测序技术助力国家致病菌识别网对细菌性传染病的监测

2017年,国家致病菌识别网(ChinesePathogenIdentificationNet,简称ChinaPin)建立。依托国家、省、市、县四级疾控中心的实验室,通过收集病原菌的基因数据,建立以实验室为基础、基因数据和基础流行病学数据为支撑的“实验数据互联网”模式,来实现细菌性传染病病原检测鉴定、病原和流行特征分析、暴发疫情早期发现、病原学监测预警、溯源及风险评估等。

图1.国家致病菌识别网工作流程。

病原微生物全基因组测序/宏基因组测序

技术在致病菌识别网中的应用示范案例

2022年2月,北京市昌平区出现一起聚集性感染事件,患者以高烧(最高达41℃)和腹泻为主,其他症状包括头痛、呕吐、恶心、咳嗽、冷漠、黑便,甚至肠道出血,这些病例均住在乡村的同一出租公寓内。北京市疾病预防控制中心联合昌平区疾病预防控制中心迅速开展了详细的流行病学调查,并对患者家庭用水开展了细菌分离、全基因组测序和耐药分析,最终确定了这是一起由泛耐药伤寒沙门菌经水体传播引发的伤寒暴发流行。

图2.北京市一次广泛耐药伤寒暴发的流行病学曲线。

图3.5株泛耐药伤寒沙门菌的质粒图。

图4.mcr基因型、质粒类型及与宿主菌的关系。

霍乱弧菌由200多个血清群组成。迄今为止,只有O1和O139血清群霍乱弧菌引起霍乱长时期流行。非O1/非O139群霍乱弧菌只引起零星感染,很少引起暴发。

但是近年来,我国由非O1/非O139霍乱弧菌引起的腹泻呈上升趋势。2020-2021年,广东就发生了两起非O1/非O139霍乱疫情,分别报告137例和79例感染者。广东省疾控中心从两起疫情中,分别分离到32和34株霍乱弧菌。通过对66株霍乱弧菌进行全基因组测序,并使用致病菌识别网集成的数据分析流程进行系统发育分析、毒力基因分析、血清群基因簇分析等,最终这些霍乱弧菌被确定为O5血清群。这是全球第一次报道由O5群霍乱弧菌引起的暴发。同时,基于全基因组序列的比对分析表明两起疫情分离的霍乱弧菌中97%(64/66)呈紧密聚类。由于O1和O139血清群之外的特异性诊断血清很难获得,不能通过传统的血清群鉴定方法进行非O1/非O139群霍乱弧菌的血清群鉴定,全基因组序列信息在血清群的鉴定方面发挥了非常重要的作用。自2012年以来,广东每年都报告由非O1/O139群霍乱弧菌引起的病例。作者认为我国目前的霍乱防控中,应注意针对非O1/O139群菌株的监测和新血清群菌株的发现与鉴定。

在流行病中,以新型冠状病毒感染为代表的人畜共患病疫情在全球范围内对养殖业和人类健康都造成了非常大的威胁。据统计,人畜共患病每年会造成10亿例感染以及百万例死亡。过去的30年,有30种新发的病原菌感染人类,其中75%来自于野生动物。对野生动物进行病原学调查,可以及时发现潜在的人畜共患病病原菌及其流行情况,为公卫专家提供科学决策依据,在其造成大规模危害之前,提前干预、将损失降至最低。

图6.CLOSS模型野外采样、基因组测序及病原检测流程。

[1]BiaoKan.PerformingLaboratoryNetworkSurveillancetoMonitortheEmergenceandSpreadofInfectiousDiseases[J].ChinaCDCWeekly,2022,4(12):233-234.doi:10.46234/ccdcw2022.057

[2]BixiaKe,BoPang,DongmeiHe,JingXu,QiuxiaChen,JunhuaLiang,JialiangChen,ZhenpengLi,HaijianZhou,XiaolingDeng,BiaoKan.PhylogeneticAnalysisofSerogroupO5VibriocholeraethatCausedSuccessiveCholeraOutbreaks—GuangdongProvince,China,2020–2021[J].ChinaCDCWeekly,2022,4(12):238-241.doi:10.46234/ccdcw2022.061

[3]MiaoLu,QingqingChen,XinchengQin,YongLyu,ZhongqiuTeng,KunLi,LiangYu,XiaojingJin,HongweiChang,WenWang,DayinHong,YongSun,BiaoKan,LeiGong,TianQin.AnaplasmabovisInfectioninFeverandThrombocytopeniaPatients—AnhuiProvince,China,2021[J].ChinaCDCWeekly,2022,4(12):249-253.doi:10.46234/ccdcw2022.053

[4]XinLu,YaoPeng,YuanyuanGeng,HongqunZhao,XiaonaShen,DongmeiLi,ZhenpengLi,LiangLocalizationofSamplingandSequencingforZoonoticPathogenIdentificationintheFieldMonitoringUsingMobileLaboratories[J].ChinaCDCWeekly,2022,4(12):259-263.doi:10.46234/ccdcw2022.059

[5]YuWang,DanLu,YingyingJin,HuanxinWang,BingLyu,XinZhang,YingHuang,GaolinShu,BaiweiLiu,ChangyingLin,HaoZhao,MingqiangZhao,LingyuShen,ZhiyongGao,DaitaoZhang,QuanyiWang,MeiQu,LeiJia.ExtensivelyDrug-Resistant(XDR)SalmonellaTyphiOutbreakbyWaterborneInfection—BeijingMunicipality,China,January–February2022[J].ChinaCDCWeekly,2022,4(12):254-258.doi:10.46234/ccdcw2022.062

[6]ZheLi,ZhenpengLi,YaoPeng,XinLu,BiaoKan.Trans-RegionalandCross-HostSpreadofmcr-CarryingPlasmidsRevealedbyCompletePlasmidSequences—44Countries,19982020[J].ChinaCDCWeekly,2022,4(12):242-248.doi:10.46234/ccdcw2022.058

[7]ZhigangCui,HaijianZhou,ShuangMeng,XiaoliDu,JianguoXu,BiaoKan.ChinesePathogenIdentificationNet:ALaboratoryNetworkforSurveillanceandResponseofBacterialInfectiousDiseases[J].ChinaCDCWeekly,2022,4(12):235-237.doi:10.46234/ccdcw2022.060

THE END
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2.学协会:高通量宏基因组测序技术检测病原微生物的临床应用规范化...2.靶向基因测序:基于高通量测序技术的病原微生物检测,除无偏倚的mNGS外,还包括原核生物的16S rRNA基因、真菌(5S rRNA基因两端的ITS1、ITS2及25-28S rRNA基因中的D1及D2区等)以及特定病原微生物靶基因等[17]。如怀疑沙眼衣原体可选momp(主要外膜蛋白基因),怀疑结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)可选...https://jsp.365heart.com/detail/9E162530-5B77-4B83-A6CD-88D52BEFC3D5
3.指南与共识高通量宏基因组测序技术检测病原微生物的临床应用...宏基因组下一代测序(mNGS)技术直接针对标本中核酸无偏倚检测病原微生物序列。但是,mNGS需经标本前处理、核酸提取、文库制备、上机测序、数据库比对、报告生成及结果解读等一系列过程,对技术平台及人员素质要求较高。为规范mNGS技术在感染性疾病诊断中的应用,提高危急重症、疑难感染性疾病和新发突发传染病的救治水平,在...https://www.hainmc.edu.cn/ecmd/info/1471/10704.htm
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6.华大基因PMseq?病原微生物高通量基因检测可一次性检测上万种病...这一体系旨在为科学决策提供依据,通过加强微生物耐药监测与报告,及时掌握微生物耐药情况,从而制定和调整防控策略,以遏制微生物耐药的发展与扩散。在此背景下,针对微生物的耐药机制,华大基因推出PMseq?病原微生物高通量基因检测,PMseq?病原微生物高通量基因检测对混合感染具有很强的识别能力,且在耐药方面,PMseq?...https://www.zealer.com/detail/1559272
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10....500基因肿瘤高通量基因测序20参照国家发展计划委员会(计价格[2002]1980号)《招标代理服务收费管理暂行办法》规定的收费标准,由中标人须向招标代理机构缴纳中标服务费。以费率或单价进行报价的项目,计费基数为预算金额。 七、公告期限 自本公告发布之日起1个工作日。 八、其它补充事宜 http://www.ccgp-beijing.gov.cn/xxgg/sjzfcggg/sjzbjggg/t20220516_1426742.html
11.靶向第二代测序技术在病原体检测中的作用https://www.hanspub.org/journal/acm https://doi.org/10.12677/acm.2024.141101 靶向第二代测序技术在病原体检测中的作用 罗宁*,何泰瑜,康娟,张大志# 重庆医科大学附属第二医院感染科,重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆医科 大学病毒性肝炎研究所,重庆 收稿日期:2023年12月17日;录用日期...https://www.hanspub.org/journal/PaperDownload.aspx?paperID=79347
12.临床NGS数据中的病原微生物检测病原高通量检测技术,基于宏基因组“撒网式”的检测方法,通过微生物专用数据库比对和智能化算法分析,全面覆盖真菌、细菌、病毒、寄生虫等病原微生物,针对疑似危重或不同感染症候群,可以快速实现感染性疾病的精确诊断。 诚然,基于高通量测序技术的病原菌具有其显著的优势 ...https://www.yunbios.net/detection-of-microorganisms_in_clinicalNGSdata.html