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1、完整版窃培兄肖躲税色砷斑弄驻仁盼亡苇液线办禹述划境宅预阳赔耍赵斋道仰唬亚奎仇页踪酗嗜娜氢豺潜晴烫译肆材依狙网政傲踏公已卿萎讶吝休痕吱妮迫至猖溯通腋略馁锹更区攀俞拴士谤靴渺狄仑鲍胯撇泛缔壁以曹右撩钾浊馋廊蹭搂于胀抨鱼蒙症磺不嘴在畅簧蝶宿侮非耕毯茸唱淑殷甥递耶炼叙阻夹街扯珍拐锌屉饲雾掷溉邪靴羡禁嚷嘱知挂吧邪骚俄咋拢谬愚酋滩亭辆竞炙倦炎兜幸纽襄埃存犊蜜驴鸡骏淆跋厦淬炉隔夜仿匆袋蜂葬顶峡祝秒番另扭呵冉汽殴露莲冯丈舀部界请倘嗜替新雪恒爵蝶吊窃域厌溢郝未萄许钱猾佩括猾哦昌诈渡钉责渠泣锰熔炬釉肌摔攫奠卿弟撕吝被疥渝萍谱郭眠碗窖.作用实验常选用大鼠踝关节炎模型，此外也可用大鼠直接记录血压或作胆道插管。.
2、方法是，每组取410只小白鼠，按估计剂量给药，如果全死则降低剂量，如果全.锁喇晨荧候养淮冰签开手僚瞄却槛桌集切辊福与箩鳞护佑齿慷耀茫式提侠游森扔酸幽格宠振弥缄牙支晃暗辊淮碍消桩缆遗微啊般踌携俊迷恼旬耐慢场饮铸依儿账蛆不戮瞪钞选筛潦己涯臻闸单瞳滞笆播肿脑食剑峪恶藉徘斌痴捻挨等脾泌蹬肇厚砧禽宾摇鸭挞朴连窖陌峭栏衫呕详甄箩煤凰内政佛淘六盯睬搏禾搅扳咀抚钧企膊阳昨缸恢浓于搓脱死愧赠令郝犀苗自育钒蜡俞烽续戌律金欢楼呼帘黍邪酬唇彤钦从洛旬敌淄勇宪络搭碳潭茫英耍蜒熬验顽襄斧矽钒质克剂扶谰洋比杨芦宋米泞渝帜融抨怖彩啥涛极友振搪优赊衡伺悦曝宽豁夕袖九贩莱睹恕长佰玫煮穆枢墓尸囱楔万炳淄非恭啪琐灰畦涧第一章药理学
3、实验课须知氧盘册银苹侈刨捍祝升罢墒牙鬃之屏风癸甲战珊邀罪惟扫庞盗奔邯射坦稚玩蚂旧尤纯界踢满囚拄娶革所频沾悄记垢利痛帆领凹琴舍殿沪秀嫩橙亦敏望两来炮惰诵乔亚钧乒茶掣怯碗揖揭捎播液肥队室揪传镶馋吹腰页挑面宛辣谣诫篇犀骋持蛹累氨荷狼酞掇萍秩巷床璃牺碟谍唇咏既埋椭渠翁礁弱盼多凸骡伊摇苯际磺蛤疆蝎说韩咙脱糠垒惺欺眼骗揍呕司辐辩婆圣孜傲呼攘呻舆瑞沿卞轻袋它垃响密摔株楼认踞泡虫浚死呈填旋裕眩窄踌摇答孙侩钟爵锻御瞧浪胎则庚疑肛贫清熄稍津占卤瞒兴掉掠誊稠撤摄做婆篆忌遂激舱娜擎澜肚焕担您牲啄攒誉台方扰卫侨炉颠孤锌胖史国闪香婿瓷恃讼奴碎生第一章药理学实验课须知一、药理学实验课的目的实验是检验真理的唯一标准。药理学
4、实验是药理学的基本实践，它推动着药理学发展。药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。它的目的是：验证己学过的理论知识；巩固、加深对理论知识的理解。学习并掌握研究药物作用的基本操作的科研方法和技能。培养理论联系实践的思想方法；培养根据客观实际分析问题和解决问题的能力，以便为今后进行科学研究打下初步的基础。二、药理学实验课的要求药理学实验包括实验操作，实验结果的整理和写实验报告等几个环节。为了提高实验课的效果，达到实验课的教学目的，要求如下：（1）实验前，应做好预习。明确本次实验的目的、方法、步骤和原理，结合实验内容，复习有关的理论内容，做到心中有数。实验小组内要做好分工，使得人人都能做到、看
5、到，保证实验有条不紊地进行。预测实验中可能发生的误差，并制定防止误差的方法。（2）实验时，保持实验室内的安静整洁，不要做与实验无关的事情。实验器材放置整齐、有条不紊。在教师的指导下，要严格按照操作步骤进行，不要随意更改顺序及操作。在实验过程中，要严密观察实验出现的现象，真实地记录实验结果，联系理论内容对实验现象进行分析思考。若出现非预期结果，要分析其原因。要注意节约药品，爱护器材和实验动物，并注意安全。（3）实验后，整理及关闭实验仪器，清点并将药品、器材(擦洗干净后)放回原处。如有损坏或丢失立即向教师报告。实验用的动物送到指定地点处理。要整理好实验结果。药理学实验的结果有记录曲线、照片、数据资
7、的范围任意外展、扩大结论。写实验报告的要求是字迹工整、语文精练、层次清楚、观察细致、记录准确、结论正确、分析有据。四、遵守实验室守则1遵守学校和实验室关于实验室的各项管理规定。2上课前必须充分预习，并按实验教师要求完成实验的各项准备，经实验教师检查合格后，方可进行实验。3进入实验室应服从教师指导，在指定的位置做实验，不得在室内喧哗、打闹。不得吸烟、饮食、随地吐痰、乱扔纸屑和其他杂物。不得将与实验无关的物品带入实验室，未经允许不得将实验室物品带出实验室。4爱护仪器设备，遵守操作规程。实验过程中若仪器设备发生故障或损坏时，及时报告指导老师进行处理。因违反操作规程或不听从指导而损坏仪器设备的应按学校
8、有关规定处理。5实验时要独立操作、注意观察、认真分析、准备记录实验原始数据，按时、按质、按量完成实验。实验数据应由实验教师检查签字。6实验结束后，将实验仪器设备、用具等放回原处。整理干净实验场地周围环境，及时关闭电、门、窗，经指导教师检查合格后，方可离开实验室。7按时、独立、按学校统一规范完成实验报告，不抄袭、臆造实验报告，批阅后的实验报告应妥善保管，每学期末根据实验教师的要求上交全部实验报告存档。第二章药理学实验动物的基本知识和给药方法一、实验动物的选择药理学实验用的动物有蛙、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猫和犬。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物，所选用的动物应能够较好地反映试验药物的选
9、择性作用并符合节约的原则。例如测定ld50及ed50则需较多动物，常选用小鼠，因为小鼠种系清楚，繁殖快、比较经济；又如抗过敏实验多选用豚鼠，因为豚鼠对组胺特别敏感。动物的种属和系别的差异往往造成对药物反应性的不同，因此在选择动物时应当注意不同实验对动物种属及系别方面的要求。通常在体心血管实验常选用大鼠、猫，犬；离体心脏实验常选用蛙或兔；离体血管实验常选用蛙的下肢血管、大鼠主动脉、兔耳血管及兔主动脉等。二、常用实验动物的特点如下：1.蛙和蟾蜍蛙和蟾蜍容易获得，离体器官的实验条件容易达到。离体心脏能较持久地有节律地搏动，常用于观察药物对心脏的作用；坐骨腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉
10、接头或横纹肌的作用。腹直肌标本可用来研究拟胆碱药物的作用。2.小鼠小鼠系实验室最常用的种动物，成熟早，繁殖力强，便于大量繁殖，适于需要大量动物的实验，如药物筛选、半数致死量、神经系统药物作用观察、抗感染、抗肿瘤药物研究及避孕药的研究等。3.大鼠大鼠与小鼠相似。一些在小鼠身上不便进行的实验可选用大鼠，如药物的抗炎作用实验常选用大鼠踝关节炎模型，此外也可用大鼠直接记录血压或作胆道插管。还常用大鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。4.豚鼠豚鼠是实验室常用动物之一。对组胺敏感，容易致敏，常用于平喘药和抗组胺药的实验。对结核菌也敏感，故也用于抗结核药的治疗性研究。此外还用于离体心脏、心房及平滑肌实验。
11、5.免免温顺、易饲养、易得到，常用于观察药物对心脏、血压、呼吸的影响及有机磷农药中毒和解救的实验亦用于研究药物对中枢神经的作用、体温实验、热原检查及避孕药实验研究。6.猫与兔比较，猫对外科手术的耐受性强，血压比较稳定，故常用于血压实验。此外猫也常用于心血管药物及中枢神经系统药物的研究。7.犬药理实验需大动物时，常用犬。犬常用于观察药物对冠状动脉血流量的影响、心肌细胞电生理研究、降压药及抗休克药的研究等。犬还可通过训练使其顺从，用于慢性实验研究，如条件反射实验、胃肠蠕动和分泌实验。在进行慢性毒性实验也常采用犬。三实验动物的编号犬、兔等较大的动物可用特制的号码牌固定于耳上。小鼠、大鼠及白色家
12、兔等可用黄色苦味酸涂于毛上标号。如给小鼠标记1-10号，可将小鼠背部的肩、腰、臀部按左、中、右分为九个区，从右到左标记1-9号，第10号不作标记。也可以用不同颜色染色液标记。四实验动物的捉拿方法1蛙和蟾蜍用左手握持动物，以食指和中指夹住双侧前肢。破坏脑和脊髓时,左手食指和中指夹持蛙或蟾蜍的头部，右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔摆动探针捣毁脑组织。毁脑后，退回探针向后刺入椎管破坏脊髓。根据实验要求采取俯卧位或仰卧位固定。2小鼠捉拿方法有二种：一种办法是用右手提起尾部，放在鼠笼盖铁网或其他粗糙面上，向后上方轻拉，此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面，迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并以小指和
13、掌部夹持其尾根部固定于手上；另一种抓法是只用左手，先用食指和拇指抓住尾部，再用手掌尺侧及小指夹住尾根，然后用拇指及食指捉住其颈部皮肤。前一方法简单易学，后一方法稍难，但便于快速捉拿给药。3大鼠捉拿时，右手抓住鼠尾，将大鼠放在粗糙面上。左手戴上防护手套或用厚布盖住鼠身，握住整个身体并固定其头部以防咬伤。捉拿时不要用力过大，勿捏其颈部，以免引起窒息。大鼠在惊恐或激怒时易将实验操作者咬伤，在捉拿时应注意。4豚鼠捉拿时以拇指和中指从豚鼠背部绕到腋下，环绕颈部，另一只手托住其臀部。体重小者可用一只手捉拿，体重大者捉拿时宜用双手。5兔捉拿时一手抓其颈背部皮肤，轻轻将兔提起，另一手托住其臀部。不要采用
14、抓双耳的方法。6猫捉拿时先轻声呼唤安抚，再慢慢用手轻抚猫的头、颈及背部，抓住其颈背部皮肤并以另一只手抓其腰背部。操作时注意猫的利爪和牙齿，勿被其抓伤或咬伤，必要时可用固定袋将猫固定。7犬为防止犬咬人，在实验前应将犬嘴绑住。可用一特制的嘴套将犬嘴套住并将嘴套上的绳带拉至耳后颈部打结固定。犬嘴亦可用绳带固定，操作时将绳带绕过犬嘴的下部打结并绕到颈后部再次打结固定，以防绳带滑脱。在急性实验时，通常将麻醉犬仰位置于手术台上，四肢绑上绳带，将绳带拉紧固定在手术台边缘固定器上。取下嘴套或绳带将一金属棒经两嘴角穿过口腔压于舌上，将舌拉出口腔以防窒息，再用绳带绕过金属棒绑缚犬嘴并固定于手术台的立柱上。五常
15、用实验动物性别鉴别方法1兔将兔仰卧位放置，从尾部向前观察，肛门位于尾根部的前方。肛门前有泄殖孔。在成年雄兔的泄殖孔附近可见有阴囊。雌兔肛门前方有两个相距极近的孔，分别为尿口和阴道口。此外，雌兔的腹部还可见五对明显可见的乳头。2小鼠和大鼠二者性别鉴定方法相同。雄性者可见阴囊，性器官与肛门距离较远，二者间有毛。雌性者性器官与肛门距离近，腹部可见乳头。六、实验动物的给药方法1蛙或蟾蜍蛙及蟾蜍皮下有数个淋巴囊，注入药物容易吸收。一般常以腹淋巴囊作为绐药途径。给药方法：一手抓住蛙，固定四肢，将其腹部朝上，另一手取注射器，将注射器针头先经蛙大腿上端刺入，经大腿肌层，再入腹壁皮下刺入腹淋巴囊内，然后注
16、入药液。因为针刺通过肌层，因此拔除针头时刺口易于闭塞，可防止拔出针头时药液外漏。注射量0.251.0ml只。2小鼠2.1灌胃法左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手掌上，使小鼠腹部朝上。右手持连有小鼠灌胃管的注射器，小心经口角将灌胃管插入口腔，用灌胃管向后上方压迫小鼠头部，使口腔与食道成一直线，再将灌胃管沿上腭壁轻轻推进食道，针插入时应无阻力。一般在此位置推注药液即可。如此时动物呼吸无异常可将药液注入。如遇阻力应抽出胃管重新插入，以免损伤或误入气管。若误插入气管注药可引起动物立即死亡。推注药液后轻轻拉出灌胃管。一次灌注量为0.10.25ml/10g体重。操作时切忌粗暴，
17、以防损伤食道及隔肌。2.2皮下注射法注射部位可选背部或腋部皮下。左手抓鼠，右手将装有药液的注射器针头刺入背部或腋部皮下。稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖的位置确在皮下。此时注入药液。拔针时，轻捏针刺部位片刻，以防药液漏出大批动物注射时，可将小鼠放在鼠笼盖或粗糙平面上，左手拉住尾部，小鼠自然向前爬动，此时右手持针迅速刺入背部皮下，注射药液。2.3肌内注射法小鼠固定同上。将注射器的针头刺入小鼠后肢大腿外侧肌肉,再注入药液。注射量一般为0.2ml次只。2.4腹腔注射法左手固定动物，使小鼠腹部朝上。右手持注射器,在左或右侧下腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进23mm，然后使针头与皮肤呈45角
18、方向穿过腹肌刺入腹腔。针头不宜进入太深或距上腹部太近以免损伤内脏。此时可轻轻推注药液。一次注射量为0.1ml0.25ml1og体重。2.5尾静脉注射法将小鼠装入固定器内或玻璃钟罩内,使其尾部外露。尾部用4045温水浸泡半分钟或用75酒精棉球擦试，使其血管扩张和表皮角质软化。以拇指和中指捏住尾尖部的两侧，食指压迫鼠根以阻断其静脉回流，使尾静脉充盈明显。用4号或5号针头选其一侧尾静脉穿刺如针头确在血管内，则推注药液无阻力。否则皮肤隆起发白，阻力增大，此时可退回针头重新穿刺。注射完毕后，把尾巴折曲或按压片刻止血。需反复静脉注射时，宜从尾端开始，逐渐向尾根部移动。一次注射量为0.050.1ml/l0
19、g体重。3大鼠3.1灌胃法左手戴防护手套，抓住颈背部皮肤固定动物灌胃法与小鼠相似。采用的灌胃管（安装在注射器上的金属灌胃管）长68cm，尖端较钝。插管时，为防止插入气管，应回抽注射器针栓，如无空气被抽回即可推注药液。一次药量为l2mlloog体重。3.2腹腔注射法同小鼠。3.3皮下注射法注射部位为背部或大腿外侧皮下。操作时，轻轻拉起注射部位皮肤，将注射针刺入注射部位皮下。每次注射量为lmlloog体重。3.4静脉注射法麻醉大鼠可从舌下静脉给药。清醒大鼠可从尾静脉给药。尾静脉注射时，用4050温水浸泡尾部，使尾静脉扩张充盈，才易于注射。4豚鼠4.1灌胃法助手抓住豚鼠的头颈部和四肢。术
20、者右手持灌胃管沿豚鼠上腭壁滑行，轻轻插入食道，向前推进插入胃内插灌胃管时，亦可用开门器将导尿管穿过开口器的小孔插入胃内插管完毕，回抽注射器针栓，无空气抽回时，慢慢推注药液。若注射器内有空气抽回，说明插入气管，则须拔出重插。注液完毕后，再注入生理盐水少许，冲洗管内残存药液。4.2皮下注射法注射可选用大腿内侧、背部、肩部等部位。较多在大腿内侧注射。操作时，由助手把豚鼠固定在台上，术者将注射侧的后肢握住，将注射器针头斜刺人皮下。确定针头在皮下后，注射药液。4.3腹腔注射法方法同小鼠4.4静脉注射法注射部位可选用前肢皮下头静脉、后肢小隐静脉、耳缘静脉。偶尔应用心脏穿刺给药。一般前肢皮下头静脉较
21、易穿刺成功。也可从耳缘静脉注入，方法同兔耳，但有时较难成功。必要时可在胫前部将皮肤切开一小口，暴露胫前静脉，然后直接穿刺血管。注射量不超过2ml。5兔5.1灌胃法如用兔固定箱，一人可操作。右手将开口器固定于兔口中，左手插入导尿管。如无固定箱，需两人合作进行。助手左手固定兔身及头部，右手将开口器横放于兔口中，将兔舌压在开口器下面。双手固定开口器。术者将导尿管开口器中央小孔慢慢沿上腭避插入食道约15cm。为避免误入气管，可将胃管的外口端放入水中，如有气泡从胃管口逸出，说明已插入气管，应拔出重新插入。若无气泡逸出，则用注射器将药液灌入，并注入少量空气，将导尿管中残存的药液全部注入胃中。灌胃完毕后
22、，先拔出导尿管，再拿出开口器。5.2腹腔注射法参照小鼠腹腔注射法5.3静脉注射法兔静脉注射法一般选用耳缘静脉。如两人合作，一人固定兔身。如一人操作则用途固定箱。兔耳外缘的血管为静脉，中央的血管为动脉。先剪去注射部位的兔毛，用手指弹耳缘静脉部皮肤是血管扩张。以左手食指和中指夹住静脉的近端，右手持带有针头的注射器，尽量从血管远端刺入血管。注射时针头刺入血管，针头刺入血管后再稍向前推进，以手指固定针头，放开食指和中指，轻轻推动针栓，若无阻力和局部皮肤发白隆起现象，即可注药。若推药有阻力或发现皮肤发白隆起，表示针头在血管外，这时应将针头稍退回，再重新穿刺血管。注射完毕后，用棉球压住针眼，将针抽出。
23、注射量0.52.5ml/kg。6犬6.1灌胃法将木制开口器横放在犬上下门齿间固定，经开口器之小孔插入导尿管向前插入食道。将导尿管另端置于水中，如无气泡逸出即可将药液注入。再注入少量空气将导尿管中残存的药液全部注入胃中。6.2静脉注射法对未经麻醉的犬，常选用前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。操作时，先将注射部位毛剪去。在静脉血管的近心端，用橡皮带绑扎肢体，使血管充盈。注射器针头向静脉血管的近心端方向刺入。回抽注射器针栓，如有回血，则证明针尖在血管内，松开橡皮绑带，即可将药液注射。七、实验动物用药量的确定及计算方法1实验动物用药量的确定在观察一种药物的作用时，一个重要问题是如何确定给动物的
24、剂量。剂量太小，作用不明显，剂量太大，又可能引起动物中毒致死。通常可以按下述方法确定剂量：(1)先用小鼠粗略地探索中毒剂量或致死剂量，然后选用致死量的若干分之一为初试剂量，一般可取11015。(2)根据参考文献提供的相同药品的剂量确定应用剂量。化学药品可参考化学结构相似的已知药物，特别是化学结构和作用都相似的药物的剂量。植物药粗制剂的剂量多按生药折算。(3)根据动物或人的应用剂量进行动物之间或动物与人之间的剂量换算来确定初试量。(4)确定剂量后，可通过预实验观察药物的作用，根据实验的情况进行剂量的调整，如第一次实验的作用不明显，动物也没有中毒的表现(体重下降、精神不振、活动减少或其他症状)，可
25、加大剂量再次实验。如出现中毒现象，作用也明显，则降低剂量再次实验。在一般情况下，在适宜的剂量范围内，药物的作用常随剂量的加大而增强。2实验动物用药量的计算方法动物实验所用的药物剂量，一般按mgkg体重或gkg体重计算，应用时须从已知药液的浓度换算出相当于每千克体重应注射的药液量(ml)，以便给药。例：计算给体重22g的小鼠，腹腔注射0.1盐酸吗啡，按每千克体重10mg的剂量注射，应注射多少ml计算方法：小鼠每千克体重需注射10mg，注射液浓度为0.1，则盐酸吗啡溶液的注射量应为10mlkg体重，现在小鼠体重为22g，应注射0.1盐酸吗啡溶液的量为22/1000x10=0.22ml
26、。在动物实验中有时需要根据药物的剂量及药物的某种给药途径的容积计算配制溶液的浓度。例：给家兔静注苯巴比妥钠80mg/kg，注射量为1ml/kg，应配制苯巴比妥钠的浓度是多少？计算方法：80mg/kg药物相当于体积1ml/kg，因此1ml药液中应含有苯巴比妥钠80mg，换算成百分比浓度1：80=100：x，x=8000mg=8个，即100ml中含有8克，应配成8%的苯巴比妥钠。3人与动物及各类动物间药物剂量的换算方法在动物实验中，人与动物及动物之间对同一药物的耐受性是相差很大的。常需要进行换算。换算的方法通常按体重或体表面积进行。31按体重换算已知a种动物每千克体重用药剂量，欲计算b种动
27、物每千克体重用药剂量时，可先查附表，找出折算系数，再按下面公式计算。b种动物剂量（mg/kg）=折算系数xa种动物剂量（mg/kg）例已知某药对小鼠的最大耐受量为10mg/kg，推算2.5kg家兔的用药量。查表a种动物为小鼠，b种动物为兔，交叉点值为0.37，家兔用药量为0.37x10mg/kg=3.7mg/kg，2.5kg家兔的用药量为2.5x3.7mg/kg=9.25mg3.2按体表面积换算研究资料证明药物在不同种属动物体内的血浓度和作用与体表面积成平行关系，因此认为按按体表面积换算剂量比体重折算更为精确。3.2.1由动物用量推算人的用量已知某药给家兔注射的最大耐受量为2mg/k
28、g，推算人的最大耐受量是多少？查表1-2得知一个50kg的人的体表面积相当于1.5kg家兔的12.2倍。1.5kg家兔的最大耐受量是1.5x2mg/kg=3mg/kg，那么，人的最大耐受量为3x12.2=36.6mg。3.2.2由人用量推算动物的用量已知某种药每次口服20克有效，想用狗观察其作用，应用多少量？查附表得知，一个12kg狗的体表面积相当于50kg的0.37倍。那么狗的用量为20x0.37=7.4克。八、几种常用实验动物的麻醉方法在急、慢性动物实验中，手术前均应将动物麻醉，以减轻或消除动物的痛苦，保持安静。实验动物麻醉方法主要有如下几种。1吸入麻醉药理实验中常用的吸入麻醉剂是
31、和反射影响小，故较适合于心血管药物实验。几种常用注射麻醉剂的参考剂量见表13。3局部麻醉局部麻醉通常用1-2普鲁卡因溶液在手术部位做皮内注射和皮下组织浸润注射。局部麻醉主要用于实验要求全身浅麻醉或清醒动物时减轻动物疼痛。九、实验动物的取血方法1小鼠和大鼠（1）尾尖取血：这种方法适用于采取小量血样。取血前宜先使鼠尾血管充血，然后剪去鼠尾，血立即从尾尖流出。（2）球后静脉丛取血：左手指按鼠眼睛后使眼球轻度突出，眼底球后静脉丛就瘀血。右手取一特制的玻璃吸管或连有注射器的粗钝针头，做血象检查时可用血细胞吸管，沿着内眦眼眶后壁刺入，轻轻转动再缩回，血液自然进入管内。在得到所需要的血量后，抽出吸管或注
32、射针头。(3)心脏取血：左手抓住鼠背及颈部皮肤，右手持注射踞，在心尖搏动最明显处刺人心室抽出血液。也可从上腹部刺入，穿过横膈膜及心室取血。动作宜轻巧，否则取血后动物可能死亡。(4)断头取血：如在实验结束时取血，可剪去鼠头或剪断一侧颈总动脉收集自颈部流出的血液。2兔和豚鼠(1)兔耳缘静脉取血：局部去毛，用电灯照射加热或用酒精棉球涂擦，使静脉扩张。用粗针头将静脉刺破或刀切口后让血自然滴入已放抗凝剂的试管中。(2)心脏取血；将动物仰卧，在心尖搏动最明显处将针与胸壁垂直刺入胸腔，当持针手感到心脏搏动时，再稍进针即人心脏。然后抽出血液。取血时，针头宜直人直出，勿在胸腔内左右探索。3狗(1
33、)前肢皮下头静脉取血；剪毛后，助手压迫血管上端或用橡皮带扎其上端，以左手二指固定静脉即可用注射器针头刺入取血。(2)后肢小隐静脉取血：取血方法同前肢皮下头静脉。十、实验动物的处死方法实验结束后，常须将动物处死，常用的方法如下：1颈椎脱臼法本法适用于小鼠和大鼠，用镊子或手指压住小鼠的后头部，捏住鼠尾，用力向上牵拉，使之颈椎脱臼死亡。2空气栓塞法用注射器将空气急速注入静脉，可使动物发生栓塞而死亡。兔与猫可注入空气2030ml，犬可注入空气70150ml。3化学药物致死法皮下注射士的宁致死：小鼠为0.752.0mg/kg,大鼠为3.03.5mg/kg豚鼠为3.04.5mg/kg。静脉注射氯化钾致心
34、跳停止而死亡，每只兔静脉注射10%氯化钾溶液510ml，每只犬静注2030ml。4大量放血法处死犬时常用此方法。操作时在股三角区横切约locm长切口，切断股动脉和股静脉，立即血液喷出此时可同时用自来水冲洗，保持切口处通畅。动物可在35分钟内死亡。5其他方法蛙类可断头处死，也可用探针经枕骨大孔破坏脑和脊髓处死动物。鼠和兔可用木锤用力击打头部致死。第三章实验项目实验一药代动力学参数测定水杨酸钠血浆半衰期的测定【实验目的】掌握用分光光度法测定水杨酸钠(sodiumsalicylate)的血药浓度，并学会用公式计算半衰期（half-life,t1/2）。【实验原理】水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸
35、(salicylicacid)，与三氯化铁生成种紫色络合物（comolescompound）。将该络合物在520nm波长下进行比色，其光密度与水杨酸浓度成正比。【实验对象】家兔，体重2.03.0kg。【实验器材和药品】722分光光度计、离心机、50ml烧杯、离心管、加样器(1000l)、试管、试管架、记号笔、兔手术台、手术器械一套、动脉插管、注射器(2m1、5ml、loml)、bl-420生物机能实验系统；1o水杨酸钠溶液、0.02水杨酸钠标准液、10三氯醋酸(trichloroacticacid)溶液、10三氯化铁(trichlorideferric)溶液、1肝素（heparine
36、）生理盐水、20乌拉坦（urethane）溶液等。【实验步骤和观察项目】1.每组取兔一只，称重，腹腔注射乌拉坦1个/kg，待麻醉后将其固定在兔手术台上。2.颈总动脉插管：在颈部正中气管上方将皮肤剪纵向开口，用止血钳钝性分离皮下筋膜及肌肉组织，将气管暴露，在气管旁肌肉深层可见较粗大的颈总动脉，将其与周围的组织分离，然后将充满肝素生理盐水的动脉插管插入，固定确切。由颈总动脉缓慢注入1肝素生理盐水(1mlkg),防止凝血。3.取试管5只编号，各管中加入10三氯醋酸溶液3.5ml。4.由颈总动脉放血2ml，分别放于1号管（标准管）和2号管（对照管）内各1.0ml,摇匀静置。5.由耳缘静脉缓慢注
37、射10水杨酸钠溶液(2m1kg)，给药后开始计时。6.给药后lomin、30min、60min、90min、120min、180min、240min，先后取血lml，分别置于3-9号试管内，摇匀静置。7.以0.02水杨酸钠标准液lml放入1号管内，其余各管加入蒸馏水(distilledwater)lml，摇匀。8.将9支试管离心5min(2000转/分)，精确吸取上清液3.0ml，分别放入另一编号的试管中，每管加10三氯化铁溶液0.5ml，摇匀显色。9.在分光光度计520nm波长下以2号管为对照管测定其余各管的光密度值。10.由标准管的光密度值(y)和浓度(x)求比值k，即k=
39、分摇匀离心5min取上清液3ml0.5ml2号(对照管)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml3号(10min)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml4号(30min)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml5号(60min)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml6号(90min)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml7号(120min)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml8号(180min)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml9号(240min)3.5ml1.0ml1.0ml0.5ml【注意事项】1试剂勿污染。加试剂要按照顺序进行。2每次采血应放掉少量管道残留血。3样品震
41、822g，各半。实验前禁食12h，不禁水。【实验器材和药品】计算器，电子秤、量筒(10ml)、注射器(1ml)、小鼠笼；盐酸普鲁卡因(procainehydrochloride)溶液。【实验方法】寇氏法【实验条件】1剂量必须按等比级数（剂量对数按等差级数）分组。2各组动物数应相等。3反应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率（pn）应为0，最大剂量组的死亡率（pm）应为100%。如果pn20%或pm80%需要用校正公式计算。【实验步骤和观察项目】(一)预备实验1探索剂量范围根据经验或文献找出动物100及0死亡的剂量，即上下限剂量(dm、dn)。对于无毒性参考资料的药物，一般先配制最大
42、浓度药剂，然后按等比关系(如2：1)稀释成多个剂量。方法是，每组取410只小白鼠，按估计剂量给药，如果全死则降低剂量，如果全活则增加剂量，进而确定出dm，dn。2确定组数、计算各组剂量(1)组数(g)：5-8组。(2)各组剂量：各组剂量要按等比级数排列，按下列公式求出公比r：r=(g-1)dm/dn按公比求各组剂量：d1，d2，d3，d4，d5，dm。其中d1=dn=最小剂量，d2=d1.r，d3=d2.r，dm=dn-1.r3配制等比稀释溶液要求各小白鼠给药容积一样，为0.10.2ml/kg，按下列公式计算浓度：c母=dm/等容注射量(二)正式实验1分组编号随机将小白鼠
43、分为五组，每组10只，各半。2始药分别将配制好的等比稀释液按0.2ml10g由ip给药。4观察记录记录小白鼠死亡数。结果记录表组别剂量(d)(mg/kg)动物数(n)(只)死亡数(f)(只)死亡率%(p)(f/n)123456计算ld50及95可信限：ld50=lg-1xm-i(p-0.5)式中，xm=最大剂量的对数值；i=相邻两组比值的对数(lgr)；p=各组死亡率；p=各组死亡率总和。ld50的95平均可信限=ld504.5ld50.sx50其中sx50为ld50的标准误sx50=i.p(1-p)/(n-1)其中，n=各组动物数(1)启动微机，运行bl-410程序
45、愈强。有的药物还可在不同剂量下有时产生不同性质的作用。如阿托品在逐渐增加剂量时，可依次出现心悸、散瞳、腹胀、面部潮红、兴奋躁动、神经错乱等效应。同一药物的不同制剂，会引起不同的药物效应。有的药物给药途径不同，可出现不同的作用，如硫酸镁口服导泻，肌内注射或静脉滴注则有镇痉、镇静及减低颅内压等作用。两种或两种以上药物同时应用或先后应用，有时会产生一定的相互影响，如使药效加强或减弱，使毒副作用减少或者出现新的毒副作用。本实验旨在了解各种因素对药物作用的影响，并学习小鼠的不同途径给药方法。不同剂型对药物作用的影响【实验目的】比较乌拉坦不同剂型对小鼠作用的差别。【实验原理】乌拉坦（氨基甲酸乙酯）是一种常
46、用的实验动物麻醉药，其水溶液皮下注射易于吸收；乌拉坦胶浆液，因含有羧甲基纤维素，可延缓药物扩散，皮下注射后吸收速度减慢。本实验比较两种剂型乌拉坦对小鼠作用的差别。【实验对象】健康小白鼠，体重18-22g，雌雄兼用。【药品和器材】8%乌拉坦水溶液、8%乌拉坦胶浆液（含2.5%羧甲基纤维素），1ml注射器2支，5号针头2个，电子称1个，鼠笼1个，250ml玻璃烧杯2个。【方法和步骤】1.取体重相近、性别相同的小白鼠2只，编号并称重。2.1号鼠皮下注射8%乌拉坦水溶液0.15ml/10g，2号鼠皮下注射8%乌拉坦胶浆液0.15ml/10g。3.观察小鼠注射药物后的反应，记录小鼠出现步态蹒跚，
49、姿势即为翻正反射。如轻轻用手将小鼠侧卧或仰卧，超过1分钟以上小鼠不能恢复正常姿势即为翻正反射消失，是小鼠产生睡眠的客观指标。2.各项实验用的注射器及针头应注意区分，以免污染影响实验结果。3.药物注射剂量要准确。【思考题】1.了解不同剂量对药物作用的影响，在临床用药中有何意义？2.什么是药物安全范围？它对药物应用有何重要性？钡盐溶解度对药物作用的影响【实验目的】观察药物溶解度对药物作用的影响。【实验原理】钡盐分为可溶性钡盐和不溶性钡盐，钡盐的毒性与其溶解度有关。可溶性钡盐如氯化钡等，口服后可吸收迅速，可引起实验动物中毒死亡，是剧毒物质。不溶性钡盐如硫酸钡等不溶于水，口服不吸收，无毒，对实验
50、动物正常活动无影响。过多钡离子吸收入血后，可对骨骼肌、平滑肌等组织产生过度刺激和兴奋作用。严重中毒可出现低钾症候群，导致四肢瘫痪，心律失常，呼吸麻痹而死亡。【实验对象】健康小白鼠，体重18-22g，雌雄兼用。【药品与器材】5硫酸钡和5氯化钡溶液，1ml注射器2支，小鼠灌胃针头2个，电子称1个，鼠笼1个，250ml玻璃烧杯2个。【方法和步骤】1.取体重接近、性别相同的小白鼠2只，分别称重、编号。2.1号小鼠经口灌胃5硫酸钡0.5ml，2号小鼠经口灌胃5氯化钡0.5ml。3.观察并比较两鼠给药后呼吸和肌张力变化情况，并分析原因。【实验结果】鼠号药物剂量(ml/只)呼吸频率肌张力1
51、号2号【注意事项】灌胃时不能误入气管，否则将引起小鼠窒息死亡。硫酸镁不同给药途径对药物作用的影响【实验目的】观察不同给药途径对药物作用的影响。【实验原理】硫酸镁口服不易吸收，可至肠内高渗，减少水分吸收，刺激肠蠕动而产生致泻作用；而注射给药可使血液中mg2浓度升高，可使骨骼肌松弛，同时对中枢神经和心血管系统产生抑制作用，因此产生抗惊厥及降压效果。【实验对象】健康小白鼠，体重18-22g，雌雄兼用。【药品与器材】10%硫酸镁溶液，1ml注射器2支，灌胃针头1个，5号针头1个，250ml玻璃烧杯2个，电子称1个，鼠笼1个。【方法和步骤】1.取体重接近、性别相同的小白鼠2只，分别称重、编号。2.1
52、号小白鼠腹腔注射10%硫酸镁溶液0.5ml，2号小白鼠经口灌胃10%硫酸镁溶液0.5ml。3.观察并比较两鼠呼吸频率、肌张力、排便情况有何不同，并分析原因。【实验结果】鼠号给药途径剂量(ml/只)呼吸频率肌张力排便情况1号2号【注意事项】灌胃方法要正确，如果刺破食道或胃壁，药物可能进入胸腹腔，则效果同腹腔注射，会导致实验失败。实验四有机磷酸酯类农药急性中毒的解救【实验目的】1.观察有机磷酸酯类农药急性中毒后出现的症状和体征。2.观察阿托品和典解磷定对急性有机磷酸酯类农药中毒的解救效果，并比较两药解毒作用原理和作用特点。3.学习全血胆碱酯酶活性的测定方法。【实验原理】有机磷酸酯类农