细胞培养常见问题解答

一、细胞培养过程中常用的基础培养基有哪些?

MEM、DMEM、F12K、DMEM/F12、α-MEM、PRMI1640、L-15、McCoy’s5A等。

二、储存在冰箱中的培养基,在放置几天后颜色变紫是什么原因?

培养基保存在4℃条件下,培养基内的CO2会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性,而培养基中酸碱指示剂(通常为酚红)的颜色也会随着碱性增加而偏紫。培养基偏碱性将会造成细胞生长停滞或死亡。可以在使用前旋松瓶盖(用于培养箱与培养基瓶中气体交换),在CO2培养箱中孵育培养基10-15分钟,来校正溶液PH值。

三、血清中可能出现的沉淀物是什么?

1.纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。

2.磷酸钙。它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此常被误认为是微生物污染。

3.胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。

四、/什么是热灭活,有必要作热灭活吗?

热灭活是指以56℃,30分钟水浴处理已经解冻的血清,使血清中的补体灭活。以往公认的操作中,培养的血清通常是经过热灭活的,但是并没有确凿的证据说明这样做是有益的,虽然灭活有可能降低支原体的滴度,但灭活能够消除支原体的论点还不能算是成立。另外,经过灭活的血清,颗粒状沉淀物会显著增加。

五、细胞生长缓慢是什么原因?

1.生长培养基使用不当;建议按照生产商的建议,使用与细胞相对应的培养基。

2.生长培养基中血清质量差;建议更换其他品牌或者其他批次的血清。

4.换液过于频繁;降低换液频率,参考生产商推荐的换液频率。

5.细胞生长超过汇合状态;哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数其、未达到汇合状态时进行,建议密度80%传代。

6.细胞状态不佳,传代次数过多;使用传代次数较少的健康细胞。

7.支原体污染;弃掉原有细胞及培养基,重新复苏代数比较低的细胞。

六、细胞复苏后存活率低是什么原因?

1.细胞冻存不当;首先要确保冻存细胞前细胞的状态良好,严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞,冻存过程中液氮灌中液氮充足,不在冰箱里面长期存放细胞。

2.复苏方法不当;严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞,确保冷冻细胞解冻迅速。

3.处理细胞时动作不够轻柔;冻存和复苏过程对大多数细胞会造成不利影响,应进行低速离心。

4.冻存液中保护剂存储不当;没有避光细胞冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质,应及时更换。

七、培养基PH值变化迅速是什么原因?

1.培养箱CO2分压设置错误,根据培养基中的NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/l时,应相应地使用5%-10%的CO2分压。

2.细胞培养瓶瓶盖过紧将瓶盖旋松1/4圈。

3.碳酸氢钠缓冲系统缓冲能力不足,加入HEPES缓冲液,使其终浓度为10-25mM。

4.细菌、酵母或者真菌污染,将细胞和培养基灭菌处理后丢弃。

八、微生物污染有那些独有的特点?

1.PH突然改变,细菌污染的大多数情况是PH降低,酵母污染时PH很少改变,只有在污染严重时PH才会改变。真菌污染有时会出现PH上升。

2.培养基出现云雾状,有时表面出现片层或者泡沫状,或在生长表面出现点状物,当移动培养瓶时它们会消失。

3.细菌污染时,在低倍镜下(约100倍)可见细胞之间的空隙处有细沙状的颗粒物。酵母污染则显示有分散的圆形或卵形的颗粒,并可能出芽长出更小的颗粒,真菌污染会产生细的纤维状菌丝体或有时产生密集的孢子,随着毒性加重,细胞坏死越来越明显。

4.在高倍镜下(约400倍),有可能分辨出细菌个体,并可区分出杆菌或球菌。

THE END
1.下列关于细胞工程的叙述,错误的是()A.采用茎尖组织培养技术获得的...3.蓝细菌中的ictB蛋白能高效转运和浓缩CO2从而提高细胞光合速率,我国科学家构建了叶片特异性启动子Cab(叶绿体捕光色素蛋白Cab基因启动子)驱动的蓝细菌ictB基因表达载体,并通过农杆菌转化法获得了转ictB基因水稻,大大提高了水稻的产量。在ictB基因载体的构建中,含Cab启动子和ictB基因的重组DNA分子和Ti质粒的酶切位点...https://www.jyeoo.com/shiti/10a68bff-1509-4d15-a584-8d965e725526
2.2023年四川省八一康复中心(四川实复医院)考核招聘专业技术人才...诊断为先兆早产住院保胎,在护理中最佳的体位是A.右侧卧位B.左侧卧位C.半卧坐位D.仰卧位【答案】:B10.肝硬化患者意识不清,不能用肥皂水灌肠的原因是A.肥皂水灌肠引起腹胀B.肥皂水灌肠可使血氨浓度增加C.可能发生水肿D.肥皂水易造成肠穿孔【答案】:B11.下列关于热敷的说法,错误的是A.若热敷部位有伤口,应先...https://www.renrendoc.com/paper/361812562.html
3.临床医学检验临床免疫:细胞生物学找答案(每日一练)题库试看结束后微信扫下方二维码即可打包下载完整版《★临床医学检验临床免疫》题库 手机用户可保存上方二维码到手机中,在微信扫一扫中右上角选择“从相册选取二维码”即可。题库试看结束后微信扫下方二维码即可打包下载完整版《临床医学检验临床免疫:细胞生物学..http://www.91exam.org/exam/87-4526/4526688.html
4.医学检验技术(副高)每日一练(2024/11/22)考试试题【单选题】剧烈运动后白细胞升高的主要原因是() A、分裂池细胞进入成熟池增多 B、成熟池细胞进入储备池增多 C、储备池细胞进入边缘池增多 D、边缘池细胞进入循环池增多 E、循环池细胞进入组织固有池增多 点击查看答案 【单选题】目前实验室用于血钾测定的首选方法是() A、终点法 B、连续监测法 C、免疫透射比浊...https://www.netkao.com/yxjyfg/Artle/20241122/246920713423.html
5.中科院国科大612生物化学与分子生物学真题(20072021)6. 在原核细胞中,起始密码子AUG 可以在mRNA 上的任何位置,但一个mRNA上只有一个起始位点。 7. 蛋白质生物合成过程中,tRNA 在阅读密码时起重要作用,他们的反密码子用来识别mRNA 上的密码子。 8. 单糖都含有手性碳原子,因而都具有旋光性。 9. 青霉素通过抑制转肽干扰新的细胞壁形成而起抑菌作用。 http://m.kaoyanniao.com/h-nd-1221.html
6.人体解剖生理学教案郑州师范高等专科学校:人体解剖生理学(一)细胞、组织、器官、系统的概念 (二)描述人体姿势、方位等常用解剖学术语 1、解剖学姿势(标准姿势:身体直立,两眼向正前方平视,两足并拢,足尖向前,上肢下垂于躯干两侧,掌心向前。 2、方位 上、下 前、后 深、浅 内、外 内侧、外侧 近端、远端 http://read.cucdc.com/cw/82621/67096.html
7.植物生长环境与调控(3期)超星尔雅学习通网课答案21、【判断题】植物体形态结构的基本单位和生命活动的基本单位叫细胞。22、【判断题】一个母细胞经有丝分裂产生两个子细胞,每个子细胞的染色体数目和母细胞一样。23、【判断题】具有调节细胞吸水、储藏物质的细胞器是线粒体。24、【判断题】分生组织最大特点是其细胞有分裂能力。25、【简答题】说明植物细胞有丝...http://nanning.ehqc.cn/timu/75_52.html
8.2018级口腔医学专业人才培养方案(二)能力要求 1.能进行常规的口腔检查和病历书写。 2.能完成口腔疾病病史采集。 3.能初步对龋病、牙髓病、牙周病及口腔黏膜病进行诊疗。 4.能完成口腔局麻及拔牙操作。 5.会牙体缺损、牙列缺损和牙列缺失的修复设计及牙体预备。能对错 畸形进行初步检查和诊断。 https://jwc.wfhlxy.com/info/1023/1373.htm
1.“线粒体功能障碍+乳酸化+细胞衰老”轻松拿下EurHeartJ(1)发现TRAP1敲低确实降低了衰老VSMC中的乳酸产量,同时补充乳酸可以逆转TRAP1敲低引起的衰老现象,包括衰老标志物的减少和细胞增殖能力的提升。 (2)糖酵解抑制剂和乳酸脱氢酶的抑制也显著降低了乳酸水平,并减轻了VSMC的衰老表现,进一步支持乳酸积累与TRAP1诱导衰老之间的关系。 http://www.shdaweike.com/Article-3868608.html
2.2015临床助理医师考试巩固练习试题第十四套B.动脉血氧分压降低 C.血氧饱和度降低 D.组织细胞利用氧障碍 E.血氧含量正常 [答案] A [题解]此类缺氧是由于血红蛋白数量减少或性质改变,以致血氧含量降低,主要特点是动脉血氧分压及血氧饱和度正常、血氧容量降低,从而导致血氧含量减少。 4.低氧血症是指 ...https://www.hqwx.com/web_news/html/2015-2/201502101014391185.html
3.植物生理学小结(精选3篇)呼吸作用产生的电子和质子沿着电子传递途径传到氧,结合形成水。与此同时也进行氧化磷酸化,形成ATP,即电子传递给氧的过程中,消耗氧和无机磷酸,把能力积存与ATP中。电子传递和氧化磷酸化是植物进行新陈代谢,维持生命活动的最关键反应,缺一即影响呼吸,甚至植物死亡。 https://www.oh100.com/bg/a/201611/478516549449.html
4.教案组织细胞在安静或活动时,都有生物电表现。 采用微电极进行细胞内电位记录方法可对其加以研究。 (一)细胞的静息电位 1、静息电位现象 静息电位是指细胞未受刺激时,存在于细胞膜内外两侧的电位差。 极化状态:膜内带负电而膜外带正电的状态,简言之即内负外正的状态。 https://pharm.suda.edu.cn/pharm_bkjx/24911/list.htm
5.HCN阻碍生物氧化过程,使细胞不能利用氧,造成内窒息。刷刷题APP(shuashuati.com)是专业的大学生刷题搜题拍题答疑工具,刷刷题提供HCN阻碍生物氧化过程,使细胞不能利用氧,造成内窒息。A.正确B.错误的答案解析,刷刷题为用户提供专业的考试题库练习。一分钟将考试题Word文档/Excel文档/PDF文档转化为在线题库,制作自己的电子错https://www.shuashuati.com/ti/00f9d8b1ec2d4c3ebd03e22d04332671.html?fm=bdbdsb64fa4ad4f1de65ed3be9a359416ca02
6.缺氧的类型原因机制:贫血、一氧化碳中毒、高铁血红蛋白血症、Hb与氧的亲和力异常增强。 3.循环性缺氧:由于血液循环障碍,组织血流量减少引起的组织供氧不足,又称为低动力 性缺氧。 原因机制:全身血液循环障碍、局部性血液循环障碍。 4.组织性缺氧:由于各种原因引起生物氧化障碍,使组织、细胞利用氧的能力降低引起缺 氧。 https://www.med66.com/binglixuejishi/ziliao/gg1804178997.shtml
7.药食同源,内养外护,knowyoumore,knowhealthmore,knowbeauty...维生素A属于脂溶性维生素,对上皮细胞的保护以及免疫系统十分重要,脂溶性维生素必须在有油脂的环境中才能被人体吸收利用。维生素E,维他命E、生育酚、产妊酚,是最主要的抗氧化剂之一。在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。常被用于乳霜和乳液中,对于受到如烧烫伤的伤害后,能促进皮肤愈合及减少疤痕形成。维生素C,又称...https://book.douban.com/review/14645442/
8.[渝粤教育]中南大学病理生理学参考资料D、病理障碍 E、病理过程 参考资料【 】 3、【单选题】健康是指 A、没有躯体疾病 B、体格健全 C、没有烟、酒等不良嗜好 D、躯体上、精神上和社会适应上的完好状态 E、社会适应能力强 参考资料【 】 4、【单选题】疾病是指 A、在致病因素作用下躯体上的不良状态 ...https://blog.csdn.net/szbnjyedu/article/details/122847937
9.缺氧的整体认知:概念血氧指标及缺氧的类型导读:机体组织细胞因氧的供给不足、氧的运输障碍或组织对氧的利用机能降低,从而导致组织细胞代谢、功能和形态结构发生异常变化的病理过程称为缺氧。 动物机体在生长、发育、繁育等生命活动过程中,都需要不断消耗能量,而能量来源于机体细胞内所进行的糖、脂肪、蛋白质等营养物质的生物氧化。而氧则是这些生物氧化过程中...https://www.cloudvet.org/mapi/article/764?id=764