国内现普遍采用的是环氧树脂包埋法，可直接脱水后包埋，也可将小片组织或半薄切片贴在载片上，将充满环氧树脂的明胶囊倒置于切片上聚合、硬化，进行原位包埋。
（二）低温包埋
常规树脂包埋由于需高温聚合等处理程序，组织抗原性可能全部或部分丢失。因此，在免疫电镜技术方面，国外不少实验室已开始采用低温技术如低温包埋和冰冻超薄切片等，后者需配备冰冻超薄切片机，且技术难度较大，不如低温包埋法易推广。低温包埋剂的研究开始于60年代，80年代免疫细胞化学技术在电镜水平上的广泛的应用，为低温包埋剂的实验研究开辟了广阔的领域。国内已有较多的应用报道，国内一些实验室已开始摸索。作为低温包埋剂的多为乙烯系化合物如乙二醇甲基丙烯酸酯（Glycolmethacrylate,GMA）,Lowicryls,LRWhite和LrGold等，目前国外生产厂家有PolysciencesINC,Reichert—Jung和LKB等系列产品。现将常用的几种低温包埋剂及其应用简单介绍如下：
1．Lowicryls是丙烯酸盐（acrylate）和甲基丙烯酸盐（methacrylate）化学物质，包括K4M、HM20、K11M、KM23等系列产品（PolysciencesINC），其特点是能在低温下保持低粘度（K4M：--35℃；HM20：-70℃；K11M、HM23：-60℃～-80℃）和具有在光照射（紫外光，波长360nm）下聚合的能力，它的光聚合作用与温度无度。其中K4M和K11M具有亲水性，特别适合于免疫细胞化学的应用，因它能较好地保持组织结构和抗原性，减少背景染色。HM20和HM23具疏水性，能产生高反差图像，适用于扫描、透射电镜和暗视野观察切片的制作。所有这些种类的低温包埋剂都适用于冰冻置换技术。K4M的应用和报道较多，现侧重介绍如下：
（1）包埋剂的配制：商品提供的Lowicrys包埋剂由三个部分组成：单体（Monomer），交联剂（Crosslinker）和引发剂（Initator）。调整单体和交联剂的比例，增加交联剂的量，组织块的硬度增加。中等硬度的组织块，其配制比例如下：
K4M：单体17.30g
交联剂2.70g
引发剂0.10g
K11M：单体19.00g
交联剂1.00g
作者的经验，可用微量注射器加针头抽取后，注入棕色的玻璃容器避光，用玻棒轻搅3～5min或用一小管通入液氮气泡以搅拌之。勿过分搅拌，以防氧的气泡进入包埋剂中。
（2）生物样品处理程序（Lemanski等1985）
①动物麻醉取材，以多聚甲醛—赖氨酸—过碘酸钠在9℃固定2h。
②磷酸缓冲液含7%蔗糖，pH7.2,冲洗过夜，0℃
③0.1mol/L磷酸缓冲液，pH7.2,冲洗，0℃
④脱水：65%乙醇，1h,0℃
80%乙醇，2h,-35℃
LowicrylK4M：80%乙醇=1：11h-35℃
LowicrylK4M：80%乙醇=2：11h-35℃
100%LowicrylK4M1h-35℃
100%LowicrylK4M过夜-35℃
⑤包埋：新鲜K4M置于胶囊内，将组织移入，在-30℃～-40℃以紫外线灯波长360nm2×15W（LaddResearchIndustriesBurlingtonVT）相距30～40cm照射24h使之聚合。如为100W灯泡，照射距离应大于85cm。聚合后的胶囊移至室温在紫外线下继续照射2～3天，可增加其硬度，便于切片。
（3）免疫染色
①切片（厚50～70nm）贴在金网或覆有碳膜的镍网上。所有下列步骤在室温、湿盒内进行。所有溶液需经微孔滤纸（0.25～0.45μm）滤过。
②正常羊血清30min。
③第一抗血清（PBS稀释），37℃2h。
④可用烧杯法（或塑料壶喷洗法），以镊夹镍网在第一烧杯中洗荡30min，然后在第二烧杯中洗荡1h。
⑤正常羊血清30min。
⑥第二抗血清（胶金标记抗体）以正常羊血清稀释为1：1，以镍网置于血清滴上孵育1h。
⑦冲洗如④。
⑧覆于2%OSO4水溶液上，30min。
⑨冲洗如④。
⑩干燥后在电镜下观察。
（4）LowicrylK4M快速包埋染色法（Altman等1984）
①包埋剂的配制：单体13g
交联剂2g
引发剂75mg
②生物样品处理：除了聚合这一步骤外，下列所有步骤都在20℃进行。
1）组织用3%戊二醛—3%多聚甲醛磷酸缓冲液，pH7.4,在20℃固定1～2h。用磷酸缓冲液清洗后进行脱水。
2）脱水：在50%、75%和90%的双甲基甲酰胺（Dimethylformamde,DMF）内系列脱水，每步10min。
3）浸透：LowicrylK4M:DMF=1:210min
LowicrylK4M:DMF=1:115min
100%LowicrylK4M20min
100%LowicrylK4M25min
4)包埋与聚合：组织移入装满K4M的胶囊中，以紫外线灯照射聚合（紫外线灯条件同上），灯和组织距离10cm,4℃照射45min，组织块在室温进行超薄切片（切片时水槽内水面应略低以防浸湿组织块的切面）。
5）以覆有碳膜的镍网捞取切片。
6）免疫染色。
Lowicryls应保存在暗处，-4℃，该物质有刺激性，在配制时应戴手套，以免触及皮肤。在通风橱内操作，以免蒸气刺激眼睛。如触及皮肤和眼睛，应立即以水冲洗局部，氧化重金属如KmnO4能与包埋剂作用而影响染色效果，以不用为佳。
2．LRWhite和Lrgold是一种混合的丙烯酸单体的透明树脂，具有极低的粘度（8cps）和较强的嗜水性，因此有较强的穿透性，有利于抗体（或抗原）和免疫化学物质穿过LR树脂，达到组织结合部位。在免疫细胞化学的光镜（半薄切片）和电镜水平应用都具有良好效果。标本脱水至70%乙醇即可，能较好地保持抗原性。Lrwhite和Lrgold在国外提供厂家有Poly－sciencesINC等，Lrgold是一种光引发低发低温聚合的包埋剂，对于免疫细胞化学特别适用，能最大限度地保持组织的抗原与抗体活性，其最佳光聚合温度在-25℃，在聚合后呈现金黄色，因而得名。Lrwhite可在热和冷两种情况下聚合，热聚合在60℃，24h，冷聚合在-25℃，需加加速剂（accelerator）调整配制比例。生物样品处理与免疫染色等同常规树脂切片。
（1）GMA单体溶液在出厂时都加有氢醌类稳定剂，用前须以每25ml单体溶液加一匙活性碳，在振荡器上振荡5min，过滤以除去氢酯，以免影响聚合。
（2）包埋剂的配制：
a.100%GMA66.5ml
N—甲基丙烯酸丁酯28.5ml
5%乙烯二甲丙烯酸酯5.0ml
1.5%过氧体苯甲酰1.0g
1.0%PEG4001.0ml
b.A液：
GMA单体液90ml
PEG4005～9.4ml
过氧化苯甲酰0.2～0.69g
搅拌溶解后置棕色瓶内；4℃保存。
B液：
PEG40020ml
二甲基苯胺1ml
应用时A：B按10：1比例充分混合（张承志等1986）。
（3）生物样品处理：组织固定可用PLP液或1%戊二醛溶液（磷酸缓冲液配制，pH7.4）。经系列酒精脱水至新鲜的GMA单体溶液中浸24h。以上步骤可在室温或4℃进行。
（4）包埋聚合：组织移入盛潢包埋液的胶囊内，先放在真空泵内以去除包埋液中的气泡，然后在4℃，以紫外线灯（波长360nm）在距胶囊底部10～20cm处进行照射12～16h，以手指捏胶囊试其硬度可知聚合是否完成。在聚合完成后，将胶囊丢入热水中以去除胶囊外壳。
低温包埋剂常用于铁蛋白或胶体金免疫电镜技术的包埋后染色。能检出应用环氧树脂包埋难以检出的多种抗原。