低因切口痛模型所引起的伤害性刺激的传入，并且两者的效果在本实验中没有发现明显的区别。

本实验在动物模型上验证了昂丹司琼对急性切口痛模型的伤害性刺激传入的阻断作用，为昂丹司琼在疼痛治疗中的应用提供了一定的依据。同时以昂丹司琼为代表的5HT3受体阻滞剂或与之结构类似的药物因其对5HT3受体和钠离子通道的双重阻滞作用，可作为一种新型局部麻醉药物的研究方向，为开发出全新意义的局部麻醉剂提供思路。

［1］BrennanTJ，VandermeulenEP，GebhartGF.Characterizationofaratmodelofincisionalpain［J］.Pain，1996，64:493501.

［2］GregoryRE，EttingerDS.5HT3receptorantagonistsforthepreventionchemotherapyinducednauseaandvomiting:acomparisonoftheirpharmacologyandclinicalefficacy［J］.Drugs，1998，55:173189.

［3］ReddyMS，ChenFG，NgHP.Effectofondansetronpretreatmentonpainafterrocuroniumandpropofolinjection:arandomised，doubleblindcontrolledcomparisonwithlidocaine［J］.Anaesthesia，2001，56:902905

［4］MullerW，StratzT.5HT3receptorantagonistsintherapyofrheumaticdiseases［J］.ZRheumatol，2003，62:3941.

［5］YeJH，MuiWC，RenJ，etal.Ondansetronexhibitsthepropertiesofalocalanesthetic［J］.AnesthAnalg，2004，85:11161121.